Ji Hye Jung;Sanghoon Jeon;Heabin Kim;Seung-Hyun Jung
한국발생생물학회지:발생과생식
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제27권4호
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pp.205-211
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2023
INTS14/VWA9, a component of the integrator complex subunits, plays a pivotal role in regulating the fate of numerous nascent RNAs transcribed by RNA polymerase II, particularly in the biogenesis of small nuclear RNAs and enhancer RNAs. Despite its significance, a comprehensive mutation model for developmental research has been lacking. To address this gap, we aimed to investigate the expression patterns of INTS14 during zebrafish embryonic development. We generated ints14 mutant strains using the CRISPR/Cas9 system. We validated the gRNA activity by co-injecting Cas9 protein and a single guide RNA into fertilized zebrafish eggs, subsequently confirming the presence of a 6- or 9-bp deletion in the ints14 gene. In addition, we examined the two mutant alleles through PCR analysis, T7E1 assay, TA-cloning, and sequencing. For the first time, we used the CRISPR/Cas9 system to create a model in which some sequences of the ints14 gene were removed. This breakthrough opens new avenues for in-depth exploration of the role of ints14 in animal diseases. The mutant strains generated in this study can provide a valuable resource for further investigations into the specific consequences of ints14 gene deletion during zebrafish development. This research establishes a foundation for future studies exploring the molecular mechanisms underlying the functions of ints14, its interactions with other genes or proteins, and its broader implications for biological processes.
한반도 주변 3개 해역은 서로 다른 지형과 다양한 해류의 교차로 종다양성의 근간이 된다. 또한, 복잡한 해류가 만나는 전선 주변으로는 좋은 어장이 형성된다. 그러나, 남획에 의한 자원의 감소 및 EEZ 발효에 의한 어장의 축소는 새로운 수산자원 관리법을 필요로 하게 되었다. 수산자원의 효율적 관리를 위해 우선 다양한 해양환경에 적응한 지역개체군의 실체를 파악하는 것이 필요하다. 지역개체군의 형태 및 유전에 관한 연구는 자원의 관리단위 및 구역을 명확히 하는 데 기여할 것이다. 최종적으로 해역별 수산자원의 관리방안 제시가 가능할 것으로 기대된다.
The morphology and genetic identification of Rasbora lateristriata and Rasbora argyrotaenia between cultivated and wild populations has never been reported. This study compares morphology and cytochrome c oxidase (COI) genes between farmed and wild stock Rasbora spp. in Java and Sumatra island, Indonesia. We analyzed the truss network measurement (TNM) characters of 80 fish using discriminant function analysis statistical tests. DNA was extracted from muscle tissue of 24 fish specimens, which was then followed by polymerase chain reaction, sequencing, phylogenetic analysis, fixation index analysis, and statistical analysis of haplotype networks. Basic Local Alignment Search Tool analysis validated the following species: R. lateristriata and R. argyrotaenia from farming (Jogjakarta); Rasbora agryotaenia (Purworejo), R. lateristriata (Purworejo and Malang), Rasbora dusonensis (Palembang), and Rasbora einthovenii (Riau) from natural resources. Based on TNM characters, Rasbora spp. were divided into four groups, referring to four distinct characters in the middle of the body. The phylogenetic tree is divided into five clades. The genetic distance between R. argyrotaenia (Jogjakarta) and R. lateristriata (Malang) populations (0.66) was significantly different (p < 0.05). R. lateristriata (Purworejo) has the highest nucleotide diversity (0.43). R. argyrotaenia from Jogjakarta and Purworejo shared the same haplotype. The pattern of gene flow among them results from the two populations' close geographic proximity and environmental effects. R. argyrotaenia had low genetic diversity, therefore, increasing heterozygosity in cultivated populations is necessary to avoid inbreeding. Otherwise, R. lateristriata (Purworejo) had a greater gene variety that could be used to develop breeding. In conclusion, the middle body parts are a distinguishing morphometric character of Rasbora spp., and the COI gene is more heterozygous in the wild population than in farmed fish, therefore, enrichment of genetic variation is required for sustainable Rasbora fish farming.
Kang, Yu-An;Lee, Soo Rin;Kim, Eun-Bi;Park, Sang Un;Lim, Sang Min;Andriyono, Sapto;Kim, Hyun-Woo
Fisheries and Aquatic Sciences
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제25권5호
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pp.264-275
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2022
A non-destructive environmental DNA protocol for the genetic analysis of sea cucumber (Apostichopus japonicus) resources DNA was established. Among the several commercial DNA extraction kits, the DNeasy® Plant Mini Kit was selected as the best choice to obtain the high-quality genomic DNAs from the mucous sea cucumber. As the temperature and incubation time increased, the amount of extracted environmental DNA was also large, but it was judged that the increased amount did not affect as much as 2-3 times. Therefore, these conditions were not considered to be the main factors to consider in actual environmental DNA extraction. However, the amount of seawater relative to the size of the sample was judged as a major consideration, and a sufficient amount of environmental DNA for analysis was secured when stored within 1 min while stirring the volume of seawater corresponding to the total sea cucumber weight (g). In securing the environmental DNA of sea cucumbers, the mortality rate of sea cucumbers in all experiments was 0, and it was judged that the effects of sea cucumbers were not significant through this treatment. Through the results of this study, sea cucumber DNA research, which has been conducted in a destructive method, can be conducted non-destructively through environmental DNA analysis. Through this study, we have secured a standard protocol that can successfully extract the sea cucumber DNA through environmental DNA. It is not only excellent in terms of time and cost of traditional DNA analysis method currently used, but it is completely non-destructive in the ecosystem of the survey area. It is believed that the system can be transformed in a way that does not affect it. However, it is thought that various standard protocols should be established considering the characteristics of each type.
In Korean waters, there are two color types (blue and purple) of the blue crab Portunus trituberculatus. The blue type is common, but the ratio of the purple type has increased in landings. To determine whether there were significant morphometric or genetic differences between the blue and purple types, crabs caught from the West Sea of Korea were examined. Based on covariance analysis, there were significant differences in 1 of 10 morphometric characteristics of males between the two types, in none of the ten characteristics for females. Using amplified fragment length polymorphism (AFLP) DNA fingerprinting, no specific AFLP marker was detected for each type. The heterozygosity and genetic diversity were very low. Analyses of pairwise distance, the Fst index, and genetic similarity revealed similar results, with very low genetic differentiation. Therefore, there is no significant difference between blue and purple types of the crab from the West Sea of Korea, and the two types in the West Sea can be managed as one stock.
Seaweed biotechnology is a multidisciplinary subject to produce food, pharmaceuticals, chemicals, and environmental remediation materials from seaweed resources. It uses various techniques of cell culture, enzyme reaction and genetic manipulation to increase the production efficiency of useful seaweeds or their products. Firstly, an overview of key topics will be introduced in the fields of seaweed tissue culture, strain improvement, genetic analysis briefly as basic techniques. Secondly, some biologically active substances such as anti-inflammatory and antifouling substances that have been screened in my laboratory will be focused.
1992년 6월 브라질 리우데자네이루에서 생물다양성협약(Convention on Biological Diversity, CBD)에 158개국이 서명한 이후, 현재 194개국 당사국들은 자국의 이익을 위해 다양한 형태로 논의에 참여하고 있다. 그리고 생물다양성협약 유전자원에 대한 접근 및 이익 공유(Access to genetic resources and Benefit-Sharing, ABS)를 다룬 나고야의정서가 채택되어 2014년 10월 12일에 발효 되었다. 이러한 상황에서 생물다양성협약 및 나고야의정서 발효가 해양생물다양성을 연구하는 연구자들에게 어떠한 영향을 미칠 것인가는 상당히 중요한 문제이다. 그러나 지난 생물다양성총회에서 해양 및 해양생물자원에 대한 관심은 비교적 적었으며, 이에 따라, 이와 관련된 논의도 늦어졌다. 하지만 이번 제12차 평창 생물다양성총회에서 생물학적 또는 생태학적 중요해역 (Ecologi-cally or Biologically Significant marine Areas, 이하 EBSA) 및 기타 해양관련 문제를 논의하였다. 우리나라는 나고야 의정서에 아직 정식으로 가입하지 않았지만 유전자원 이용 시 사전통보승인(Prior and Informed consent, PIC) 및 상호합의조건 (Mutually Agreed Terms, MAT) 그리고 다자간 이익공유체계 (Global Multilateral Benefit-Sharing Mechanism, GMBSM)를 중심으로 다양한 논의가 이루어졌다. 우리나라는 생물자원 보유국으로서 정부는 국내 생물자원의 관리체계 및 법률을 빠르게 정비하여야 한다. 또한 이용국으로서 학계 및 산업계가 국외의 생물자원을 보다 쉽고 효율적으로 이용하도록 정보체계를 구축할 필요가 있다고 판단된다.
Kim, Eun-Sil;Lee, Kyoung-Jin;Oh, Kyoung-Hee;Ahn, Jong-Hoon;Kim, Seon-Beom;Liu, Qing;Hwang, Bang-Yeon;Lee, Mi-Kyeong
Natural Product Sciences
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제18권3호
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pp.153-157
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2012
Obesity, which is characterized by excessive fat accumulation in adipose tissues, occurs by fat absorption by lipase and sequential fat accumulation in adipocyte through adipocyte differentiation. Thus, inhibition of pancreatic lipase activity and adipocyte differentiation would be crucial for the prevention and progression of obesity. In the present study, we attempted to evaluate anti-adipogenic activity of several algae extracts employing preadipocytes cell line, 3T3-L1 as an in vitro assay system. The effects on pancreatic lipase activity in vitro were also evaluated. Total methanolic extracts of Cladophora wrightiana and Costaria costata showed significant inhibitory activity on adipocyte differentiation as assessed by measuring fat accumulation using Oil Red O staining. Related to pancreatic lipase, C. wrightiana and Padina arborescens showed significant inhibition. Further fractionation of C. wrightiana, which showed the most potent activity, suggested that $CHCl_3$ and n-BuOH fraction are responsible for adipocyte differentiation inhibition, whereas n-BuOH and $H_2O$ fraction for pancreatic lipase inhibition. Our study also demonstrated that n-BuOH fraction was effective both in early and middle stage of differentiation whereas $CHCl_3$ fraction was effective only in early stage of differentiation. Taken together, algae might be new candidates in the development of obesity treatment.
Lee, Ju Il;Jang, Hyeong Seok;Cho, Ga Youn;Yoon, Sung Jin;Boo, Sung Min
ALGAE
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제34권3호
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pp.229-236
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2019
Despite the abundance of seaweeds from Ulleungdo Island, genetic diversity and distribution of edible brown algae from the island remain unstudied. We analyzed mitochondrial cox3 sequences from 86 specimens collected in the island and from the nearby Korean Peninsula. Our cox3 phylogeny for the first time confirmed the occurrence of fives species from Ulleungdo Island; Petalonia binghamiae, P. fascia, Planosiphon zosterifolius, and two cryptic species previously identified as Scytosiphon lomentaria. P. binghamiae was relatively homogeneous with three haplotypes. P. fascia comprised four haplotypes, which were grouped into two genetic lineages. S. lomentaria was heterogeneous with nine haplotypes and was divided into two cryptic species; one species clustered with taxa from cold waters while the other clustered with taxa from temperate and cold waters. Low genetic diversity in P. binghamiae while high genetic diversity in S. lomentaria from Ulleungdo Island are comparable to patterns observed from other species from the Korean peninsula. Ulleungdo Island, although small in size, is an ideal field laboratory to investigate genetic diversity and distributions of economic marine algae.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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