Park, Ji-Soo;Kim, Nu-Ri;Jung, Hyun-Jun;Lee, Sang-Suk
Journal of the Korean Magnetics Society
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v.25
no.1
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pp.16-21
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2015
The micro device, coil, and channel for the biosensor integrated with the GMR-SV device based on the antiferromagnetic IrMn layer was fabricated by the light lithography process. When RBCs coupled with several magnetic beads with a diameter of $1{\mu}m$ passed on the micro channel, the movement of $RBC+{\mu}Beads$ is controlled by the electrical AC input signal. The $RBC+{\mu}Beads$ having a micro-magnetic field captured above the GMR-SV device is changed as the output signals for detection status. From these results, the GMR-SV device having the width magnitude of a few micron size can be applied as the biosensor for the analysis of a new magnetic property as the membrane's deformation of RBC coupled to magnetic beads.
Kim, Hyuntai;Reddy, Venu;Kim, Kun Woo;Jeong, Ilgyo;Hu, Xing Hao;Kim, CheolGi
Journal of Magnetics
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v.19
no.1
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pp.10-14
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2014
In this study, we fabricate an integrated microfluidic chip with a planar Hall effect (PHE) sensor for single magnetic bead detection. The PHE sensor was constructed with a junction size of $10{\mu}m{\times}10{\mu}m$ using a trilayer structure of Ta(3 nm)/NiFe(10 nm)/Cu(1.2 nm)/IrMn(10 nm)/Ta(3 nm). The sensitivity of the PHE sensor was 19.86 ${\mu}V/Oe$. A diameter of 8.18 ${\mu}m$ magnetic beads was used, of which the saturation magnetization was ~2.1 emu/g. The magnetic susceptibility ${\chi}$ of these magnetic beads was calculated to be ~0.14. The diluted magnetic beads solution was introduced to the microfluidic channel attributing a single bead flow and simultaneously the PHE sensor voltage was measured to be 0.35 ${\mu}V$. The integrated microchip was able to detect a magnetic moment of $1.98{\times}10^{-10}$ emu.
Kim, Yeon-Seok;Kim, Byoung-Chan;Lee, Jin-Hyung;Kim, Jung-Bae;Gu, Man-Bock
Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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v.11
no.5
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pp.449-454
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2006
Here we present a sensitive DNA detection protocol using quantum dots (QDs) and magnetic beads (MBs) for large volume samples. In this study, QDs, conjugated with streptavidin, were used to produce fluorescent signals while magnetic beads (MBs) were used to isolate and concentrate the signals. The presence of target DNAs leads to the sandwich hybridization between the functionalized QDs, the target DNAs and the MBs. In fact, the QDs-MBs complex, which is bound using the target DNA, can be isolated and then concentrated. The binding of the QDs to the surface of the MBs was confirmed by confocal microscopy and Cd elemental analysis. It was found that the fluorescent intensity was proportional to concentration of the target DNA, while the presence of non-complementary DNA produced no significant fluorescent signal. In addition, the presence of low copies of target DNAs such as 0.5 pM in large volume samples up to 40mL was successfully detected by using a magnet-assisted concentration protocol which consequently results in the enhancement of the sensitivity more than 100-fold.
This article describes a novel method for the detection of amyloid-${\beta}$($A{\beta}$) peptide that utilizes a photo-sensitive field-effect transistor (p-FET). According to a recent study, $A{\beta}$ protein has been known to play a central role in the pathogenesis of Alzheimer's disease (AD). Accordingly, we investigated the variation of photo current generated from p-FET with and without intracellular magnetic beads conjugated with $A{\beta}$ peptides, which are placed on the p-FET sensing areas. The decrease of photo current was observed due to the presence of the magnetic beads on the channel region. Moreover, a similar characteristic was shown when the Raw 264 cells take in magnetic beads treated with $A{\beta}$ peptide. This means that it is possible to simply detect a certain protein using magnetic beads and a p-FET device. Therefore, in this paper, we suggest that our method could detect tiny amounts of $A{\beta}$ for early diagnosis of AD using the p-FET devices.
Magnetic beads (Dynabeads$^{(R)}$) embedded in ~1 micron size polystyrene beads bearing surface carboxylic acid groups were modified with aminobenzyl ethylenediaminetetraacetic acid (ABEDTA) to concentrate or separate metal ions using pH gradients on micro and nano scales. The immobilization of ABEDTA was achieved by amide formation. The presence of the metal chelating functional group in the fully deprotonated form was confirmed by FT-IR. The chelation efficiency of beads was tested by determining metal ions in supernatant using GFAAS when pH gradients from 3 to 7. Mixtures of Cu and Mg and of Cd and Mn (at 10 ng/mL of metal) were separated as the difference in formation constant with the functional group of ABEDTA. The separation was repeated twice with relative standard deviation of <18%. A polydimethylsiloxane (PDMS) microchip column packed with EDTA-coated magnetic beads was optimized to concentrate metal ion for practical applications by eluting a Cu solution of micro scale at pH 3.
Immunomagnetic separation of virus coupled with .reverse transcription-polymerase chain reaction (IMS-PCR) was performed with infectious hematopoietic necrosis virus (IHNV). A DNA fragment of expected size was synthesized in the RT-PCR with total RNA extracted from IHNV inoculated CHSE-214. In a SDS-PAGE analysis, a protein band of over 70kDa was detected from non-infected cells and cells inoculated with IHNV and infectious pancreatic necrosis virus (IPNV). This protein was detected in the Western blot analysis probably because of non-specific reaction to monoclonal antibody against IHNV nucleocapsid protein. In the immunomagnetic separation, magnetic beads coated with monoclonal antibody against the IHNV nucleocapsid protein was incubated with supernatant from IHNV inoculated CHSE-214 cells. During this process, the non-specifically reacting protein could be removed by washing the magnetic bead with PBS in the presence of an external magnetic field, and viral proteins were detected from the remaining, cleaned magnetic beads. It was necessary to extract viral RNA from the captured virus particles before RT-PCR, and no DNA product was detected when the captured virus was only heated 5 min at $95^{\circ}C$. A PCR-product of expected size was synthesized from IMS-PCR with magnetic beads double coated either by goat anti-mouse IgG antibody -monoclonal antibody or streptavidin - biotin conjugated monoclonal antibody.
Micro-scale magnetic beads are widely used for isolation of proteins, DNA, and cells, leading to the development of in vitro diagnostics. Efficient isolation of target biomolecules is one of the keys to developing a simple and rapid point-of-care diagnostic. A zinc finger protein (ZFP) is a double-stranded (ds) DNA-binding domain, providing a useful scaffold for direct reading of the sequence information. Here, we utilized two engineered ZFPs (Stx2-268 and SEB-435) to detect the Shiga toxin (stx2) gene and the staphylococcal enterotoxin B (seb) gene present in foodborne pathogens, Escherichia coli O157 and Staphylococcus aureus, respectively. Engineered ZFPs are immobilized on a paramagnetic bead as a detection platform to efficiently isolate the target dsDNA-ZFP bound complex. The small paramagnetic beads provide a high surface area to volume ratio, allowing more ZFPs to be immobilized on the beads, which leads to increased target DNA detection. The fluorescence signal was measured upon ZFP binding to fluorophore-labeled target dsDNA. In this study, our system provided a detection limit of ≤ 60 fmol and demonstrated high specificity with multiplexing capability, suggesting a potential for development into a simple and reliable diagnostic for detecting multiple pathogens without target amplification.
Jeongtae Kim;Insung Park;Gwantae Kim;Myunghwan Sohn;Sanghoon Lee;Arim Byun;Jin-sil Choi;Taekyu Kim;Hongsoo Ha
Progress in Superconductivity and Cryogenics
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v.25
no.4
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pp.60-64
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2023
The manufacturing process of antibody drugs comprises two main stages: the upstream process for antibody cultivation and the downstream process for antibody extraction. The domestic bio industry has excellent technology for the upstream process. However, it relies on the technology of foreign countries to execute downstream process such as affinity chromatography. Furthermore, there are no domestic companies capable of producing the equipment for affinity chromatography. High gradient magnetic separation technology using a high temperature superconducting magnet as a novel antibody separation and purification technology is introduced to substitute for the traditional technology of affinity chromatography. A specially designed magnetic filter was equipped in the bore of the superconducting magnet enabling the continuous magnetic separation of nano-sized paramagnetic beads that can be used as affinity magnetic nano beads for antibodies. To optimize the magnetic filter that captures superparamagnetic nanoparticles effectively, various shapes and materials were examined for the magnetic filter. The result of magnetic separation experiments show that the maximum separation and recovery ratio of superparamagnetic nanoparticles are 99.2 %, and 99.07 %, respectively under magnetic field (3 T) and flow rate (600 litter/hr).
Proceedings of the Korean Magnestics Society Conference
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2010.06a
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pp.189-190
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2010
Our results demonstrate the possibility of implementing a chip-cytometer for biological applications using high-sensitive spin-valve devices integrated with a microfluidic channel. Further studies will be extended to the real-time detection of animal cells coated with magnetic beads for the biological applications.
Transactions of the Korean Society of Mechanical Engineers B
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v.35
no.12
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pp.1309-1316
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2011
This paper presents a high-speed RNA microextractor for the direct isolation of RNA from blood lysate using magnetic oligo(dT) beads. The extraction is performed through lateral magnetophoresis, which is induced by a ferromagnetic wire array inlaid. With this RNA microextractor, more than 80% of the magnetic beads could be separated at a flow rate up to 20 ml/h, and the overall extraction procedure was completed within 1 min. The absorbance ratio of RNA to protein(A260/A280) was greater than 1.7, indicating that the extraction technique yields pure RNA. The feasibility of using this technique in reverse transcription polymerase chain reaction procedures was investigated by cDNA synthesis and PCR processes. The results confirmed that the RNA microextractor is a practical device for easy, fast, and high-precision RT-PCR using minimal amounts of reagent.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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