Zygotic embryos just after harvest of seeds were immature globular to heart stage. Maturation of zygotic embryos rapidly proceed when zygotic embryos together with small excised parts of endosperm were cultured on 1/3-strength MS solid medium with 2% sucrose, and the zygotic embryos were germinated within two months. Embryogenic callus was formed from the excised segments of germinating zygotic embryos of Eleutherococcus pedunclus on Murashige and Skoog (MS) medium with $4.5{\mu}M$ 2,4-D. The embryogenic callus formation occurred at a low frequency (less than 7%) from hypocotyl segments. The embryogenic calli were maintained on the same medium as primary medium. High frequency somatic embryogenesis was obtained after the cells were transferred to medium lacking 2,4-D. Cotyledonary embryos were germinated and converted into plantlets on medium with $20{\mu}M$$GA_3$. Embryogenic callus and somatic embryos were produced spontaneously on the surfaces of roots and/or hypocotyls of plantlets. The frequency of embryogenic callus formation was 85% in roots and 34% in hypocotyls. Therefore maintain of cell lines performed very easily. Plantlets with developed epicotyls at more than 3 cm acclimatized at high frequency (89%). While plantlets with small epicotyls (less than 1 cm) were acclimatized at low rate (32%). The soil survived plantlets produced new sprouts after over wintering in the field.
An efficient, rapid and large-scale in vitro clonal propagation of agronomically important Indian cereal crop genotypes (NSH27 & K5) of Sorghum bicolor (L.) Moench. by enhanced shoot proliferation in shoot tip segments was designed. MS medium fortified with plant growth regulators and coconut water markedly influenced in vitro propagation of Sorghum bicolor. In vitro plantlet production system has been investigated on Murashige and Skoog (MS) medium with the synergistic combination of 6-benzyladenine ($22.2\;{\mu}M$), kinetin ($4.6\;{\mu}M$), adenine sulphate ($2.8\;{\mu}M$), 5% coconut water and 3% sucrose which promoted the maximum number of shoots as well as beneficial shoot length. Subculturing of shoot tip segments on a similar medium enabled continuous production of more than 100 healthy shoots with similar frequency. When the healthy shoot clumps were cultured on MS medium fortified with 6-benzyladenine ($22.2\;{\mu}M$), kinetin ($4.6\;{\mu}M$), adenine sulphate ($2.8\;{\mu}M$), ${\alpha}$-naphthaleneacetic acid ($2.7\;{\mu}M$), ascorbic acid ($30.0\;{\mu}M$) and 5% coconut water, a rapid production of axillary and adventitious buds was developed after 8 wk culture. More than 300 shoots were produced 10 wk after culture. Rooting was highest (100%) on half strength MS medium containing 22.8 mM IAA. Micropropagated plants established in garden soil, farmyard soil and sand (2:1:1) were uniform and identical to the donor plant with respect to growth characteristics. These plants grew normally without showing any traits.
Shoot tip explants from germinated seeds of Alnus hirsuta were cultured on NT (Nagata and Takebe, 1971) mineral salts medium supplemented with 6% glucose, MS (Murashige and Skoog, 1962) vitamin mixture, polyvinylpyrrolidone (PVP) and $0-50\;\mu\textrm{M}$ 6-benzylaminopurine (BAP). Five $\mu\textrm{M}$ BAP was found to give the highest shoot multiplication rate. Accordingly about 200 shoots were obtained for further experiments by multiplying shoots on this medium for 4-5 months. Regardless of carbon sources, NT mineral medium produced 3-12 times of shoots than MS mineral medium did. On NT mineral medium, 3% sucrose, 3% glucose and 6% glucose yielded no significant differences. It was observed that media consisting of 1/4-1/2 strength NT mineral salts, 3% sucrose and $1-8\;\mu\textrm{M}$ IBA produced about 100% rooting rate. Almost 100% of the resulting plantlets survived after transfer to the soil by decreasing humidity stepwise.epwise.
An efficient in vitro protocol has been established for somatic embryogenesis and plantlet conversion of Korean wild ginseng (Panax ginseng Meyer). Wild-type and mutant adventitious roots derived from the ginseng produced calluses on Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with 0.5 mg/L 2,4-dichlorophenoxyacetic acid and 0.3 mg/L kinetin; 53.3% of the explants formed callus. Embryogenic callus proliferation and somatic embryo induction occurred on MS medium containing 0.5 mg/L 2,4-dichlorophenoxyacetic acid. The induced somatic embryos further developed to maturity on MS medium with 5 mg/L gibberellic acid, and 85% of them germinated. The germinated embryos were developed to shoots and elongated on MS medium with 5 mg/L gibberellic acid. The shoots developed into plants with well-developed taproots on one-third strength Schenk and Hildebrandt basal medium supplemented with 0.25 mg/L 1-naphthaleneacetic acid. When the plants were transferred to soil, about 30% of the regenerated plants developed into normal plants.
Kwon, Young Hee;Lee, Joung Kwan;Kim, Hee Kyu;Kim, Kyung Ok;Park, Jae Seong;Huh, Yoon Sun
Proceedings of the Plant Resources Society of Korea Conference
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2019.04a
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pp.55-55
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2019
Strawberry which is the genus Fragaria under family Rosaceae is one of the most important fruit plants for both fresh consumption and food processing in the temperate and subtropical countries. Propagation of strawberry is achieved either through runners or by in vitro micropropagation. Meristem tips, generally obtained from runners of virus-free plants, are commonly used to establish in vitro cultures, which are employed for mass propagation or as a source of plant material for regeneration and transformation experiments. This study was conducted to determine the optimal natural additives strength to improve sprouting shoot rate of apical meristem of strawberry 'Seolhyang'. Strawberry apical meristem at size (0.2 mm to 0.3 mm) with leaf primordials were cultured on the 1/3MS(Murashige & Skoog) medium supplemented with five natural additives such as coconut milk, maple sap, banana powder and peptone. The sprouting ratio and growth characteristics were evaluated after eight weeks after in vitro culture. Shoot ratio of 'Seolhyang' apical meristem was 72.9% in 1/3MS medium supplemented with maple sap. On the other hand, the low shoot ratio was observed 47.7% in 1/3MS medium supplemented with banana powder. Shoot length was different as natural additives but numbers of leaf was not significantiy different among the natural additives. As a result, the sprouting ratio and plant growth were enhanced effectively in 1/3MS medium with maple sap compared to the others.
Kim, Tae-Dong;Kim, Nam-Ho;Park, Eung-Jun;Lee, Na-Nyum
Journal of Plant Biotechnology
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v.48
no.1
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pp.54-61
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2021
This work describe an efficient method for the shoot induction and plant regeneration of seedling-derived apical bud explants of Tilia mandshurica Rupr. & Maxim. The highest rate of shoot induction (82.2%) was obtained when apical bud explants from juvenile seedlings (5 months old) were cultured on Murashige and Skoog (MS) medium containing 1.0 mg/L 6-benzylaminopurine (BAP). However, apical bud explants obtained from mature trees (12 years old) did not produce any shoots, even with BAP supplementation. Among the three cytokinins tested for shoot multiplication (BAP, zeatin, and kinetin), BAP was the most effective; the highest number of shoots per explant (2.1) was observed on MS medium supplemented with 1.0 mg/L BAP. In contrast, the longest average shoot length (3.0 cm) was observed after growth on MS medium with 2.0 mg/L zeatin. No multiplication occurred when apical bud explants were cultured with kinetin-supplemented media. During rooting of in vitro-elongated shoots, the highest rooting rate (100%) was observed in half-strength MS medium supplemented with 0.5 ~ 1.0 mg/L indole-3-butyric acid (IBA) or 3.0 mg/L 1-naphthaleneacetic acid (NAA). During the acclimatization process, plantlets that were rooted on the IBA (0.5 mg/L)-supplemented medium had the highest survival rate (100%) and maximum root length (18.5 cm). These findings suggest that a low concentration (0.5 mg/L) of IBA is appropriate for the rooting and acclimatization of T. mandshurica. Plants were successfully transferred to the greenhouse with a 100% survival rate. This protocol will be useful for the large-scale propagation of Tilia species.
Xinlei Bai;Han-Sol Lee;Hosakatte Niranjana Murthy;Hyuk-Joon Kwon;Soo-Ho Yeon;Jae-Yeong Ju;So-Young Park
Korean Journal of Plant Resources
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v.37
no.3
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pp.225-234
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2024
Chinese lobelia (Lobelia chinensis Lour.) is an important medicinal plant that is used in traditional Chinese, Korean, and Japanese medicine. The goal of the current study was to develop an in vitro propagation technique for Lobelia chinensis. We have examined the effects of different media compositions on the regeneration of shoots from nodal cultures of Lobelia chinensis, including Murashige and Skoog (MS), Gamborg (B5), Schenk and Hildebrandt (SH), Woody plant (WPM), Chu (N6), and Nitsch and Nitsch (NLN) media. Similar to this, shoot regeneration was examined using MS medium of double (2.0), full (1.0), half (0.5), and quarter (0.25) strengths. The regeneration of shoots was also examined with additions of 0, 1, 3, 5, and 7% (w/v) sucrose to MS media. For axillary shoot regeneration, full-strength MS medium supplemented with 3% (w/v) sucrose was shown to be the most effective of all the evaluated factors. On this medium, nodal explants optimally regenerated 4.5 shoots per explant and subsequently shoots involved in rooting on the same medium. The regenerated plants possessed abundant phenolics, flavonoids, and DPPH, ABTS, and FRAP antioxidant activities. High performance liquid chromatographic examination (HPLC) of the regenerated plants revealed an accumulation of myricetin and catechin in higher amounts.
An efficient protocol for in vitro multiple shoot bud induction and plant regeneration from mature green cotyledon derived callus tissues of Acacia sinuata has been developed. Callus formation occurs at all the concentrations of thidiazuron (TDZ) in Murashige and Skoog's (MS) medium, but 0.6 ${\mu}M$ proved to be the best with maximum callus formation frequency. Supplementation of TDZ in combination with indole-acetic acid (IAA) in MS media accelerates shoot bud organogenesis in differentiating callus tissues with 60-70% conversion of shoot buds into shoot Most efficient shoot organogenesis was recorded when TDZ induced calli were subcultured at different concentrations of 6-benzyla-denine (BA). Optimum shoot bud induction and plant regeneration from callus was achieved when 0.6 ${\mu}M$ (TDZ) induced calli were subcultured at 3.0 ${\mu}M$ (BA) where $16.6{\pm}0.74$ shoots/unit callus on obtained. Rooting in in vitro differentiated shoots was achieved when transferred to medium containing different concentration of indole-3-butyric acid (IBA) in full & half strength MS medium. The well rooted plantlets were hardened and transferred to net house with 90% survival rate.
In the present study, in vitro multiple shoot induction was achieved from cotyledonary node and stem nodal explants of cv. NARI-6 of safflower (Carthamus tinctorius L.). Among various growth regulators tested, MS salts and B5 vitamins supplemented with BA (6-Benzy-laminopurine) $17.76\;{\mu}M$ and KN (Kinetin) $6.96\;{\mu}M$ phytohormonal combination was found to be the most effective in initiating numerous shoot buds after 30 days of culture than BA ($4.44-44.39\;{\mu}M$) or KN ($2.32-46.40\;{\mu}M$) alone in the medium. In addition, 0.8% (w/v) agar (Hi-media) and 3.0% sucrose (w/v) was the optimum level for the formation of adventitious shoots. Further results showed the maximum shoot elongation occurred on MS medium with BA ($8.88\;{\mu}M$) and $GA_3$($11.56\;{\mu}M$) combinations. Efficient rooting occurred on quarter strength MS medium with NAA $10.74\;{\mu}M$. The regenerated plantlets were acclimatized and successfully transferred to the field.
The effect of sodium sulphate on shoot induction and multiple shoot formation from nodal explants of Vitex negundo L. was tested on Murashige and Skoog's (MS) medium fortified with different auxins, cytokinins and sucrose. Highest percentage $(97.78\%)$ of explants for shoot induction and multiple shoot (20.68/explant) production were observed in the combination treatment of $N^6-Benzyl$ adenine (BA) $(17.80\;{\mu}M/L)$, ${\alpha}-Naphthalene$ acetic acid (NAA) $(2.15\;{\mu}M/L)$ and $5\%$ sucrose supplemented with 100 mg/L sodium sulphate. In vitro raised shoots were rooted on the half-strength MS medium fortified with different concentrations of NAA, Indole-3-acetic acid (IAA), and Indole-3-butyric acid (IBA) alone and in combinations. Among the treatments, $4.90\;{\mu}M/L$ of IBA was found most effective $(95.56\%)$ in inducing roots. The rooted plantlets were shifted to glasshouse for acclimatization and later transferred to the field with cent percent survival. Furthermore, in vitro flowering was observed in the shoots cultured on MS medium supplemented with BA $(8.90\;{mu}M/L)$ and NAA $(1.61\;{\mu}M/L)$.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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