Furfural, an organic solvent, is widely used as synthetic component material in producing chemical products. However, furfural has been reported that it shows strong toxicities to human being showing intense stimulus to skin, eyes, mucous membrane and nerve system. It is also known to cause anemia, liver cirrhosis, kidney failure and genetic toxicity in the human being working in the exposed area. LD$_{50}$ of furfural for peritoneal injected mouse has been known around 20mg/kg, but the acute toxicity on aquatic organisms such as fish, daphnid or algae are not well known, compared to those on rodents. In this experiment, we studied on the fish toxicity of furfural using Japanese Medaka (Orvzias latipes) and Common Carp (Cvprinus carpio). We also observed histological changes in the fish organs. The LC$_{50}$ were 12. Smg/L in Japanese Medaka and 21.8 mg/L in Common Carp, respectively. When Common Carps were exposed to 120mg/L of furfural concentration for 30 minutes, blood congestion in gills and lysis of secondary lamella were shown. Though the muscle of caudal fin was not completely eroded, its epidermic cells were shown to be necrotic in various parts. Tissue atrophy and cell necrosis were also shown in the liver of Common Carps exposed to furfural. From these results, furfural seems to cause histological damages on liver, an internal organ as well as on external organs such as gills and fins eventhough the fish were exposed for a short-term.
Glufosinate-ammonium, a component of the herbicide Basta, is one of the most extensively used pesticides worldwide. In this study, we assessed subchronic and chronic toxicities of Basta and its histopathological effects on the marine medaka Oryzias dancena. Marine medaka were exposed to 0, 2, 4, or 8 mg/L of Basta for 28 or 42 days. The lethal concentration ($LC_{50}$) of Basta for 96 h is 8.76 mg/L. Histological changes in the gills and liver were evaluated with histopathological indices, allowing quantification of the damage to fish exposed to Basta. Blood congestion, lamellar fusion, and epithelial lifting were observed in the gills, and hydropic degeneration, fibrosis, lipid degeneration, leukocyte infiltration, and necrosis were found in the liver. These responses could be useful indicators of Basta toxicity in this species.
With the introduction of DNA microarrays, a high throughput analysis of gene expression is now possible as a replacement to the traditional time-consuming Southern-blot analysis. This cDNA microarray should be ahighly favored technology in the area of molecular toxicology or analysis of environmental stresses.In this study, therefore, we developed a novel cDNA microarray for analyzing stress-specific responses in japanese Medaka fish. In the design and fabrication of this stress specific functional cDNA microarray, 123 different genes in Medaka fish were selected from eighteen different stress responsive groups and spotted on a 25${\times}$75 mm glass surface. After exposure of the fish to bisphenol A which is the one of the well-known endocrine disrupting chemicals (EDCs), over 1 or 10 days, the responses of the DNA chip were found to show distinct expression patterns according to the mode of toxic actions from environmental toxicants. As a results, they showed specific gene expression pattern to bisphenol A, additionally, the chemical spesific biomarkers could be suggested based on the chip analysis data. Therefore, this chip can be used to monitor stress responses of unknown and/or known toxic chemicals using Medaka fish and may be used for the further development of biomarkers by utilizing the gene expression patterns for known contaminants.
해산송사리, Oryzias dancena 2배체와 유도 3배체 각 조직에서의 세포주기를 비교, 분석하였다. G1, S, G2+M기의 분포 빈도에서 꼬리지느러미인 경우 2배체에서는 85.8%, 7.6% 및 6.9%이었으며 유도 3배체에서는 91.2%, 3.6% 및 5.2%이었다. 간 조직인 경우 2배체에서는 78.4%, 10.6%, 및 11.0%이었으며 유도 3배체는 86.2%, 5.9% 및 7.9%이었다. 아가미 조직인 경우 2배체에서는 79.3%, 9.4% 및 11.3%이었으며 유도 3배체는 85.7%, 5.4% 및 8.9%이었다. 2배체와 유도 3배체에서 조직 간 세포 주기 빈도에서 유의한 차이가 있었다(p<0.05). Mitosis (체세포분열)은 유도 3배체에 비해 2배체가 더욱 활성이 있었으며, 이러한 체세포분열은 2배체와 유도 3배체 모두에서 꼬리지느러미 조직 보다는 간 조직과 아가미 조직에서 더욱 왕성하였다.
In this study, the marine medaka Oryzias javanicus was exposed to two concentrations of non-toxin-producing red tide dinoflagellate C. polykrikoides (1,000 and 2,000 cells ml-1) for 96 h, and the time-course biochemical responses of antioxidant and immunity parameters were analyzed in the liver tissue. Significant ichthyotoxicity with increasing cell concentrations of C. polykrikoides and exposure period was observed for 96 h. Opercular respiratory rate was lowered in marine medaka exposed to 2,000 cells ml-1 of C. polykrikoides. Intracellular malondialdehyde (MDA) content significantly elevated in response to both cell concentrations. In the case of glutathione (GSH) content, the levels were significantly elevated by 1,000 cells ml-1 of C. polykrikoides, but the contents significantly depleted upon exposure to 2,000 cells ml-1 of C. polykrikoides. Similarly, enzymatic activities of catalase (CAT) and superoxide dismutase (SOD) were increased by 1,000 cells ml-1 of C. polykrikoides, whereas their activities were lowered by 2,000 cells ml-1 of C. polykrikoides. Analysis of the two immunity parameters, alternative complement pathway and lysozyme, showed significantly lowered activities in 2,000 cells ml-1 of C. polykrikoides-exposed liver tissue. These biochemical effects of C. polykrikoides on marine medaka would be helpful for understanding its acute effects in marine fish.
Expressed sequence tags (ESTs) and differentially expressed cDNAs from the self-fertilizing fish, Kryptolebias marmoratus were mined to develop alternative biomarkers for endocrine-disrupting chemicals (EDCs). 1,577 K. marmoratus cDNA clones were randomly sequenced from the 5'-end. These clones corresponded to 1,518 and 1,519 genes in medaka dbEST and zebrafish dbEST, respectively. Of the matched genes, 197 and 115 genes obtained Unigene IDs in medaka dbEST and zebrafish dbEST, respectively. Many of the annotated genes are potential biomarkers for environmental stresses. In a differential display reverse transcriptase-polymerase chain reaction (DD RT-PCR) study, 56 differential expressed genes were obtained from fish liver exposed to bisphenol A. Of these, 16 genes were identified after BLAST search to GenBank, and the annotated genes were mainly involved in catalytic activity and binding. The expression patterns of these 16 genes were validated by real-time RT-PCR of liver tissue from fish exposed to bisphenol A. Our findings suggest that expression of these 16 genes is modulated by endocrine disrupting chemicals, and therefore that they are potential biomarkers for environmental stress including EDCs exposure.
Some fish live in aquatic environments with low or temporally changing $O_2$ availability. Variation in dissolved oxygen (DO) levels requires behavioral, physiological, and biochemical adaptations to ensure the uptake of sufficient $O_2$. Several species are relatively well adapted to tolerate low $O_2$ partial pressures (hypoxia). The medaka (Oryzias dancena ) is an important model organism for biomedical research that shows remarkable tolerance to hypoxia. We investigated the regulation and role of hypoxia-inducible factor-1 (HIF-$1{\alpha}$) as a general hypoxia-response gene and stanniocalcin-2 (STC2), which is one of the genes regulated by HIF-$1{\alpha}$ in mammals under hypoxia. We subjected adult male medaka to the following three acute hypoxia regimes: 1, 24, and 72 h at DO = $1.8{\pm}0.5$ ppm. The changes in STC2 and HIF-$1{\alpha}$ mRNA were monitored using quantitative real-time reverse-transcription PCR. We found strong upregulation of HIF-$1{\alpha}$ mRNA in the livers of fish exposed to hypoxia. Hypoxia rapidly upregulated STC-2 mRNA expression in muscle, but not in the brain, gills, liver, or intestine. Therefore, unlike in mammals, hypoxia might regulate O. dancena STC-2 expression in an HIF-$1{\alpha}$-independent manner.
In this research, the marine medaka Oryzias javanicus underwent a 96 h exposure to two concentrations of the red tide dinoflagellate Karenia mikimotoi (1,000 and 5,000 cells mL-1), and the temporal variations in biochemical responses related to antioxidant and immunity parameters were assessed in the liver tissue. The study revealed a significant increase in ichthyotoxicity with elevated cell concentrations of K. mikimotoi, especially evident at 96 h in marine medaka exposed to 5,000 cells mL-1. At 1,000 cells mL-1 of K. mikimotoi, the opercular respiratory rate showed a significant increase, whereas exposure to 5,000 cells mL-1 resulted in a lowered rate. The intracellular malondialdehyde content was significantly elevated in response to both cell concentrations at 96 h. Regarding glutathione content, levels were significantly increased by exposure to both cell concentrations. Catalase and superoxide dismutase enzymatic activities experienced an increase at 1,000 cells mL-1 of K. mikimotoi, while their activities were reduced at 5,000 cells mL-1 at 96 h. The analysis of two immunity parameters, alternative complement pathway and lysozyme, demonstrated significantly reduced activities in the liver tissue exposed to 5,000 cells mL-1 of K. mikimotoi. These findings aim to enhance the understanding of K. mikimotoi toxicity in marine fish by offering insights into biochemical responses associated with harmful algal blooms.
The marine medaka Oryzias dancena choriogenin H gene (odChgH) and its mRNA expression during estradiol-$17{\beta}$ (E2) exposure were characterized. At the amino acid level, the choriogenin H protein is predicted to possess the conserved repetitive N-terminal region, as well as zona pellucida (ZP) and Trefoil factor family (TFF) domains. At the genomic level, odChgH has an eight-exon organization with a distribution pattern of transcription factor binding sites in the 5'-upstream region, which is commonly found in other estrogen-responsive genes. The tissue distribution pattern of odChgH mRNA was found to be gender-specific, whereby females showed a higher expression level and wider tissue distribution than did males. During embryonic development, odChgH mRNA was robustly detected from the stage of visceral blood vessel formation. Experimental E2 exposure of males resulted in odChgH mRNA being induced not only in the liver, but also in other several tissues. The E2-mediated induction was fairly dose-dependent. The basal expression levels of hepatic odChgH mRNA were lower in males that were acclimated to 30 ppt salinity than in those acclimated to 0 or 15 ppt salinity. In contrast, the inducibility of odChgH mRNA during E2 exposure was greater in seawater-acclimated fish than in brackish water- or freshwater-acclimated fish.
The biological effects of carcinogenic polycyclic aromatic hydrocarbons (cPAHs) including benzo[a]pyrene (BaP), dibenzo[a,h]anthracene (DBA), benzo[a]anthracene (BaA), benzo[b] fluoranthene (BbF), benzo[k]fluoranthene (BkF), and indeno[1,2,3-c, d]pyrene (InP) on transcriptomic changes were determined in the liver of Oryzias latipes. Differentially expressed genes (DEGs) by binary exposure to cPAHs (BaP+BaA, BaP+BbF, BaP+BkF, BaP+DbA, BaP+InP) were screened by annealing control primers-based polymerase chain reaction followed by sequence analysis and BLAST searching. The results showed that four DEGs were commonly expressed by cPAHs and they were identified as ribosomal protein S4, coagulation factor II, elongation factor 1 beta, and a predicted protein similar to human immunodeficiency virus type I enhancer binding protein 3. This finding suggests that binary exposure to cPAHs interferes protein synthesis required for fundamental liver functions in fish.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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