Objective : The purpose of this study was to investigate the effects of Scrophulariae Radix Water Extract (SR) on the production of inflammatory mediators in RAW 264.7 mouse macrophages cells induced by lipopolysaccharide (LPS). Method : We examined effect of Scrophulariae Radix Extract on the cell viability of mouse macrophages cells. Futhermore, After 24 hours treatment we investigated anti-inflammatory effect of Scrophulariae Radix Extract by the production of Bio-Plex cytokine assay, concentrations of various cytokines such NO, $interleukin(IL)-1{\alpha}$, IL-3 and interferon inducible protein-10(IP-10). Result : No significant changes have been found in the mouse macrophge cell viability by the Scrophulariae Radix Extract at the concentration of 25, 50, 100 and $200{\mu}g/m{\ell}$. The water extract of Scrophulariae Radix significantly inhibited the production of NO in the LPS-induced macrophage at the concentration of 25, 50, 100 and $200{\mu}g/m{\ell}$. The water extract of Scrophulariae Radix significantly inhibited the production of $IL-1{\alpha}$, IL-3 and IP-10 in the LPS-induced macrophage at the concentration of 50, 100 and $200{\mu}g/m{\ell}$. Conclusion : The water extract of Scrophulariae Radix significantly inhibited the production of NO, $IL-1{\alpha}$, IL-3 and IP-10 at the concentration of $50{\mu}g/m{\ell}$ or higher in the LPS-induced macrophages with no changes in the cell viability of them. These results suggest that water extract of Scrophulariae Radix has anti-inflammatory effect related with its inhibition of proinflammatory cytokines such as $IL-1{\alpha}$, IL-3 and IP-10 in the LPS-induced macrophages.
The Journal of Korean Medicine Ophthalmology and Otolaryngology and Dermatology
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v.20
no.2
s.33
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pp.77-88
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2007
Objectives : This experimental study was performed to investigate the effects of Yeouigeumhwang-san(YUGHS) on anti-inflammation and anti-Propionibacterium acnes. Methods : The cytotoxicity of YUGHS about viability of Raw 264.7 cell was tested by using a colorimetric tetrazolium assay(MTT assay). To investigate the anti-inflammatory effets of YUGHS on LPS-induced macrophage Raw 264.7 cell, we used ELISA kit and Western blots. Inhibitory effects of YUGHS on Propionibactrium acnes were investigated by using paper disk diffusion method. Results : 1. YUGHS has no cytotoxicity under 50 ${\mu}g/ml$ concentration but over 50 ${\mu}g/ml$ has a little cytotoxicity in Raw 264.7 cell. 2. Concentration of 100 ${\mu}g/ml$ YUGHS inhibited the production of NO in the Raw 264.7 cell stimulated with LPS. 3. All concentrations of YUGHS did not inhibit the production of $TNF-{\alpha}$ in the Raw 264.7 cell stimulated with LPS. 4. All concentrations of YUGHS significantly inhibited the production of $PGE_2$ in the Raw 264.7 cell stimulated with LPS. 5. YUGHS did not inhibit the expression of COX-2 but concentration of 50 ${\mu}g/ml$ YUGHS inhibited iNOS expression in the Raw 264.7 cell stimulated with LPS. 6. YUGHS has the effect of blocking $NF-{\kappa}B$ into nucleus in LPS-induced macrophage Raw 264.7 cell 7. YUGHS did not have the inhibitory effect of Propionibactrium acnes. Conclusions : These results indicate that Yeouigeumhwang-san has anti-inflammatory effets. If further study is performed, the use of Yeouigeumhwang-san will be valuable and benificial in the therapy of acnes.
Ha Chang-Hoon;Yun Cheol-Won;Paik Hyun-Dong;Kim Seung-Wook;Kang Chang-Won;Hwang Han-Joon;Chang Hyo-Ihl
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.16
no.2
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pp.247-255
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2006
Yeast cell wall matrix particles are composed entirely of mannoprotein and ${\beta}-glucan$. The mannoproteins of yeast cell wall can systemically enhance the immune system. We previously purified and analyzed alkali-soluble ${\beta}-glucans$ [${\beta}$-(1,3)- and ${\beta}$-(1,6)-glucans] [10]. In the present study, a wild-type strain was first mutagenized with ultraviolet light, and the cell wall mutants were then selected by treatment with 1.0 mg/ml laminarinase (endo-${\beta}$-(1,3)-D-glucanase). Mannoproteins of Saccharomyces cerevisiae were released by laminarinase, purified by concanavalin-A affinity and ion-exchange chromatography. The results indicated that the mutants yielded 3-fold more mannoprotein than the wild-type. The mannoprotein mass of mutant K48L3 was 2.25 mg/100 mg of yeast cell dry mass. Carbohydrate analysis revealed that they contained mannose, glucose, and N-acetylglucosamine. Saccharomyces cerevisiae cell wall components, mannoproteins, are known to interact with macrophages through receptors, thereby inducing release of tumor necrosis factor alpha ($TNF-{\alpha}$) and nitric oxide. Mannoprotein tractions in the present study had a higher macrophage activity of secretion of $TNF-{\alpha}$ and nitric oxide and direct phagocytosis than positive control ($1{\mu}g$ of lipopolysaccharide). In particular, F1 and F3 fractions in mannoproteins of K48L3 enhanced and upregulated the activity of nitric oxide secretion and macrophage phagocytosis by approximately two- and four-fold, respectively.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.40
no.5
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pp.625-634
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2011
Green tea seed coat (GTSC) was extracted with 100% ethanol for 4 hr and then fractionated with petroleum ether (PE), ethyl acetate (EtOAC) and butanol (BuOH). The EtOAC fraction showed the highest level in total phenol contents and the lowest level in nitric oxide (NO) production in LPS-stimulated RAW264.7 macrophage cell. Thus, this study was carried out to investigate the anti-inflammatory and its mechanisms of GTSC EtOAC fraction in LPS-stimulated RAW264.7 macrophage cell. GTSC EtOAC fraction contained EGC ($1146.48{\pm}11.01\;{\mu}g/g$), tannic acid ($966.99{\pm}32.24\;{\mu}g/g$), EC ($70.88{\pm}4.39\;{\mu}g/g$), gallic acid ($947.61{\pm}1.03\;{\mu}g/g$), caffeic acid ($37.69{\pm}1.46\;{\mu}g/g$), ECG ($35.46{\pm}3.19\;{\mu}g/g$), and EGCG ($15.53{\pm}0.09\;{\mu}g/g$) when analyzed by HPLC. NO production was significantly (p<0.05) suppressed in a dose-dependent manner with an $IC_{50}$ of $80.11\;{\mu}g$/mL. Also prostaglandin $E_2$ level was also inhibited in a dose-dependent manner. Moreover, iNOS protein expression was suppressed in dose-dependent manner but COX-2 gene expression was not affected. Total antioxidant capacity and glutathione (GSH) levels were enhanced more than the LPS-control. Expressions of antioxidative enzymes including catalase, GSH-reductase and Mn-SOD were elevated compared to LPS-control. Nuclear p65 level was decreased in the GTSC EtOAC fraction in a dose-dependent manner. These results indicate that GTSC EtOAC fraction inhibit oxidative stress and inflammatory responses through elevated GSH levels, antioxidative enzymes expressions and suppression of iNOS expression via NF-${\kappa}B$ down-regulation.
Kim, Sung-Phil;Choi, Yong-Hee;Kang, Mi-Young;Nam, Seok-Hyun
Applied Biological Chemistry
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v.48
no.3
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pp.285-291
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2005
Effects of the aqueous or 50% ethanolic extracts prepared by various extraction procedures on macrophage activation were determined by using the mouse macrophage cell line RAW264.7 cells as a indicator cell. The results demonstrated that the fractions prepared by aqueous extraction for 2 h and by microwave extraction with 50% ethanol at 60 W for 3 min had the greatest inducing abilities for NO production, and that the greatest ROS scavenging abilities were found in the fractions prepared by hot water extraction for 2 h or 3 h, by microwave extraction with 50% ethanol at 60 W for 3 min and by 0.5% HCl extraction, respectively. Phagocytotic activities against Candida albicans were found to be highest for the 50% ethanolic extracts prepared by microwave extraction for 3 min at 60 W, 80 W and 12 W, respectively. Especially, we found that a extract prepared by microwave extraction with 50% ethanol at 60 W for 3 min enables to induce effectively overall functional activation of macrophage, such as NO production, ROS scavenging and phagocytosis of C. albicans, respectively. These results demonstrated that a 50% ethanolic extraction using microwave at 60 W for 3 min would be useful for enrichment of macrophage-activating components contained in Hericium erinaceus, implying participation of protein-bound polysaccharides as a active factor.
Dogs were divided into 3 groups of two each; Bacillie Calmette-Guerin(BCG) pretreatment, M bovis only treatment and uninfected control group. BCG were vaccinated intradermally with 0.2ml before 3weeks of M bovis intraperitoneal infection. Infection at necropsy 4months later was readily in the both treated dogs. Histopathologically, the BCG pretreated dogs produce the moderate accumulation of macrophages and focal granuloma formation in the lung, whereas the M bovis only treared dogs produce the accumulation of predominantly macrophages, occasionaly polymorphonuclear cells and the more larger granuloma Bronchoalveolar lavage(BAL) was obtained and total and differential cell counts were examined. Total number of BAL cells harvested from uninfected dogs is lower compared with those of the both treated groups. The total cell number of M bovis only treated dogs were singificantly higher 1.8 times than that of the BCG pretreated dogs. The Fe receptor activity and the growth of organism in alveolar macrophages obtained from BCG pretreated dogs were compared with that in macrophages from M bovis only treated dogs. BCG vaccination resulted in substantial macrophage activation, measured as increased Fc receptor mediated phagocytosis and rosette formation, as wells as the inhibition of intracellular mycobacteria multiplication. However, actibated macrophages taken from BCG pretreated dogs are incapable of killing the M bovis. Thus, these results suggest that BCG pretrearment in the dog may produce a protective effect against tuberculosis because active alveolar macrophages have acquired antituberculous immunity, although few mycobacteria within the lung remain in a metabolically active state.
Journal of the Korean Applied Science and Technology
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v.33
no.3
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pp.606-613
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2016
The purpose of this study is to analyze the possibility of a residual product of coffee (RC). RC oil extracted with n-hexane at $60({\pm}10)^{\circ}C$ for 24 hours. In this study, the cytotoxicity of RC oil was observed against B16F10 melanoma cells and RAW 264.7 macrophage cells by water solubletetrazolium salt-1 assay, and The RC oil measured by methods of DPPH radical scavenging and antimicrobial activities in Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Escherichia coli, Candida albicans. As a result, the RC oil treatment-related cytotoxic effects appeared on B16F10 melanoma cells from 0.125 to $2{\mu}{\ell}/m{\ell}$ and RAW 264.7 macrophage cells from 0.125 to $0.5{\mu}{\ell}/m{\ell}$ concentrations in this study. RC oil is radical scavenging activity concentrations on dependent. The antimicrobial activity of RC oil ($150{\mu}l/{\ell}$) was determined by clear zone method. Straphylococcus epidermidis, Straphylococcus aureus, Escherichia coli, Candida albicans showed clear zone by each $11.3{\pm}0.4$, $12.{\pm}0.7$, $12.0{\pm}0.0$, $0.0{\pm}0.0mm$. It is suggested that RC oil have effects on the cytotoxicity, antioxidant and antimicrobial that could be applicable to cosmetics as a new material.
Bacterial lipopolysaccharide(LPS) is can stimulate the most LPS-responsive cells in the mammalian host. The macrophage response to LPS can protect the host from infection but high levels, contribute to systemic inflammatory response syndrome and destruction of host itself, The previously study, secretory leukocyte pretense inhibitor (SLPI) was known LPS-induced product of macrophage and had the function that antagonizes their LPS-induced activation of pro-inflammation signaling factors. Purpose of this study was to identify the expression of SLPI involving the infection in various cell lines including odontoblast cell line. Therefore, we conducted in vitro researches, which treated the LPS to the MDPC-23, and compared to NIH3T3, RAW264.7. To investigate the expressionof SLPI in mRNA level, the methods was used RT-PCR and western blotting for protein expression of SLPI. Moreover, we performed the scanning electron microscopic (SEM) observation for the morphological change. This work was supported by Korea Science and Engineering Foundation.
Gaucher disease (GD) is an autosomal recessive lysosomal storage disorder caused by mutations in the glucocerebrosidase gene (GBA), which encodes the lysosomal enzyme glucosylceramidase (GCase). Deficiency in GCase leads to characteristic visceral pathology and lethal neurological manifestations in some patients. Investigations into neurogenesis have suggested that neurodegenerative disorders, such as GD, could be overcome or at least ameliorated by the generation of new neurons. Bone marrowderived mesenchymal stem cells (BM-MSCs) are potential candidates for use in the treatment of neurodegenerative disorders because of their ability to promote neurogenesis. Our objective was to examine the mechanism of neurogenesis by BM-MSCs in GD. We found that neural stem cells (NSCs) derived from a neuronopathic GD model exhibited decreased ability for self-renewal and neuronal differentiation. Co-culture of GBA-deficient NSCs with BM-MSCs resulted in an enhanced capacity for self-renewal, and an increased ability for differentiation into neurons or oligodendrocytes. Enhanced proliferation and neuronal differentiation of GBA-deficient NSCs was associated with elevated release of macrophage colony-stimulating factor (M-CSF) from BM-MSCs. Our findings suggest that soluble M-CSF derived from BM-MSCs can modulate GBA-deficient NSCs, resulting in their improved proliferation and neuronal differentiation.
Partitioning of human granulocyte-macrophage colony stimulating factor (hGM-CSF) was achieved in the aqueous two-phase systems (ATPSs) using a crude extract of transgenic tobacco cell suspension culture. This study examined the effects of polyethylene glycol (PEG) molecular weight and concentration and the effects of sodium phosphate concentration in different PEG/sodium phosphate systems on the partition coefficient, K. The best ATPS system was 5% PEG 8,000/1.6 M sodium phosphate after 2 h of incubation at room temperature. In this system, hGM-CSF was partitioned in the PEG-rich phase with a yield of 57.99% and K$\_$hGM-CSF/ of 8.12. In another system, 3% PEG 10,000/1.6 M sodium phosphate, hGM-CSF was also partitioned primarily in the top phase with a yield of 45.66% and K$\_$hGM-CSF/ of 7.64 after 2 h of incubation at room temperature.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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