• 한국수정란이식학회:학술대회논문집
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• 한국수정란이식학회 2002년도 국제심포지엄
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• pp.88-88
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• 2002

인공수정 및 수정란기술의 활성화에 따라 소에 있어서 인공수정은 90%이상이 실시되고 있으나, 수정란이식은 수정란의 생산이 안정적이지 않아 활성화에 많은 지장을 초래하고 있다. 이의 원인은 수정란이식에 의한 수태율의 저하가 가장 크며, 수태율 향상을 위하여 수란우에 progesterone, hCG 등의 주사가 실시되고 있다. 그러나 이는 수정란의 착상에 있어서 자궁의 환경을 개선한다고 하나, 착상의 정확한 기전의 구명은 미미한 상태이다. 한편 비장유래 macrophage가 황체를 자극하고 TGF-$\beta$의 생산을 유도하는 것으로 보고되고 있으며, IL-I $\alpha$와 $\beta$에 따라 TGF-$\beta$ 생산에 있어서 약간의 차이를 보이는 것으로 보고되고 있다. 따라서 본 연구는 비장유래 macrophage가 TGF-$\beta$의 생산시 임신관련 Cytokine인 IL-I$\alpha$와의 관계를 조사하기 위하여 실시하였다. 임신 및 비임신 도축 암소의 비장을 채취하여 얼음에 채워 실험실로 운반한 후 비장의 표면을 70%의 알콜로 세척하고, 표피를 벗겨 비장조직을 세절하여 10% FBS+DMEM에 넣어 조직을 눌러 짜면서 조직속의 세포를 분리하였다. 세척한 배양액은 4-5$m\ell$를 100mm 유리 petri dish에 넣고 39$^{\circ}C$, 5% $CO_2$, 95% 공기인 배양기에서 2시간이상 배양하였으며, 배양 후 냉장된 buffer A 용액으로 세척하여 유리 petri dish의 바닥에 부착된 macrophage만을 cell scraper로 분리하였다. 분리한 macrophage는 0.5-1 $\times$ $10^{6}$ cells/$m\ell$가 되게 조정하여, IL-I 을 0.001, 0.01, 0.1 또한 1 ng/$m\ell$를 첨가하여 농도에 따른 효과를 조사하였고, 각각 24, 48, 72, 96 또한 120시간을 배양하여 시간에 의한 효과도 실시하였다. 각 배치구에서 얻어진 배양액은 TGF-$\beta$를 조사하기 전까지 -2$0^{\circ}C$에 동결 보존하였다. TGF-$\beta$의 측정은 TGF-$\beta$ kit(promega, USA)를 이용하여 실시하였으며, 통계학적 분석은 Anova test를 Statview program을 이용하여 분석하였다. 시험의 결과 대조구에 비해 IL-I 첨가구는 2-3배의 TGF-$\beta$생산을 보였으며, 배양시간에 따른 생산은 시간이 지남에 따라 약간 상승하는 경향을 보였으나, 유의적인 차이를 보이지는 않았다. 또한 IL-I의 농도에 따른 생산의 변화는 IL-I의 농도에 따라 약간의 차이를 보였고 유의적인 차이는 인정되지 않았다. 임신 및 비임신의 경우 임신우의 비장 macrophage가 비임신보다는 약간 상승하는 거스로 나타났다. 이상의 결과로 볼 때 IL-I $\alpha$ 는$\beta$subunit 보다 TGF-$\beta$ 생산에 있어서 서로 다른 양상을 보일 것으로 추정되며, IL-I은 macrophage의 직접적인 영향을 주기보다는 황체세포를 매개로 한 자궁에 TGF-$\beta$의 생산을 유도하는 것으로 사료되며, 임신관련 cytokine에 대한 다양한 연구가 요구되고 있다.

• 한국동물학회지
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• 제36권4호
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• pp.514-521
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• 1993

Monocyte interaction with fibronectin (FN) mediates specific cell surface receptors and results in cell attachment and differentiation. Several cell-mediated activities for various fragments of FN have been documented. To investigate the regulatory mechanisms of monocyte differentiation by cell binding domains of FN and their receptors, cell attachment-, cell migration-, and its respective inhibition assay were carried out. Monocyte recognizes 38-kDa domain distinctively from its recognition of 85-kDa domain, and the heparin-binding site of the 38-kDa fragment is not involved in monocyte adhesion. Based on these experimental results, it can be suggested that monocvte/macrophase interacts with at least two different sites in FN, which is critical step in cell adhesion and (or) migration.

• Journal of Acupuncture Research
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• 제23권6호
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• pp.61-76
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• 2006

To study the effects of anti-cancer, anti-metastasis and immune response improvement effects of herbal-accupunture with Orostachys japhonicus A.Berger, infusion solution put into Kansu(BL18) of mouse induced by Colon26-L5 human colon cancer cells, which are corresponding to humanbody. We observed the change of body weight, surviving number, median surviving time, increase of life span, changes in amount of leukocyte, erythrocyte, platelet, total protein, creatinine, glucose and LDH, weight of spleen and kidney, histological analysis on tissue metastasis of liver, splenic cell proliferation, the expression of cytokine gene, the number of CD4+, CD8+, CD9+ and NK cell, and concluded like this. The results were obtained as follows ; 1. In acute and sub-acute cytotoxicity experiment, significantly signs were not appeared in all groups. 2. Antimetastatic experiment in vitro and in vivo showed that Orostachys Japhonicus A.Berger Herbal-acupuncture at Kansu(BL18) has antimetastatic effects. 3. The spleen cells proliferation of the experimental groups treated with Orostachys Japhonicus A.Berger infusion solution extract has increased significantly compared with that of the control group. 4. As compared with control, the population of total T cell, helper T cell, cytotoxic T cell and macrophage were increased. 5. The production of Th 1 type cytokines from splenocyte and cytokines which is associated with anti-tumor activity form macrophage were increased significantly. Above the results revealed that herbal-accupunture with Orostachys Japhonicus A.Berger infusion solution has effects of anti-cancer, anti-metastasis and immune response improvement.

• Molecules and Cells
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• 제39권10호
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• pp.734-741
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• 2016

Granulocyte-macrophage colony stimulating factor (GM-CSF) has a role in inducing emergency hematopoiesis upon exposure to inflammatory stimuli. Although GM-CSF generated murine bone marrow derived cells have been widely used as macrophages or dendritic cells in research, the exact characteristics of each cell population have not yet been defined. Here we discriminated GM-CSF grown bone marrow derived macrophages (GM-BMMs) from dendritic cells (GM-BMDCs) in several criteria. After C57BL/6J mice bone marrow cell culture for 7 days with GM-CSF supplementation, two main populations were observed in the attached cells based on MHCII and F4/80 marker expressions. GM-BMMs had $MHCII^{low}F4/80^{high}$ as well as $CD11c^+CD11b^{high}CD80^-CD64^+MerTK^+$ phenotypes. In contrast, GM-BMDCs had $MHCII^{high}F4/80^{low}$ and $CD11c^{high}CD8{\alpha}^-CD11b^+CD80^+CD64^-MerTK^{low}$ phenotypes. Interestingly, the GM-BMM population increased but GM-BMDCs decreased in a GM-CSF dose-dependent manner. Functionally, GM-BMMs showed extremely high phagocytic abilities and produced higher IL-10 upon LPS stimulation. GM-BMDCs, however, could not phagocytose as well, but were efficient at producing $TNF{\alpha}$, $IL-1{\beta}$, IL-12p70 and IL-6 as well as inducing T cell proliferation. Finally, whole transcriptome analysis revealed that GM-BMMs and GM-BMDCs are overlap with in vivo resident macrophages and dendritic cells, respectively. Taken together, our study shows the heterogeneicity of GM-CSF derived cell populations, and specifically characterizes GM-CSF derived macrophages compared to dendritic cells.

• 생명과학회지
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• 제26권9호
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• pp.1027-1032
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• 2016

항원은 병원체로부터 유래한 질병인자다. 생명체는 항원에 대항하는 방어계인 면역계를 가지고 있다. 항원은 식세포작용, 항체, 보체 활성화, NK세포 혹은 MHC 분자를 통한 세포독성 T세포와 같은 방법을 통해서 처리된다. 림프절은 스트로마세포와 3차원 네트워크를 통해서 구성되어 있다. Fibroblastic reticular cells (FRC)는 림프절 T zone에서 T세포와 상호작용한다. FRC는 세포외 기질 생산과 homing 케모카인을 생산하여 감염에 대비한다. 하지만, FRC가 항원처리과정에 관련되어있다는 보고는 없다. 본 연구는 FRC의 항원처리 관련성에 대한 연구이다. 이를 위해 FRC는 대식세포, T세포, LPS, 그리고 TNFα와 같은 다양한 감염상황에 노출시켜 연구를 진행하였다. FRC가 대식세포 및 T세포와 공배양 했을 때 FRC가 형태적 변화와 FRC간 빈 공간 형성이 관찰 되었다. MMP 활성은 Y27632와 T세포에 의해 조절 되었다. 더욱이, 염증물질인 TNFα를 FRC에 처리 후 마이크로어레이를 통한 결과에서 부착분자와 MHC I antigen transporter의 발현을 조절하는 것으로 나타났다. FRC 단일층에 LPS와 대식 세포를 공배양 했을 때 NO 생성력이 크게 향상되었다. GFP antigen을 FRC와 대식세포 공배양군에 처리 했을 때 항원 흡수율이 증가되었다. 이러 결과는 FRC가 항원처리에 관여하고 있다는 것을 의미하며 이는 림프절이 항원처리과정에 연관되어 있다는 것을 제시한다.

• 한국식품영양과학회지
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• 제23권2호
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• pp.340-347
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• 1994

원발성 위암환자로 확진받은 환자들의 암조직과 암조직 주위의 정상점막 조직을 대조군으로 사용하여, $TGF-{\alpha}$와 이에 대한 결합력을 갖고 있는 EGF-Receptor에 대한 mRNA를 면역세포화학적 방법과 in situ hybridization방법을 결합하여 규명하였다. 성장한 세포에서 발견되지 않는 $TGF-{\alpha}$가 위암환자의 조직학적으로는 정상적으로 간주되는 위점막 조직에서 발견된 점으로 미루어 $TGF-{\alpha}$가 암의 분화에 적극적으로 개입하고 있다는 증거가 된다. EMB-11 항체를 사용한 면역세포 화학적 방법에 의해 macrophage를 발견하고, macrophage cell에서 $TGF-{\alpha}$와 EGF-R mRNA가 발현됨을 규명할 수 있었다. 또한 단클론 항체를 이용해 EGF-R에 해당하는 단백질을 발견하였다. CEA를 이용한 면역세포화학 실험에서 정상으로 간주되는 위점막 조직에서 암 세포를 규명하였다. 특히, macrophage cell의 활동이 암의 증식과 더불어 증가하고 있다는 점을 관찰할 수 있었다. 위암과 검사 방법으로서 본 실험에서 사용된 면역세포화학적 기법과 in situ hybridization방법을 사용하여 생검을 통한 조직을 대상으로 성장인자에 대한 검사를 함으로써 정확한 위암의 발생과 진행에 대한 판단을 내리는데 이용할 수 있고 실용성이 있다고 사료된다.

• Clinical and Experimental Pediatrics
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• 제49권7호
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• pp.763-768
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• 2006

목 적 : 후두세척술을 이용하여 얻어진 LLMI로 급성세기관지염의 흡인의 위험성을 평가하고, LLMI와 기도염증세포 사이의 연관성에 대해서 연구하고자 하였다. 방 법 : RSV 세기관지염을 앓은 22명의 환아에서 급성기와 회복기에 각각 후두세척술을 시행하여 총세포수와 세포분획을 계산하였다. 한 개의 대식세포당 지질함유량은 0부터 4까지의 점수로 측정하였고, LLMI는 100개의 세포를 검사하여 400점까지 측정하였다. 결 과 : 세기관지염의 급성기에는 회복기에 비해 총세포수와 LLMI가 의미있게 증가되었다(P<0.05). 후두세척액의 중성구 백분율은 LLMI와 상관관계가 있었다(r=0.69, P<0.001). pH 양성군은 pH 음성군에 비해 후두세척액의 LLMI와 중성구 백분율이 의미있게 높았다(P<0.05). 결 론 : 본 연구는 세기관지염 시기에 일시적인 흡인의 위험이 증가한다는 것을 보여준다. 후두세척액으로 측정한 LLMI는 세기관지염 환아에서 흡인의 유용한 지표가 될 수 있다.

• 한국식품영양과학회지
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• 제26권1호
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• pp.148-153
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• 1997

본 연구는 전보의 영지버섯으로부터 분리 배양한 균 사체를 알카리추출하여 얻은 다당체의 일반성분과 당분석 및 항암작용에 관한 연구에 이어, 이들과 ATCC의 마우스 유래 탐식 세포주 TIB 71 및 BALB/c 마우스의 복강내 대식세포를 이용하여 영지버섯 다당체가 면역계 전체의 기능을 조정하는 대식세포의 면역기능에 미치는 영향을 연구하였다. 그 결과를 요약하면 다음과 같다 1. 대식세포의 환성에 영향을 미치는 영지 버섯 다당체의 효과를 알아보기 위하여 세포의 유사분 열능을 측정한 결과, 다당체의 처리 농도가 0.5mg 실험군에서부터 유의한 증가를 나타내었다(p<0.001). 2. 영지버섯 다당체가 대식 세포 활성에 미치는 효과를 알아보기 위해 대식세포의 표면에 존재하는 IL-2 수용체를 anti-mouse IL-2-FITC 단크론항체를 이용하여 측정한 결과는 PSG 0.05mg 실험군을 제외한 실험군 모두에서 대조군 37.6% 보다 현저한 발현증가(p<0.001)를 보였으며 PSG 0.1mg 실험군까지는 수용체가 증가 하나 그 이상 처리군 사이에서는 상호간 유의한 차이는 없었다. 3. 영지버섯 다당체는 대식 세포에서 유래하는 세포간물질 즉 IL-1, IL-6 및 TNF의 생성에 유의성 있는 관여는 하지 않는 것으로 생각되나 부분적으로 영지버섯 다당체와 BCG및 IFN-${\gamma}$를 모두 함께 병용 투여함으로써 각각 영지버섯 다당체와 BCG또는 영지버섯 다당체와 IFN-r을 투여하는 경우에 비하여 IL-1의 분비증가를 보였으며 TNF의 분비 역시 현저한 증가를 보여 영지버섯 다당체가 초기 감염시 숙주의 1차 방어기능에 관여함을 알 수 있었다.

• 약학회지
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• 제31권2호
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• pp.126-132
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• 1987

Polysaccharide fraction isolated from Coriolus versicolor (Copolang) was studied on the antitumor activity and immunostimulation activities with reference to PS-K. Copolang showed nearly equal antitumor activities to the PS-K and exhibited marked augmentation effects on the antibody mediated hypersensitivity reaction, delayed type hypersensitivity reaction and NK-cell activity in tumor bearing mice. But it did not show any noticeable effect on the antibody secreting cell and macrophage function in normal mice. These results indicate that the antitumor activity and immunostimulating effect of Copolang are comparable to those of PS-K.

• 한국식물생명공학회:학술대회논문집
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• 한국식물생명공학회 2003년도 식물바이오벤처 페스티발
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• pp.162-162
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• 2003