• 대한화학회지
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• 제48권6호
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• pp.590-598
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• 2004

수용액 중 흔적량 Cu(II)과 Pb(II)을 알긴산칼슘 비드에 흡착 농축시켜 정량하는 방법에 대해 연구하였다. 알긴산칼슘 비드는 시료용액에 일정량의 Ca(II)과 알긴산을 첨가하여 용액 내에서 형성되도록 하였다. 그리고 효율적인 흡착농축을 위해서 검토해야 할 수용액의 흡착 pH, Ca(II)의 농도, 알긴산의 양, 겔화 방지를 위한 에탄올의 농도, 흡착 평형시간과 탈착을 위해 사용하는 산의 종류 및 농도 등의 조건을 최적화하였다. 흔적량 Cu(II)과 Pb(II)이 포함된 시료 용액에 Ca(II)과 에탄올을 가한 후 용액의 pH를 5.0으로 고정하고, 알긴산을 첨가하여 알긴산칼슘 비드가 용액 내에서 형성되도록 하였다. 흡착 평형이 이루어지면 막 필터로 용액을 거르고, 걸러진 알긴산칼슘 비드를 소량의 완충용액으로 세척한 후 질산용액을 가하여 초음파 세정기에 넣고 역 분산시켰다. 역 분산을 위해 사용하는 탈착제로는 질산이 가장 좋았고, 이때 질산의 농도가 1.0 mol/L 이면 정량적으로 탈착되었다. 공존이온에 대한 방해효과를 Na(I), K(I) 및 Mg(II)에 대해 검토한 결과 Pb(II)에 대해서는 방해효과가 없었으나 과량 존재할 때 Cu(II)에 대해서는 흡광도를 감소시키는 방해를 야기하였다. 2가지 물 시료에 본 방법을 적용한 결과 $90.4{\sim}104.3%$의 회수율을 얻었으므로 수용액 중 흔적량 존재하는 Cu(II)과 Pb(II)을 분리 흡착 농축할 수 있는 효과적인 방법이라고 생각한다.

• Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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• 제15권1호
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• pp.161-166
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• 2014

Lung cancer is the most common causes of cancer-related deaths worldwide, and a lack of effective methods for early diagnosis has greatly impacted the prognosis and survival rates of the affected patients. Tumor-initiating cells (TICs) are considered to be largely responsible for tumor genesis, resistance to tumor therapy, metastasis, and recurrence. In addition to representing a good potential treatment target, TICs can provide clues for the early diagnosis of cancer. MicroRNA (miRNA) alterations are known to be involved in the initiation and progression of human cancer, and the detection of related miRNAs in TICs is an important strategy for lung cancer early diagnosis. As Hsa-miR-155 (miR-155) can be used as a diagnostic marker for non-small cell lung cancer (NSCLC), a smart molecular beacon of miR-155 was designed to image the expression of miR-155 in NSCLC cases. TICs expressing CD133 and CD338 were obtained from A549 cells by applying an immune magnetic bead isolation system, and miR-155 was detected using laser-scanning confocal microscopy. We found that intracellular miR-155 could be successfully detected using smart miR-155 molecular beacons. Expression was higher in TICs than in A549 cells, indicating that miR-155 may play an important role in regulating bio-behavior of TICs. As a non-invasive approach, molecular beacons could be implemented with molecular imaging to diagnose lung cancer at early stages.

• Animal cells and systems
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• 제16권3호
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• pp.230-236
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• 2012

The Korean hare, Lepus coreanus, is an important mammal in ecosystem food chains, and is distributed across the entire Korean peninsula and northeastern China. Polymorphic microsatellite loci were developed using the biotinenrichment technique for use in population genetics studies. Five trinucleotide and four dinucleotide microsatellite loci were selected and tested on 22 Korean hare specimens collected from Gangwon Province and Gyeongsangbuk Province in South Korea. The number of alleles across the two sampling regions ranged from three to nine with a mean of 6.1. Mean observed and expected heterozygosities and polymorphic information content were 0.540, 0.627 and 0.579, respectively. Only one locus, Lc06, showed departure from Hardy-Weinberg equilibrium after applying the Bonferroni correction. Four microsatellites, Lc01, Lc03, Lc12, and Lc19, satisfied the criteria to serve as a core set of markers recommended for population genetics studies. These new microsatellite markers will be widely applicable to future genetic studies for management and conservation of the Korean hare and related species, including assessment of the genetic diversity and population structure of L. coreanus.

• IMMUNE NETWORK
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• 제3권1호
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• pp.53-60
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• 2003

Background: The role of macrophages in tumor angiogenesis is known to be the production of angiogenic cytokines and growth factors including TNF-${\alpha}$. Recently, macrophage also can produce the INF-${\gamma}$ that is being studied to be involved in angiogenic inhibition. Thus, the importance of macrophages in tumor angiogenesis is might being an angiogenic switch. Thus, the hypothesis tested here is that TNF-${\alpha}$ can modulate the INF-${\gamma}$ production in the macrophages from tumor environment as a part of tumor angiogenic switch. Methods: Macrophages in tumor environment were obtained from the peritoneal cavity of C57BL/6 mice injected with B16F10 melanoma cell line for 6 or 11 days. $Mac1^+$-macrophages were purified using magnetic bead ($MACs^{TM}$; Milteny Biotech, Germany) and cultured with various concentrations of TNF-${\alpha}$ for various time points at $37^{\circ}C$. The supernatants were analyzed for IFN-${\gamma}$ or VEGF by ELISA kit (Endogen, Woburn, MA). Results: Residential macrophages from the peritoneal cavity did not respond to LPS or TNF-${\alpha}$ to produce INF-${\gamma}$. However, the cells from tumor environment produced IFN-${\gamma}$ as well as VEGF and upregulated by the addition of LPS or TNF-${\alpha}$. RT-PCR analysis revealed the external TNF-${\alpha}$-induced IFN-${\gamma}$ gene expression in the macrophages from tumor environment. Conclusion: The overall data suggest that the macrophages in tumor environment might have an important role not only in angiogenic signal but also in anti-angiogenic signal by producing related cytokines. And TNF-${\alpha}$ might be a key cytokine in tumor angiogenic switch.

• 대한환경공학회지
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• 제27권10호
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• pp.1129-1135
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• 2005

한강에서 추출한 휴믹물질의 산화를 위해 회전 반응기를 도입하였다. $TiO_2$ 광촉매의 혼합을 위해 사용되는 공기는 UV 램프와 광촉매 사이에서 UV 조사를 방해할 수 있으므로, 더 나은 UV 조사율을 위해 반응기 내부에 배플이 설치된 회전 반응기를 고안하였다. FT-IR, $^{13}C$-NMR의 분석 결과, 한강 휴믹물질은 다른 상용화된 휴믹물질과는 다른 특성을 보여주었다. XAD-7HP 수지로 분리된 한강 휴믹물질을, 반응 후 광촉매의 분리 및 회수문제를 해결하기 위해, $TiO_2$를 hollow bead에 고정화한 광촉매와 UV-A, UV-C 램프를 사용하여 광촉매산화시켰다. 초기 휴믹물질의 TOC 농도가 5 mg/L일 때, 초기 pH 3, $TiO_2$ 주입률 2.0 g/L을 최적 조건으로 결정하였다. 또한 UV-C와 UV-A 램프의 비교실험을 수행한 결과, 비슷한 TOC 제거율을 보였다. 하지만, 분자량 분포 실험 결과, UV-A 램프보다 UV-C 램프로 광촉매산화시킨 것이 상대적으로 저분자량 부분이 증가하였다.

• 대한본초학회지
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• 제30권6호
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• pp.39-46
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• 2015

Objectives : The aim of this study was to evaluate the effect of Schizonepeta Spica water extract (SS) on the OVA-induced BLAB/c mice allergic rhinitis model.Methods : Thirty two BALB/c mice were equally assigned to 4 groups; the sham group, the control group, the cetirizine hydrochloride (Cet) treatment group, and the SS treatment group. Sham group was sensitized and challenged with saline, and the other groups were sensitized and challenged with OVA. The dosage of SS was 7.6 mg /kg·day, and Cet was 10 mg/kg·day. Nasal rubbing and sneezing were measured by the behavior observation. The concentrations of IL-1β, IL-10, TNF-α and MIP-2 in the sera of allergic rhinitis model were measured by mouse cytokine/chemokine magnetic bead panel kits. Total IgE and OVA-specific IgE were measured by ELISA method. Epithelial thickness and eosinophil infiltration of nasal septum was investigated by histological examination.Results : The clinical symptoms that increased in control group were significantly reduced in SS-treated group. Serum total IgE and OVA-specific IgE in the SS-treated group were significantly reduced compared to the control group. The concentration of IL-1β, IL-10, TNF-α and MIP-2 in SS-treated group showed a significant reduction compared to the control group. The infiltration of eosinophil into nasal tissues of SS-treated group decreased markedly compared to control group, and thickness of nasal septum in nasal mucosa showed a significant reduction compared to control group.Conclusions : According to the above result, it is suggested that SS may inhibit the early and late phase of allergic rhinitis reaction.

• Biomolecules & Therapeutics
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• 제30권6호
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• pp.529-539
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• 2022

Rheumatoid arthritis (RA) is a multifactorial immune-mediated disease, the pathogenesis of which involves different cell types. T-cell activation plays an important role in RA. Therefore, inhibiting T-cell activation is one of the current therapeutic strategies. Cytotoxic T-lymphocyte antigen 4-immunoglobulin (CTLA4-Ig), also known as abatacept, reduces cytokine secretion by inhibiting T-cell activation. To achieve a homeostatic therapeutic effect, CTLA4-Ig has to be administered repeatedly over several weeks, which limits its applicability in RA treatment. To overcome this limitation, we increased the number of sialic acid-capped antennas by genetically engineering the CTLA4 region to increase the therapeutic effect of CTLA4-Ig. N-acetylglucosaminyltransferase (GnT) and α2,6-sialyltransferase (α2,6-ST) were co-overexpressed in Chinese hamster ovary (CHO) cells to generate a highly sialylated CTLA4-Ig fusion protein, named ST6. The therapeutic and immunogenic effects of ST6 and CTLA4-Ig were compared. ST6 dose-dependently decreased paw edema in a mouse model of collagen-induced arthritis and reduced cytokine levels in a co-culture cell assay in a similar manner to CTLA4-Ig. ST6- and CTLA4-Ig-induced T cell-derived cytokines were examined in CD4 T cells isolated from peripheral blood mononuclear cells after cell killing through irradiation followed by flow- and magnetic-bead-assisted separation. Interestingly, compared to CTLA4-Ig, ST6 was substantially less immunogenic and more stable and durable. Our data suggest that ST6 can serve as a novel, less immunogenic therapeutic strategy for patients with RA.

• Tuberculosis and Respiratory Diseases
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• 제53권5호
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• pp.497-509
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• 2002

연구배경 : 대표적 세포내 감염질환인 결핵에 대한 숙주의 방어기전 및 면역반응은 아직도 정확히 이해되지 못하고 있으며 이러한 병리기전을 연구하기 위하여서는 적절한 감염모델이 필요하다. 전혈 (whole blood)은 체액성 면역과 세포성 면역을 모두 포함한 생체의 상태를 반영하므로 다양한 대상에서 면역상태의 차이에 따른 개체간 결핵균 살균력의 차이를 비교 할 수 있는 적절한 모델로 추정된다. 따라서 본 연구의 목적은 인체의 결핵균 전혈 배양모델을 개발하여 궁극적으로 시험관내에서 숙주면역의 정도를 측정하는 대리 표지자를 개발하고자하는 것이다. 방 법 : PPD 양성 정상인을 대상으로 제대혈, 결핵환자, 당뇨 및 폐암환자와 비교하였다. 전혈을 희석하여 결핵균 Mycobacterium avium과 M. tuberculosis $H_{37}Ra$에 낮은 감염률로 감염시키고 $37^{\circ}C$, 5% $CO_2$ 배양기 속의 회전교반기에서 회전시키면서 배양(rotating culture) 하였다. 배양 1 일, 3일 및 4일 뒤 증류수로 긴장저하용해 시킨 후 Middlebrook 7H10/OADC 평판배지에서 결핵균 집락이 형성될 때까지 3-4주간 $37^{\circ}C$, 5% $CO_2$ 배양기에 배양하여 집락수를 계산하였다. 일부실험에서 TNF-${\alpha}$의 분비능을 90%이상 감소시키 기 위하여 methylpredmsolone과 pentoxifylline을 첨가하여 면역조정을 하였으며, CD4+ T-림프구와 CD8+ T-림프구를 magnetic bead에 코팅된 단클론 항체를 사용하여 제거하였다. 결핵균의 수는 용해질 $m{\ell}$ 당 CFU로 계산하였다. 살균력은 ${\Delta}$ log killing ratio로 표시하였다. ${\Delta}$ logKR=$log_{10}$(Final CFU/Initial CFU). 결 과 : 1. 제대혈의 결핵균 살균력이 PPD 양성 대조군에 비하여 다소 감소된 경향을 보였으며, 결핵환자의 결핵균 살균력은 PPD 양성 대조군과 특별한 차이를 보이지 않았다. 또한 당뇨군과 폐암군의 결핵균 살균력도 정상 대조군에 비하여 특별한 차이를 보이지 않았다. 2. Methylprednisolone과 pentoxyfylline을 사용한 면역조정 시에 제대혈, PPD 양성 정상 대조군과 결핵군 모두에서 전혈에서의 결핵균의 살균력이 감소되는 경향을 보였다. 3. CD4+ 및 CD8+ T-림프구 삭제시 log KR가 증가되어 유의하게 결핵균 살균력이 감소되었으며 CD4+ 및 CD8+ T-림프구 동시 삭제시 현저한 상승효과를 보였고 이러한 결과는 Mycobacterium avium보다는 독력이 없는 균인 Mycobacterium tuberculosis $H_{37}Ra$에서 보다 뚜렷하였다. 4. 폐결핵 치료후의 결핵균 살균력은 치료 전과 비교하여 유의하게 ${\Delta}$ logKR가 감소하였으며, 배양 3-4일에도 현저한 결핵균 증식의 억제를 보였다. 결 론 : 인체의 결핵균에 대한 감수성인 개체간의 면역상태를 전혈에서 결핵균 살균력을 통하여 비교할 수는 없었다. 그러나 인체 전혈 모델은 간단하고 임상경과 관찰이 쉬우며 결핵환자에서 치료 전과 후에 현저한 결핵균 살균력의 차이를 보이므로, 최근 결핵연구의 가장 중요한 과제의 하나인 백신 개발에서 그 성과를 판단하는 vaccine trial에 이용할 수 있을 가능성을 시사한다.

• IMMUNE NETWORK
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• 제1권1호
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• pp.87-94
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• 2001

목적 : 제대혈의 조혈모세포 체외확장 시 조혈세포 증폭과 더불어 조혈미세환경의 변화가 일어난다. 이때 제대혈 $CD34^+$ 세포에서 유래되는 지지세포의 계열 분석조혈성장인자 분비능력을 알아보고 지지세포 증식 조건을 확립하여 효과적인 제대혈의 체외증폭을 제시하고자 하였다. 방법 : 제대혈부터 $CD34^+$ 세포를 분리하여 실험에 사용하였다. 무혈청배지에서 각종 조혈성장인자를 다양한 조합으로 첨가하여 배양하였고 증식정도는 현미경으로 관찰하여 배양용기를 점유한 면적 비율로 계산하였다. 세포외간질 단백의 효과를 분석하기 위하여 collagen S, fibronectin, laminin 및 poly-L-ly sine를 미리 coating한 용기에 배양하여 분석하였다. 제대혈 $CD34^+$ 세포를 조혈성장인자의 첨가 없이 3주간 액체배양하였다. 배양 시, 1주, 2주 및 3주에 상층액을 얻어 $-80^{\circ}C$에 보관하였다가 한꺼번에 IL-3, IL-6, GM-CSF, IL-$1{\beta}$ 및 TNF-$\alpha$등을 ELISA 방법으로 내부적으로 분비되는 량을 측정하였다. 분화된 지지세포의 계열을 분석하기 위해 E-selectin, VCAM-1, ICAM-1, PECAM-1, vWF, vimentin 및 CD 14 항체를 이용하여 면역화학염색 후 형광현미경으로 관찰하였다. 결과 : 제대혈 $CD34^+$ 세포 체외증폭시키는 과정에서 배양 4일에 지지세포가 출현하기 시작하여 7-10일이 지나면서 증식하기 시작하였고 14-2 1일 경에 서로 뭉치는 양상을 보여주었다. 제대혈 $CD34^+$ 세포 배양하면서 내부적으로 분비되는 GM-CSF, IL-6의 측정치는 시간이 지남에 따라 증가되었다. 제대혈 $CD34^+$ 세포 체외확장 시 지지세포의 증식 정도는 TPO+FL+SCF+LIF의 조합의 조혈성장인자가 첨가되었을 때 그리고 세포외간질 단백 성분 중 1% poly-L-lysine으로 처리한 경우 가장 효과적이었다. 결론 : 체외 증폭시 제대혈 $CD34^+$ 세포로부터 지지세포가 나타났으며 적절한 조혈성장인자의 첨가나 세포외간질 단백의 첨가에 의해 증폭될 수 있다.