A system was established for induction of multi-shoots and plant regeneration from mesophyll protoplasts of alfalfa, Medicago sativa L. cv. Vernal. Different hormonal effects were tested at each step of protoplast culture, i.e. cell division in modified Kao's liquid medium (K566-7). calli formation on SH semi solid medium, and multi-shoot regeneration from calli on SHa and SHb solid media. Frequency of multi-shoots and plant regeneration was affected by various combinations of phytohormones in final step. The evaluation of multi-shoots induction systems via protoplast culture was discused.
Effect of dual inoculation with vesicular-arbuscular(VA) mycorrhizal fungi, Glomus mosseae, and Rhizobium meliloti R455 on growth, nodulation, and nitrogenase activity of alfalfa (Medicago sativa L. cv. Vernal) were examined in pot experiment. After 63 days growth, shoot length, number of leaf, and leaf size of alfalfa were increased as as result of dual inoculation with Glomus mosseae and Rhizobium meliloti. Total dry weight of alfalfa plant was increased 1.4 times compared to single inoculation with Rhizobium meliloti. Nodule number and mean fresh weight of nodule per plant were also increased due to the mycorrhizal infection.
In this study, natural emulsifiers were extracted from Medicago sativa L. and Sapindus saponaria L. The extraction yield using CCD-RSM and the extraction process of foaming stability of the extracted product were optimized and 95% confidence interval was used to confirm the statistical reasonableness of the optimization. Herein, independent parameters were the ethanol volume and extraction temperature, whereas reaction parameters were the extraction yield and foaming stability. Under the condition of 53.5 vol% ethanol and extraction temperature (70.9 ℃), the maximum yield and foaming stability of the extracted product from Medicago sativa L were predicted as 26.2 wt% and 44.5%, respectively. In the case of the extraction from Sapindus saponaria L, the maximum yield and foaming stability were expected to be 31.9 wt% and 47.5% under the optimized conditions including 60.4 vol% of ethanol and extraction temperature (72.4 ℃). The average experimental error for validating the accuracy was about 3.4(± 0.3)% and 5.0(± 0.04)% for the extraction processes from Medicago sativa L. and Sapindus saponaria L., respectively.
Journal of The Korean Society of Grassland and Forage Science
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v.24
no.1
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pp.21-24
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2004
To determine lethal temperature of alfalfa (Medicago sativa L. cv Vernal) at heat-stressed conditions, seedlings grown in a small pots for 4 weeks were subjected to different temperature regimes of heat treatment. No apparent demage was observed when the plants were treated at 45, 50 or $60^{\circ}C$ for 1 h. Heat treatments at 60 and $65^{\circ}C$ for 1 h, several plants were withered and showed damage symptom on their leaves. When the plants were exposed to $70^{\circ}C$ for 1 h, most of leaves were severely withered, but it was not lethal conditions for the whole plants. By contrast, most of plants were died within one day after heat treatment at $80^{\circ}C$ for 1h. Furthermore, plants exposed to $80^{\circ}C$ for 50 min were also died within 7 days. It was found that new shoots were regenerated from the plants that had been treated at $80^{\circ}C$ within 45 min. These results indicate that heat treatment at $80^{\circ}C$ for 50 min is an optimum condition to distinguish the lethality of alfalfa plants. Simple viability assay system established in this study will be useful fer selection and characterization of heat-tolerant transgenic alfalfa plants.
An efficient plant regeneration system in alfalfa (Medicago sativa L.) through somatic embryogenesis was established. Embryogenic callus was obtained by culture of hypocotyl segments on MS medium with 0.02mg $L^{-1}$ IAA and 1.0mg $L^{-1}$ zeatin after 45 days of culture. Embryogenic calli were converted to the somatic embryos when transferred to either MS medium without plant growth regulators (PGRs) or MS medium containing various cytokinin (BA, kinetin and zeatin). Most of the somatic embryos were developed into plantlets on MS medium supplemented with 0.1 mg $L^{-1}$ kinetin. Also, secondary embryos appeared on the surface of primary embryo but they showed abnormal growth. Regenerated plantlets were transplanted to pots containing vermiculite and perlite for further analysis.
Effect of inoculation trial on plant height and dry matter yield of seven alfalfa varieties (Medicago sativa L. var. Washoe, Ranger, Lahontan, Narragensett, Atlantic, Vernal, and Moapa 69) which are considered to be well adapted in these areas were conducted during 1973-1974 in a relatively poor soil at the field station in Kyung Hee University. Root nodule bacteria: Rhizobium meliloti (Noculator Northrup Kings Co. Ltd) was applied at a rate to provide 6 oz/30l of alfalfa seeds. Seven varieties were seeded in pots on May 31, 1973 and in second year, they were transplanted in field. 1. Dry matter yield and plant height of all inoculation plots were significantly greater than those of the no inoculation plots in all varieties. 2. In the 1973, dry matter yield of inoculation plot a in pot experiment was in the order of Moapa 69> Vernal> Lahontan> Washoe> Atlantic> Narragensett> Ranger. 3. There was no difference in dry matter yield between with and without-inoculation after transplanted in a field in the second year (1974). Total dry matter yield of varieties was in the order of Washoe> Lahontan> Moapa 69> Ranger> Narragensett> Vernal> Atlantic.
An experiment with alfalfa (Medicago sativa L.) plants was designed to investigate the changes in non-structural carbohydrate (NSC) contents and the activities of amylolytic enzymes during a regrowth period following defoliation. Sampling from hydroponic grown-plants were carried out at intervals during 24 days of regrowth. Shoot regrowth was very slow during the first 10 days and root growth was depressed after defoliation. Defoliation induced a great decrease in both total sugar and starch contents in taproots during the first 10∼14 days. A major recovery of NSC occurred from day 15. Averaged over sampling dates, the activity of exo-amylase was about 400-fold higher than that of endo-amylase. Exo-amylase activity in defoliate plants slightly increased until day 6 (maximum level) and then decreased. Endo-amylase rapidly increased for the first 4 days after defoliation and slightly increased afterwards to a maximum on day 24. These results showed that increase in amylolytic enzyme activity in taproots coincided with the time of starch utilization during regrowth and that indicated it plays an important role in starch degradation.
To investigate the effects of seed treatments and liming on nodulation and growth of lucerne(Medicago sativa L.) in an upland yellow-brown earth in N.Z. the five levels of seed treatments(Uninoculated, Inoculated, Inoculated plus lime pelleted, Inoculated plus 50/50 phosphate/dolmite pelleted, Inoculated plus ta1c pelleted), and 2 levels of lime applications (0, 25kg/10a) were compared and their interactions were observed, and then the following results were obtained. 1. In oder to obtain the effective nodulation of lucerne on acid soil it is usually necessary to apply lime and inoculate the seed. 2. The coating of inoculated lucerne seed with adequate materials will promote the nodulation. 3. The pelleting of lucerne seed may be a of reducing the need for the heavy liming. 4. The finely grounded lime was the best to use origin upland yellow-brown earth. 5. When the seed were not inoculated or pelleted with inferior material, liming is very effective for the nodulation and growth of lucerne. 6. The pelleting seed will reduce the laborious work and expenditure.
Journal of The Korean Society of Grassland and Forage Science
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v.13
no.1
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pp.7-15
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1993
Nitrogenous and non structural carbohydrate compounds in the remaining tissues of 10 weeks old alfalfa (Medicago sativa L.) grown in hydroponic culture, were analysed during 24 days of regrowth following shoot removal. The dry weights of the remaining organs were not significantly changed for 10 days following shoot removal. Compared with uncut plants, defoliation drastically depressed root growth, in particular that of taproot. During 6 days of regrowth, nitrogen contents in all remaning organs significantly decreased. Nitrogen loss in this period was pronounced in root system. Nitrogen contents in each organ after 24 days of regrowth in defoliated plant were recovered completely or exceeded initial level. Amino acid-N was the most readily available form of nitrogen while protein-N was the largest storage pool. The tap root contained about 51.0% and 33.4%, respectively, of the total starch and total ethanol-soluble sugar contents. The starch content of tap roots initially exceeded 40.7 mg. plant$^{-1}$ (day 0), and then declined to the minimum level on day 14. This result clearly showed that the tap root is the major storage site for metabolizable nitrogen (protein-N and amino acid-N) and carbohydrate(starch), and that the degradation of these researves occur much actively in the early period of regrowth.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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