Lactobacillus helveticus ATCC 55163을 MRS 및 6%, 12% 유청 배지와 각각에 효모 추출물을 1% 첨가한 유청 배지에서 배양하여 흡광도, pH, 총 산도 값을 측정하므로서 생육특성을 분석하였다. MRS 및 유청 배지에서의 대수기는 $3{\sim}21$시간으로 나타났고, 유청 배지에서의 pH는 $3{\sim}24$시간에 급격한 감소현상을, 총 산도 값은 이 시간대에 급격히 증가하는 반비례 현상을 보였다. 같은 시간대에 12% 유청 배지에 효모추출물을 1% 첨가하였을 때 다른 시험구보다 높은 생균수, 낮은 pH 값과 높은 총 산도 값을 보여 유청 농도와 효모 추출물이 균의 증식에 영향을 주었다.
Lactobacillus acidophilus KCCM 32820과 Propionibacterium freudenreichii KCCM 31227을 MRS, RCM, MRS와 RCM 합성배지 및 whey broth에 배양하여 OD(Optical Density), pH, 총산도, 생균수 등의 생육특성을 조사하였다. L. acidophilus KCCM 32820을 NRS 배지에서 배양시 균 증식, 총산도 값의 증가율 및 pH 저하율은 9-21시간에 가장 컸으며, P. freudenreichii KCCM 31227을 RCM 배지에서 배양시에는 균의 증식, 총산도 값의 증가율 및 pH 저하율은 24-60시간에 가장 컸다. 또한 합성배지에서 P. freudenreichii KCCM 31227의 pH와 총산도 변화는 18-54시간에 가장 높았다. When broth에서는 L. acidophilus KCCM 32820이 P. freudenreichii KCCH 31227보다 균의 성장이 좋았으며, 두 균 모두 6%보다 12% whey broth에서, 고압증기멸균보다 저온살균한 whey broth에서 높은 균수를 나타냈고, 저온살균한 12% whey broth에서 증식이 가장 높았다.
본 연구에서는 꽃송이버섯 건물과 powder를 각각 Yeast Extract broth와 MRS broth에서 Lactoballius 4종(L. plantarum, L. acidophilus, L. helveticus, and L. delbrueckii)과 함께 발효시켰다. 발효액의 final pH는 pH $3.9{\pm}0.02$로 유산균의 일반적인 final pH 값과 일치함을 통해 유산균의 발효를 확인하였고, 유산균에 의한 꽃송이버섯 발효의 효과를 ${\beta}$-glucan 함량을 통하여 확인하였다. Yeast Extract broth 발효액은 YSB-2LP 1.65 g/100 g으로 ${\beta}$-glucan을 거의 함유하고 있지 않았지만 MRS broth 발효액은 Yeast Extract broth 발효액의 10배에 달하는 MPB-1LP 10.84 g/100 g을 함유하고 있었다. MPB-1LP는 꽃송이버섯 powder와 L.actobacillus plantarum으로 발효한 발효액으로 pH stress로 인해 만들어진 L. plantarum의 ${\beta}$-D-glucosidase에 의해 분해된 고분자량의 수용성 ${\beta}$-glucan이라 사료된다. 꽃송이버섯을 powder 상태로 L. plantarum과 함께 발효시켰을 때 꽃송이버섯의 수용성 ${\beta}$-glucan 추출 효율을 높일 수 있으며, 본 연구의 결과는 꽃송이버섯 유산균 발효물의 면역촉진 작용 연구를 위한 기초연구자료로 활용될 수 있을 것이다.
Lactic acid bacteria were isolated from piglets and chicken and characterized. Lactic acid bacteria showing resistance to low pH and bile, adhesion to intestinal epithelium cells, and the inhibition of Escherichia coli and Salmonella spp. were identified as Lactobacillus acidophilus. L. acidophilus PF01 survived for 2 h in MRS broth adjusted to pH 2. L. acidophilus CF07 was less resistant than L. acidophilus PF01 to pH 2, but survived at pH 2.5 for 2 h. Both of isolates were able to grow in MRS broth containing 0.3% (w/v) bile, with L. acidophilus CF07 being more tolerant to bile than L. acidophilus PF01. L. acidophilus PF01 and CF07 adhered specifically to the duodenal and jejunal epithelium cells of piglet, and the cecal and duodenal epithelium cells of chicken, respectively. Both of isolates did not adhere to the epithelium cells of the various animal intestines from which they were isolated. When L. acidophilus was cultured with E. coli and Salmonella spp. in MRS broth, MRS broth containing 2% skim milk powder or modified tryptic soy broth at $37^{\circ}C$, L. acidophilus PF01 and CF07 inhibited the growths of E. coli K88 and K99, and S. enteritidis and S. typhimurium, respectively. Both of isolates were found to possess the essential characteristics of probiotic lactic acid bacteria for piglet and chicken.
본 연구는 김치로부터 GABA 생성능이 우수한 젖산균을 분리 및 동정하고, 이 균주의 생리적 특성을 규명하여 상업적으로의 이용가능성을 검토하고자 실시하였다. 이를 위해 MSG 2%가 첨가된 MRS broth에 $37^{\circ}C$에서 18시간 배양한 후 GABA 함량이 $50{\mu}g/mL$ 이상 생산하는 75개의 균주를 1차로 선별하였으며, $90{\mu}g/mL$ 이상 생산하는 5 균주를 2차로 선별하였고, 선발된 5 균주를 MSG 1%, 2% 및 3% 함유된 MRS 배지에 각각 배양한 결과, K74 균주가 최종 선발되었다. K74 균주는 MSG 1%가 첨가된 MRS broth에서 GABA 함량이 $134.52{\mu}g/mL$이었고, MSG 2%와 3%가 첨가된 MRS broth에서GABA 함량이 각각 $212.27{\mu}g/mL$와 $234.63{\mu}g/mL$이었으며, 동정 결과 L. plantarum K74라고 명명되었다. L. plantarum K74의 최적 생장 온도는 $34^{\circ}C$이었으며, pH 4.4에 도달하기까지 18시간이 소요되었다. L. plantarum K74는 또한 답즙산과 산성의 pH에서 모두 우수한 생존력을 나타냈으며, 발암효소인 ${\beta}$-glucuronidase를 생성하지 않고 유당분해효소인 ${\beta}$-galactosidase를 약간 생성하는 것으로 나타났다. 항생제 내성 실험 결과 Kanamycin, Polymyxin B, Streptomycin에 내성을 Novobiocin, Bacitracin, Penicillin-G, Methicillin에감수성을나타냈으며, Escherichia coli와Salmonella typhimurium에 각각 54.9%와 46.3%의 억제 효과를 지니고 있고, Staphyloccous aureus에 대해서는 거의 억제 효과가 없는 것으로 나타났다.
The present study was undertaken to elucidate the antibacterial spectrum of L. casei phage type $J_1$ strain isolated from a fermented milk product against pathogenic enteric bacteria. Growth inhibitory effects and minimum inhibitory concentration(MIC) of culture supernatants of L. casei grown in MRS broth were measured by both plate culture method and microplate broth dilution technique against Salmonella typhi, Salmonella typhimurium, Shigella flexneri, Shigella dysenteriae, enterpathogenic E. coli, Klebsiella pneumoniae and Pseudomonas aeruginosa. The results are summarized as follows: 1. The MRS broth culture of L. casei gave a similar extent of growth inhibitory effects against S. typhi, S. typhimurium, S. flexneri, S. dysenteriae, E. coli, K. pneumoniae and P. aeruginosa, respectively. 2. The inhibitory effects of L. casei culture were observed either in whole broth culture or in culture supernatant, but neither the bacterial suspension nor the neutralized culture supernatant showed such as antibacterial activities. 3. The MIC titres of the culture supernatants were ${\log_2}5$ to ${\log_2}6$, whereas those of the neutralized culture supernatant dropped markdely to ${\log_2}2$ to ${\log_2}3$. These results indicated that major portion of growth inhibitory effects of MRS broth culture of L. casei against enteric bacterial pathogens was possibly due to the acids produced, and minor portion to other antibacterial substances.
본 연구는 백김치로부터 분리된 Lactobacillus paracasei BK57의 항균물질 생산을 위한 최적의 배양 조건을 검색하고, BK57 유산균으로 프레쉬 치즈를 제조한 후 균주의 활성과 유산 및 박테리오신 생산량을 측정하여 Listeria monocytogenes KCTC 3569에 대한 항균 활성을 조사하였다. 최대의 균 증식과 항균 물질 생산량은 pH 6.0으로 조정한 MRS broth에서 $37^{\circ}C$, 24시간 동안 호기적인 조건으로 배양했을 때 나타났다. 하지만, 효모추출물(2.0%)을 첨가한 전유 내에서 생성된 항균물질의 양과 유산균의 증식률은 MRS broth에서 보다는 다소 낮았다. 우유 내에서 L. monocytogenes의 저해율은 BK57 균주의 생균과 배양 상등액에 의해 높게 나타났으나, 유산균이 생산한 박테리오신에 의한 저해율은 우유 보다는 BHI broth 내에서 더 높게 나타났다. BK57 균주로 발효시킨 프레쉬 치즈를 $4^{\circ}C$와 $15^{\circ}C$에서 6일간 저장하는 동안 유산균수, 유산 생성량 및 박테리오신 활성은 유의한 변화가 없었다. 제조 직 후 프레쉬 치즈에 인위적으로 접종한 L. monocytogenes ($10^5CFU/ml$)의 균수는 각각의 온도대에서 6일 이내에 최소 15% 이상 감소되는 효과가 나타났으므로 BK57 균주를 발효유제품 제조에 이용할 경우 리스테리아균을 제어할 수 있는 생물학적 보존제로서의 가치를 확인하였다.
A galactooligosaccharide(GalOS)-producing yeast, OE-20 was selected from forty seven strains of yeast growing in Korean traditional Meju (cooked soybean) and the yeast was tentatively identified as Kluyveromyces maxianus var lactis by its morphology and fermentation profile. A maximum yield of 25.1%(w/w) GalOS, which corresponds to 25.1 g of GalOS per liter, was obtained from the reaction of 100 g per liter of lactose solution at 3$0^{\circ}C$, pH 7.0 for 18 h with an intracellular crude $\beta$-galactosidase. Glucose and galactosidase were found to inhibit GalOS formation. The GalOS that were purified by active carbon and celite 545 column chromatography were supplemented in MRS media and a stimulated growth was observed of some intestinal bacteria. In particular the growth rate of Bifidobacterium infantis in the GalOS containing MRS broth increased up to 12.5% compared to that of the MRS-glucose broth during a 48h incubation period.
Yogurt containing high ${\gamma}$-aminobutyric acid (GABA) was developed using lactic acid bacteria and germinated brown rice. Lactobacillus acidophilus, L. plantarum, and L. brevis OPY-1 strains were inoculated into Lactobacillus MRS broth for use as yogurt starter. After treatment with 5% monosodium glutamate in MRS broth, L. brevis OPY-1 strain isolated from Kimchi produced GABA concentration of 8,003.28 nmol/mL. Starter was inoculated into fermentation substrate mixture containing germinated brown rice extract and blend of powdered whole milk and skim milk. Samples were incubated, and viable cell colonies were counted. Highest number of lactic acid bacteria was reached between 16 and 20 hr. Concentrated rice milk fermented with high GABA-producing strain contained GABA concentrations of $137.17\;{\mu}g/g$ D.W., whereas concentrated fermented milk prepared by conventional method contained GABA of $1.29\;{\mu}g/g$ D.W. Sensory evaluation panelists gave favorable ratings to fermented rice milk containing high GABA concentration.
This study was carried out to develop a new starter culture for the fermented meat products. Nine strains of lactic acid bacteria isolated from kimchi inhibited the growth of Listeria monocytogenes. Among these nine strains, three strains showing antimicrobial activities against Escherichia coil, Staphylococcus aureus and Vibrio paraphaemolyticus were selected for further study. Growth of the strains was inhibited in MRS broth containing 5% of NaCl at $21^{\circ}C$, but not at $32^{\circ}C$. Nitrite depletion ratio of the strains was above 70% after 48h incubation at $21^{\circ}C$, and above 90% after 48h at $32^{\circ}C$ in MRS broth containing $200\mu$g/ml of nitrite, Nitrite concentration of cured meats and ground meats was depleted from 87.6% to 92.3% and from 45.5 to 640.6% by addition of the selected strains for 24h at $32^{\circ}C$, respectively. Three strains were identified as Lactobacillus plantarum(N4) and Lactobacillus lactis ssp. lactis(N-7, an-8).
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[게시일 2004년 10월 1일]
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