The spermatogenesis and chromosome number were investigated in the pupal testes of Helicouerpa assulta Guenee by light microscopy. During the spermatogenesis, each bundle of P8(256) sperms developed by 6 mitotic and 2 meiotic spermatogonial divisions. From the early stage of spermatogenesis, it was distinguishable between two kinds of sperm differentiation, eupyrene and apyrene spermatogenesis, which are characteristic in Lepidoptera, by the differences in nuclear shape and cell distribution in immature spermatocyst. Through the followed spermiogenesis, the spermatocysts were developed into two kinds of mature cyst, a streamline-shaped eupyrene cyst with nucleated sperms of thready head or a long spindle-shaped apyrene cyst with anucleated sperms of cylindrical head. As the results off chromosomal analysis at metaphase of the spermatogonial mitosis and spermatocytic meiosis, the chromosome number were 2n=6a/n=31, respectively, and no variation between individuals.
두족류 3종(Octopus minor, Octopus ocellatus, Todarodes pacificus)의 성숙정자를 전자현미경을 통해 관찰한 결과 다음과 같았다. 팔완류인 서해박지와 주꾸미의 성숙정자 전체 길이는 각각 $390{\mu}m$와 $125\sim130{\mu}m$정도였고, 십완류인 살오징어의 길이는 $35{\mu}m$정도로 매우 짧았다. 서해낙지는 나선형의 첨체와 약간 굽은 바나나 모양의 머리를 소지하고 있었으며, 주꾸미는 꼬인 첨체와 막대 모양의 긴 머리를 가지고 있었다. 이들 침체 내강에는 규칙적 구조(periodic structure)인 많은 가로무늬가 관찰되었고, 머리의 내강에는 치밀전 (dense plug)을 형성하였다. 그러나 살오징어의 첨체는 전자밀도가 낮은 둥근 모자 모양이 였으며, 머리는 길쪽한 장타원형을 나타내었다. 특히 첨체 하단부에는 2개의 작은 강(cavity)이 관찰되었고, 이들 내강에는 전자밀도가 높은 물질들(juxtanuclear acrosomal materials)로 채워져 있었다. 3종의 성숙정자 중편은 서해낙지와 주꾸미에서 미토콘드리아가 mitochondrial sleeve를 형성하였지만, 두 종간 미토콘드리아의 수는 각각 $11\sim12$개와 $8\sim9$개로 관찰되어 수의 차이를 보였다. 반면, 살오징어는 미토콘드리아가 축사와 분리되어 mitochondrial spur를 형성하였고, 이들 spur내에는 $10\sim13$개의 미토콘드리아와 전자밀도가 높은 물질들이 밀집되어 있었다. 서해낙지, 주꾸미, 그리고 살오징어의 축사는 공히 9+2구조에 9개의 금은섬유가 둘러싸고 있었고, 살오징어의 축삭내에서만 작은 입자형의 글리코겐이 관찰되었다. 금은섬유들은 서해낙지와 살오징어에서는 꼬리의 주편까지만 관찰되었으나, 주꾸미에서는 단편에서도 관찰되었다.
The periodic changes of testis and \ulcorner션 epididymidis in Korean hibernating bats, the oriental discoloured bats (Vesportilio superans Thomas) and the Korean greater horseshoe bats (Rhinolophus ferrumequinum korak Kuroda) were studied in order to clarify the possibility of correlation between their histological findings and one of physiological facets, hibernation, and the results obtained were as follows: 1. The spermatogenic function of the oriental discoloured bats obtained in July and August was depressed although the spermatocytes showed a considerable cell proliferation. Few mature sperms were observed in the seminiferous tubules of the bat obtained in August. 2. The spermatogenic function of the Korean greater horeshoe bats obtained in September was not remalkable but a considerable number of sperms were stored in the excretory ducts which were characterized by existence of para-tubular spaces in the ductus epididymidis. 3. The spermatogenic epithelia of the Korean greater horseshoe bats obtained in December showed histologically atrophied figures. However, a vast number of sperm remained in extremely expaned luminae of the ductuc epididymidis which epithelial cells were maintained rectangular in shape. 4. These results suggest that there are periodic changes of the spermatogenic epithelia and the excretory ducts, and that those histological changes are closely related to their wintering.
In vitro fertilization have been performed to know whether the frozen semen has fertilizing ability and can be used clinically. The results of cultured and developed embryos obtained are as follows: 1. The semen was frozen in three media for the good viability. The viability was more than 50% and the motility was also moderate (grade III), 2. As the 33 oocytes were collected from 45 follicles, the oocyte recovery rate was 73.3%. Among them, mature and immature ova were 5% each, and premature ova were 69.7%, When the first polar body was appeared, above ova were inseminated after adequate incubation with activated sperms. 3. The main components of three freezing medium containing egg yolk, glycerol and pyruvate respectively were the best for sperm viability, and Ham's F-10 medium was used for the fertilization and culture of eggs. 4. The results of in vitro fertilization of 33 ova, showed the second polar body developed in 12%, polyspermia in 24%, 1-cell embryo in 21% and 2-cell embryo in 9%. One mature ova developed to blastocyst via 16-cell to 32-cell embryo. The fertilization rate was 66%. 5. Above mentioned results represent that the frozen semen has fertilizing ability and can be used practically in the clinic.
The pattern of RNA synthesis during male gametogenesis of Brassica napus was studied using 3H-uridine autoradiography. No incorporation of isotope occurred in the newly released microspore and the nonvacuolate, furrowed microspore. Peak incorporation of label during male gametogenesis occurred in the uninucleate, furrowed microspores showing various degrees of vacuolation. In this microspore stage, silver grains were localized in the nucleus and cytoplasm. Moderate incorporation of the isotope occurred in the nulceus of the vacuolated microspore. After the microspore mitosis, isotope incorporation occurred predominantly in the nucleus of the vegetative cell with little or no incorporation in the generative cell. In tricellular pollen, no incorporation of isotope was observed in both the vegetative nucleus and the sperms. Silver grains almost completely disappeared from tricellular mature pollen grains ready to germinate.
X, Y정자를 분리하여(sexing techlology)필요한 성을 조절한 배아의 연구가 아직 실용화되지 않고 있다 본 연구는 이에 대한 기초연구로서 돼지의 X 정자와 Y정자를 분리하기 위하여 불연속 percoll농도구배를 제조한 후 상층에 정액을 분주하여 120${\times}$g에서 20분간 원심분리 하였다. 분리된 각 층의 정자를 회수(7${\times}$10$^6$ sperms/ml)하여 genomic DNA를 추출한후, PCR 방법을 이용하여 Y 염색체의 성 결정 유전자(TDF)인 SRY(sex determining region of Y chromosome) 유무를 판단하였다. TCM-199배양액에 성숙시킨 난자와 분리하지 않은 정자를 대조군으로, 분리한 X 정자를 실험군으로 인공수정을 한 후 돼지 체외 수정란을 획득하였다. 체외 생산된 2세포기의 배아의 SRY 유전자를 PCR증폭하여 성 판별에 사용하였다. 불연속 percoll 원심분리 후 정자의 생존율은 95%층에서 94.4% ${\pm}$ 5.1% (P < 0.01)로써 가장 높았다. 체외수정한 결과 분리하지 않은 대조군(47.1%)보다 자성정자가 많다고 판단되는 실험군에서 수정율이 높았다(80%).불연속 percoll 원심분리 후 SRY유전자의 PCR을 실시한 결과 30%, 50%, 65%농도에서 80%, 95% 농도보다 Y 염색체 특이적인 밴드가 많이 증폭되는 것을 확인하여 상층에 Y 염색체를 가지는 웅성 정자가 많이 있으며 하층에 X 염색체를 가치는 자성정자가 많이 있는것으로 확인하였다. 또한 95% 농도 층의 정자를 인공수정한 초기배아의 자성은 66.7%로서 대조군 33.3%보다 높았다. 따라서 불연속 percoll 원심분리 후 80%, 95%층에서 X 정자가 많이 회수되고, 활동성이 증가하는 것뿐만 아니라 정자의 질도 개선할 수 있다는 사실을 알 수 있었다.
In the present study, we monitored the early development of Saccostrea kegakia subtropical oyster species distributing on rocky intertidal off the northern Jeju Island using scanning electron microscope (SEM). The female oyster collected in early August, 2012 were fully mature exhibiting relatively small eggs ($46.5{\pm}1.4{\mu}m$ in diameter) in the gonad, while testis of the mature male oysters were filled with fully developed sperms of 36.9 ${\mu}m$ in length. The fertilized eggs developed into 2-cell stage with polar body after 1 hr 20 min of fertilization, then followed by Morula stage (3 hr 20 min), Blastula stage (4 hr 50 min), Gastrula stage (7 hr), and trochophore larvae stage (9 hr 30 min). The observed early development of S. kegaki in this study was similar the early development of other oysters, although size of the fertilized eggs were somewhat smaller.
Son, Pal Won;Chung, Jae Seung;Kim, Jin Hee;Kim, Sung Han;Chung, Ee-Yung
한국발생생물학회지:발생과생식
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제18권3호
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pp.179-186
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2014
Characteristics of the developmental stages of spermatids during spermiogenesis and phylogenetic classicfication of the species using sperm ultrastructures in male Crassostrea ariakensis were investigated by transmission electron microscope observations. The morphology of the spermatozoon of this species has a primitive type and is similar to those of Ostreidae. Ultrastructures of mature sperms are composed of broad, modified cap-shaped acrosomal vesicle and an axial rod in subacrosomal materials on an oval nucleus, four spherical mitochondria in the sperm midpiece, and satellite fibres which appear near the distal centriole. The axoneme of the sperm tail shows a 9+2 structure. Accordingly, the ultrastructural characteristics of mature sperm of C. ariakensis resemble to those of other investigated ostreids in Ostreidae in the subclass Pteriomorphia. In this study, particularly, two transverse bands (stripes) appear at the anterior region of the acrosomal vesicle of this species, unlike two or three transverse bands (stripes) in C. gigas. It is assumed that differences in this acrosomal substructure are associated with the inability of fertilization between the genus Crassostrea and other genus species in Ostreidae. Therefore, we can use sperm ultrastructures and morphologies in the resolution of taxonomic relationships within the Ostreidae in the subclass Pteriomorphia. These spermatozoa, which contain several ultrastructures such as acrosomal vesicle, an axial rod in the sperm head part and four mitochondria and satellite fibres in the sperm midpiece, belong to the family Ostreidae in the subclass Pteriomorphia.
1992년 5월부터 1993년 8월까지 부산 수영만 인근해역에서 채집된 망상어, Ditrema temminck의 교미 및 임신과 관련된 사항을 조직학적으로 조사한 결과는 다음과 같다. 교미시기에 성숙한 수컷은 뒷지느러미 연조의 좌우 기저부에 각각 하나씩 교미기가 돌출된다. 교미에 참여한 수컷의 이차성징지수는 3.5이상으로 나타났으며, 암컷에서 성숙난은 난소강내에 정자를 보유한 개체에서만 나타났다. 교미시 정자의 난소강내 수송형태는 정포형태이며, 교미후 난소강내의 정자는 수정시까지 약 1개월 정도의 잠복기를 가진다. 수정형은 여포강내 수정형이고, 임신형은 난소강내 임신형이며, 암컷의 발생학적 과정은 수정-배란-부화-출산으로 이어진다. 출산직전 체내자어의 크기는 전장 63.0cm정도이며, 평균 체내자어수는 모체가 전장 20.0cm인 경우 18마리 였으며 모체의 크기가 증가함에 따라 증가하는 경향을 보였다.
The process of embryogenesis and larval development of the asteroid sea star Asterias amurensis $(U{\ddot{u}}tken)$ was observed, with special attention paid to morphological change and larval duration. In reproductive season, mature sea stars were collected under floating net cages, located in Tongyeong, southern Korea. The mature eggs are $138\;{\mu}m$ in average diameter, semi-translucent and orange in color, sperms in good condition appear light cream to white-gray in color. Embryos develop through the holoblastic equal cleavage stage and a wrinkled blastula stage that lasts about 9 hours after fertilization. Gastrulae bearing an expanded archenteron hatch from the fertilization envelope 22 hours after fertilization. At the end of gastrulation, rudiments of the left and right coelom are formed. By day 2, larvae possess complete alimentary canal and begin to feed. At this stage, the larva is called early bipinnaria. In 6-day-old larvae, the pre- and post- oral ciliated bands form complete circuits and the bipinnarial processes start to develop. By day 12, the lateral and anterior projection of the larval wall processes along the ciliated bands begins to thicken and curl, and the ciliated bands become more prominent. By day 32, early brachiolaria are presented with three pairs of brachiolar arms. Advanced brachiolaria with a well-developed brachiolar complex (three pairs of brachia and central adhesive disc) occur 6 weeks after fertilization. In the field, spawning of the sea star was observed in April to May, settlement form larvae and just settlements seem to occur from June to July, and early juveniles occur from August to September. Although we had not described the end of brachiolaria stage, it can be tentatively estimated that the duration of the pelagic stage of A. amurensis is 40 to 50 days.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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