Flammulina velutipes is an edible mushroom and contains a lot of fiber, vitamin $B_1$, $B_2$, niacin and folic acid. This study was conducted to explore the effects of the Flammulina velutipes mushroom on immune cells and immunity. Th1 cytokine productions as $IFN-{\gamma}$, $TNF-{\alpha}$, and IL-2 were measured in an activated macrophage by Flammulina velutipes water extract in seven concentrations (0, 5, 10, 50, 100, 250, 500, and $1,000{\mu}g/mL$). Also, the splenocyte proliferation index was measured at 48 hours after treatment of the Flammulina velutipes water extract in seven concentrations or mitogen, LPS and ConA. The $IFN-{\gamma}$ and $TNF-{\alpha}$ productions were increased by treatment of the Flammulina velutipes water extract. The $TNF-{\alpha}$ production was significantly higher in the $50{\sim}1,000{\mu}g/mL$ Flammulina velutipes water extract treated macrophages. The $IFN-{\gamma}$ production of macrophages treated with the Flammulina velutipes water extract increased significantly in all groups, and the highest $1000{\mu}g/mL$ concentration. The splenocyte proliferation index was enhanced when the $10{\sim}1,000{\mu}g/mL$ Flammulina velutipes water extracts were treated compared to the control. These primary results suggest that Flammulina velutipes may enhance the immune function by activation of the macrophage and spleen cell.
In order to investigate the effect of aqua-acupuncture solution with Panax Ginseng into $Qihai(CV_6)$ and $Shenshu(BL_{23})$ on immune response induced by glucocorticoid in mouse, Panax Ginseng aqua-acupuncture solution was injected into $Qihai(CV_6)$ and $Shenshu(BL_{23})$ for seven days after injection with glucocorticoid. And then MA-HRP (methamphetamine-horseradish peroxidase) induced antibody production, numbers and lysozyme activity in macrophage were measured. The results were as follows: 1. The antibody production in mouse immunized with MA-HRP was decreased in control group as compared with normal group. Although $Qihai(CV_6)$ group showed slight increasement, $Shenshu(BL_{23})$ group indicated great increasement compared with normal group. However in Aa-BL group, antibody production was almost increased to normal group. 2. In control group, the numbers of macrophage were decreased about 14% as compared with normal group. And in the pretreated groups of $Qihai(CV_6)$ and $Shenshu(BL_{23})$ were respectively increased 3.0 times and 2.9 times as compared with normal group. 3. Effect of Panax Ginseng-aqua acupuncture solution on the lysozyme activity in macrophage was increased gradually in the pretreated groups of $Qihai(CV_6)$ and $Shenshu(BL_{23})$ as compared with control group. These results suggest that Panax Ginseng aqua-acupuncture at $Qihai(CV_6)$ and $Shenshu(BL_{23})$ may increase antibody production and lysozyme activity in macrophage that is suppressed by glucocorticoid, and Panax Ginseng aqua-acupuncture will have immuno adjuvant effects on the cells which concerned with immunomechanisms.
Gentiana scabra var. buergeri (G. scabra) is a herb known to have therapeutic effect in infection diseases. We studied cellular activation and antitoxoplasmosis in macrophages after G. scabra stimulation. Macrophage activation was detected by nitrite production. Macrophages were treated with G. scabra extracted with water or methanol. Maximal nitrite production was detected in macrophages after stimulation of G. scabra extract 0.1 mg/ml. Maximal nitrite concentration was 23.22 0.003 uM/L in macrophages after water extract of G. scabra and was 24.07 1.41 uM/L after methanol extract of G. scabra. Effect of G. scabra in the phagocytic capacity of macrophages was monitored by using PI (percentage of macrophage infected by T gondii) method. The minimum PI (42.5 2.31) was detected in macrophages treated by water extract of G. scabra 0.1 mg/ml before infection of T gondii. We also examined toxoplasmastatic capacity of macrophage using FI (fold increase) method. The minimum FI (4.46 1.16) was shown in macrophages after water extract of G. scabra 0.1 mg/ml pretreatment before infection. Under electron microscope, proliferation of T gondii was inhibited by extract of G. scabra treatment in macrophages and the mitochondrion and lysosomal vacuoles within cells were increased. Taken together, G. scabra extract activates macrophages and induces toxopalsmastatic activity after T gondii infection. It is suggested that G. scabra may be used as a therapeutic drug against toxoplasmosis.
Objectives : This research aimed to study the cytotoxicity and immuno modulating activity of fermented Artemisia argyi Lev. et Vant.(Compositae). Methods : Effect of fermented Artemisiae Argyi Folium extracts, which were fermented by Sacchromyces cerevisiae STV89(AFS), on cell viability, generation of ROS within cells, generation of NO and the level of cytokines($TNF-{\alpha}$ and IL-6) was measured using mouse macrophage RAW 264.7 cell. Results : 1. Result of MTT assay conducted to verify the cytotoxicity of fermented Artemisiae argyi folium extract illustrated that, when fermented Artemisiae argyi folium extract was processed for each concentration, there was no excessive induction of cytoxicity in the RAW 264.7 cell. 2. Fermented Artemisiae Argyi Folium extract increased the generation of H2O2 within RAW 264.7 cell as well as significantly increased inhibition of generation of H2O2 in macrophage induced by LPS. 3. Fermented Artemisiae Argyi Folium extract inhibited generation of NO in RAW 264.7 cell, and significantly inhibited increase in generation of NO of macrophage induced by LPS. 4. Fermented Artemisiae Argyi Folium extract, AFS has significantly reduced the increase in the generation of $TNF-{\alpha}$ above 10 ${\mu}g/mL$. 5. Fermented Artemisiae Argyi Folium extract, AFS has significantly reduced the increase in generation of IL-6 above 50 ${\mu}g/mL$. Conclusions : AFS fermented extract produced from Artemisiae Argyi Flium, have increased generation of ROS and reduced generation of NO in RAW 264.7 cell without excessively inducing cytotoxicity of RAW 264.7 cell. In addition, they displayed significant immuno modulating activities including inhibition of generation of $TNF-{\alpha}$ and IL-6 in macrophage, induced by LPS.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.29
no.2
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pp.312-315
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2000
To purify the macrophage phagocytic activity-enhancing component, ethanol-acetic acid (100 : 1, EA) extract of Korean wheat (Gobun wheat) and imported one (Australian Standard White, ASW) were fractionated with ethylacetate : methanol : $H_2O$(65 : 25 : 4, v/v/v), and identified by TLC and column chromatography. At least five fractions were separated from the EA extract of the wheats but amounts of fraction B, C and D were more in Gobun wheat than in ASW. The effects of all fractions on phagocytic activity were tested in macrophage J774 cells. Among the fractions, only fraction b of Gobun wheat showed significant increase of phagocytic activity against yeast.
Objectives : This study aims at examining the immuno-modulating activity in the fermentative extract of the root of Scutellaria baicalensis Georgi (Scutellariae Radix) on the production of inflammatory mediator in LPS-stimulated RAW264.7 mouse macrophages. Method : Measurements were done for the influences on the cell viability, generation of hydrogen peroxide in cells and nitric oxide (NO) generation using the macrophage of mouse with the specimen SBS as the fermentative extract of Scutellariae Radix (SBS) with Saccharomyces cerevisiae STV89. Result : As a result of carrying out MTT assay to check the cellular toxicity of the fermentative extract of Scutellariae Radix, any excessive toxicity to the macrophage did not occur from treatments by concentration for SBS. SBS increased the generation of hydrogen peroxide in the macrophage. SBS suppressed the NO generated in macrophages and SBS concentration higher than $25{\mu}g/mL$ significantly suppressed the increased NO generated in LPS-stimulated macrophages. SBS concentration higher than $25{\mu}g/mL$ significantly suppressed the generation of IL-6, IL-10, IL-12p40 and MCP-1 in LPS-stimulated macrophages. Conclusion : Our findings indicate that SBS has an immuno-modulating activity in macrophage activation through suppressing the generation of inflammatory substances, NO, IL-6, IL-10, IL-12p40 and MCP-1.
Background Macrophages play a major role in wound healing and prevent infection from the outside. Polarization conversion of macrophages regulates aspects of inflammation, and two macrophages, M1 (classically activated) and M2 (alternatively activated), exist at both ends of broad-spectrum macrophage polarization. Thus, we aimed to investigate whether macrophage polarization can be artificially regulated. To this end, MgSO4 and small-interfering RNA (siRNA) targeting magnesium transport 1 (MAGT1) were used to investigate the effects of intracellular magnesium (Mg2+) concentrations on the differentiation of macrophages in vitro. Methods THP-1 derived macrophages maintained in a culture medium containing 5 mM MgSO4 and siRNA to inhibit the expression of MAGT1. As comparative groups, THP-1 derived macrophages polarized into M1 and M2 macrophages by treatment with M1, M2 inducer cytokine. The polarization status of each group of cells was confirmed by cell surface antigen expression and cytokine secretion. Results We found that MgSO4 treatment increased CD163 and CD206, similar to the effect noted in the M2 group. The expression of CD80 and HLA-DR was increased in the group treated with MAGT1 siRNA, similar to the effect noted in the M1 group. Functional assays demonstrated that the group treated with MgSO4 secreted higher levels of IL-10, whereas the MAGT1 siRNA-treated group secreted higher levels of IL-6 cytokines. Additionally, the conditional medium of the Mg2+ treated group showed enhanced migration of keratinocytes and fibroblasts. Conclusion Mg2+ can help to end the delay in wound healing caused by persistent inflammation in the early stages.
Background: Mycobacterium tuberculosis is a facultative intracellular pathogen which persists and multiplies within macrophage. Competent cell mediated immunity by cooperation of both T lymphocyte and macrophage of the host is required to kill the Mycobacterium tuberculosis. But a precise understanding of the pathogenesis of tuberculosis infection in pulmonary alveolar macrophage has not been achived. Research on the macrophage's basic microbicidal mechanism has elucidated the importance of oxygen-dependent or oxygen-independent components. Oxygen dependent processing begins with the reduction of oxygen by NADPH oxidase and generation of superoxide. In this study, the oxidative metabolic status of blood monocyte and pulmonary alveolar macrophage in patients with active pulmonary tuberculosis was accessed and compared with that of healthy control subjects to know whether there was a basic difference in superoxide generation by mononuclear cells between two groups. Methods: Pulmonary alveolar macrophage was purified after performing BAL(bronchoalveolar lavage) through the bronchi of infected lesion by plastic adhesion method. Blood monocyte was purified by Ficoll-Hypaque method. Superoxide generation by blood monocyte and pulmonary alveolar macrophage was measured by ferricytochrome-C reduction method after either stimulated with PMA(phorbol myristate acerate) or non-stimulated states. We also measured the effect of pulmonary tuberculosis patient's serum on superoxide generation by monocyte. Results: 1) Generation of superoxide by alveolar macrophage obtained from patients with pulmonary tuberculosis was little higher than those of controls, and PMA enhanced the generation of 2) Generation of superoxide by blood monocyte obtained from patients with pulmonary tuberculosis was little higher than those of control(p>0.05), and PMA more enhanced the generation of superoxide in patientswith pulmonary tuberculosis than those in controls(p<0.02). 3) Patient's serum enhanced the generation of superoxide by blood monocyte obtained from patients with pulmonary tuberculosis and controls, but not in the case of PMA stimulated blood monocyte. Conclusion: The present study suggest that the phenomenon of M.tuberculosis escape the microbicidal action of macrophage was not result of suppressed superoxide generation by blood monocyte and pulmonary alveolar macrophage, rather there might be a factor to stimulate the generation of superoxide by blood monocyte in pulmonary tuberculosis patient serum, but the comparision with effect of control's serum on superoxide generation needs further elucidation.
Journal of the Korea Institute of Military Science and Technology
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v.16
no.3
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pp.390-397
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2013
Primary-cultured immune cells are widely used in research to elucidate the mechanism of inflammation including chemotaxis, production of reactive oxygen species, cytokine release and antigen presenting. Mice are one of the species of experimental animals commonly used for such studies. Immune cells can be isolated and cultured from various organs such as bone marrow, peritoneal cavity, lung, spleen. For elaborated experimental studies, immune cells should be elicited with inflammatory substances or proliferated in vitro with special media. This paper details methods of obtaining immune cells from various organs of mice and investigating immune mechanism using isolated immune cells. It contains standard protocols of isolating and culturing immune cells from bone marrow, peritoneal cavity and lymphoid organs. It also covers the methods of investigating immune mechanism such as ELISA, western blotting, confocal microscopy and ELISPOT assay. With the works in this study, we established the standardized isolation and analysis methods of primary-cultured immune cells.
Objectives : The fresh young leaves and dried fruits of Zanthoxylum piperitum (Korean name: Chopi) are used as diuretics, stomachies, anthelmintic and for the treatments of disorders of the digestive organ in Asia. We investigated inhibitory effects of Zanthoxylum piperitum extract on lipopolysaccharide(LPS)-induced production of nitric oxide(NO) and pro-inflammatory cytokines including $TNF-{\alpha}$ and $IL-1{\beta}$ from RAW264.7 mouse macrophage cells. Methods : After methanol extract of Zanthoxylum Fructus (Zanthoxylum extract) was pretreated in RAW264.7 cells, the cells were stimulated with LPS. Cell toxicity of Zanthoxylum extract was assayed bv MTT assay. The production of NO from the cells was measured in culture medium by Griess reaction. The production of $TNF-{\alpha}$ and $IL-1 \;{\beta}$ from the cells was measured in culture medium by ELISA. Results : Zanthoxylum Fructus extract greatly inhibited the production of inflammatory mediators such as NO, $TNF-{\alpha}$ and $IL-1{\beta}$ from LPS-stimulated RAW264.7 cells. Conclusion : This result suggests that Zanthoxylum extract may have an anti-inflammatory effect through the inhibition of inflammatory mediators.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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