Houttuynia cordata Thunb (HCT) is a native herb found in Southeast Asia which features various pharmacological activities against allergy, inflammation, viral and bacterial infection, and cancer. The aims of this study were to determine the cytotoxic effect of 6 fractions obtained from silica gel column chromatography of alcoholic HCT extract on human leukemic Molt-4 cells and demonstrate mechanisms of cell death. Six HCT fractions were cytotoxic to human lymphoblastic leukemic Molt-4 cells in a dose-dependent manner by MTT assay, fraction 4 exerting the greatest effects. Treatment with $IC_{50}$ of HCT fraction 4 significantly induced Molt-4 apoptosis detected by annexinV-FITC/propidium iodide for externalization of phosphatidylserine to the outer layer of cell membrane. The mitochondrial transmembrane potential was reduced in HCT fraction 4-treated Molt-4 cells. Moreover, decreased expression of Bcl-xl and increased levels of Smac/Diablo, Bax and GRP78 proteins were noted on immunoblotting. In conclusion, HCT fraction 4 induces Molt-4 apoptosis cell through an endoplasmic reticulum stress pathway.
Terpinen-4-ol is a terpene found in the rhizome of Plai (Zingiber montanum (Koenig) Link ex Dietr.). In this study apoptogenic activity and mechanisms of cell death induced by terpinen-4-ol were investigated in the human leukemic MOLT-4 cell line. Terpinen-4-ol exhibited cytotoxicity in MOLT-4 cells, with characteristic morphological features of apoptosis by Wright's staining. The mode of cell death was confirmed to be apoptosis by flow cytometric analysis after staining with annexin V-FITC and propidium iodide. A sub-G1 peak in DNA histograms of cell cycle assays was observed. Terpinen-4-ol induced-MOLT-4 cell apoptosis mediated through an intrinsic pathway involving the loss of mitochondrial transmembrane potential (MTP) and release of cytochrome c into the cytosol. In addition, terpinen-4-ol also induced apoptosis via an extrinsic pathway by caspase-8 activation resulting in the cleavage of cytosolic Bid. Truncated-Bid (tBid) translocated to mitochondria and activated the mitochondrial pathway in conjunction with down-regulation of Bcl-2 protein expression. Caspase-3 activity also increased. In conclusion, terpinen-4-ol can induce human leukemic MOLT-4 cell apoptosis via both intrinsic and extrinsic pathways.
Objectives: This study was performed to investigate the effects of Rhus verniciflua Stokes (RVS) on apoptosis and autophagy in the human leukemic cell line, MOLT-4. Methods: Cell viability was measured by MTS/PMS assay, and cell cycle distribution was analyzed by flow cytometry. The expression levels of mRNA implicated in apoptosis and ER-stress were investigated with RT-qPCR. Lastly, apoptosis- and autophagy-related protein expressions were measured by Western blot analysis. Results: RVS inhibited proliferation of MOLT-4 in a dose-dependent manner over 24, 48 and 72 hours. RVS treatment also induced an increase in subG1 phase. Exposure to RVS increased the expression of the mRNAs encoding Bax and caspase-3, while decreasing the expression of Bcl-2 mRNA, suggesting that RVS induced apoptosis in MOLT-4 cells. Additionally, RVS extract up-regulated ER-stress related mRNAs such as IRE1α, CHOP, PERK and ATF6. Changes in RVS extract-induced apoptosis and autophagy proteins on MOLT-4 cells were also investigated. The level of Bcl-2 was decreased, whereas the levels of Bax, caspase-3, AMPK, Beclin-1, Atg5, p62, and LC3II were increased. Conclusion: These results suggest that RVS would be beneficial in the treatment of Acute Lymphoblastic Leukemia.
Ovarian cycle, marsupial development and molt cycle of Archaeomysis kokuboi were studied to understand these processes as a whole event. Based on morphological characters the marsupial development is divided into 3 stages, Embryonic stage (duration time of 4 days), Nauplioid stage (5 days) and Postnauplioid stage (4 days). Morphological description was ma de for the 3 stages, and each stage was examined in relation to the corresponding stages of ovarian cycle and molt cycle.
Objective : The aim of this study was to evaluate the efficacy of Injinchunggan-tang on Hepatitis C virus infection, and to clarify the mechanism of treatment by indentifying the effect of Injinchunggan-tang on cytokine secretion. Methods : In vitro model of HCV infection in MOLT 4 cell was used. The effect of Injinchunggan-tang on the attachment of HCV on MOLT 4 cell was studied by PCR method. The change of cytokine secretion according to Injinchunggan-tang treatment was investigated by ELISA. Results : Injinchunggan-tang inhibited the attachment of HCV on MOLT 4 in the concentration of $10-2{\mu\textrm{g}}/\mu\textrm{\ell}$ and $10-1{\mu\textrm{g}}/\mu\textrm{\ell}$. In cytokine assay, Injinchunggan-tang increased the secretion of IL-4 of mouse splenocytes and PBMC in 48 hour culture as well as the secretion of IL-12 of mouse splenocytes and PBMC in 48 hour culture, whereas it decreased the secretion of $IFN-{\gamma}$ of mouse splenocytes in 24 and 48 hour culture. Conclusion : The results of this study show that Injinchunggan-tang has an inhibitory effect on the attachment on HCV on Mo1t4 Cell, and that it increases the secretion of IL-4 and IL-12 of mouse splenocyte and PBMC.
Gun Whi, Ga;Soo Ki, Kim;Yong Gi, Kim;Jong Il, Kim;Kyung Il, Kim;Kwan Eung, Kim;Yong Ran, Kim;Eun Jip, Kim;Byoung Ki, An
Journal of Animal Science and Technology
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제64권4호
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pp.717-726
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2022
The study evaluated different molt-inducing methods to achieve the main goal of molting in commercial layers during molting and post-molting periods. A total of 400 60-week-old Lohmann Brown layers were randomly divided into five groups (eight replicates of 10 birds for each group). Laying hens in the fasting control group received no diet from day 1 to day 10. The second group received a molt-inducing diet recommended by the breeding company. The third group received a wheat bran-based diet. The fourth group received a commercial layer diet with 8,000 ppm zinc (as zinc oxide, ZnO). The fifth group received an induced molting diet given to the second group with 8,000 ppm zinc, respectively. Egg production in the fasting control group and groups fed a diet with ZnO were significantly lower (p < 0.001) than those in groups fed the molt-inducing and wheat bran-based diets without ZnO during molting. Egg laying in the fasting control group was rapidly reduced and stopped on the 5.9th day of molting. In both groups having molt treatment with ZnO, egg production was similarly reduced and ceased on the 6.9th day and 7.0th day of molting, respectively, none of them differed significantly from the control. Layers fed molt-inducing diet or wheat bran-based diet did not reach the cessation of laying even on the 28th d of molting period. Relative weights of the ovary and growing oocytes of layers subjected to fasting or fed diets with ZnO were significantly lower than those of other groups. During the first two weeks of post molting, layers fed molt-inducing diet with ZnO showed higher egg production than the other two groups (p < 0.01). The eggshell strength in the group fed the commercial diet with ZnO was significantly higher than those fed the molt-inducing diet or wheat bran-based diets at 6 weeks of post molting (p < 0.05). These results suggest that the non-feed withdrawal molting using ZnO is more effective in inducing molting and increasing post-molt egg production and egg quality than other methods using a molt-inducing diet alone or wheat bran-based diet without ZnO.
An experiment was conducted to evaluate the physiological changes of laying hens subjected to feed removal during induced molting while received probiotics in the drinking water. Post-molt performance and egg quality criteria were also studied. Ninety 78-week-old Hy-line W36 laying hens were divided into two treatment groups according to equal body weight and subjected to induced molting by continuous feed removal until around 30% BW reduction. The experiment lasted 12 wks consisting of 4-wk molting and 8-wk post-molt periods. Treatment 1 received no probiotics and was considered as the control. Treatment 2 was similar to the control except that hens received probiotics in the drinking water at 400 mg/L during feed deprivation. The results indicated that hens in both groups went out of production by Day 5. However, hens received probiotics reached 5 and 50% egg production sooner than the control (30 and 52 days vs. 31 and 54 days). Starvation during molting increased heterophil to lymphocyte (H/L) ratio, hematocrit and plasma T4 and $Na^+$ levels while plasma T3 and Cl- levels were decreased. Probiotics had no significant impact on BW reduction during molt. Post-molt egg production and egg mass were higher in hens which previously received probiotics, but these responses were not significant. However, feed conversion ratio was significantly better in hens which received probiotics. Hematocrit, plasma thyroid hormone concentrations (T3 and T4) and plasma $Na^+$, $K^+$ and Cl- levels during molting were not significantly influenced by supplementation of probiotics. However, H/L ratio showed a significant (p<0.05) reduction in birds which received probiotics suggesting beneficial effects of this product for feed-deprived laying hens. No significant difference was observed in post-molt egg quality criteria.
Metapenaeopsis dalei의 탈피과정 및 기작을 구명하기 위하여 1999년 3월부터 5월 사이에 통영 용초도 주변 해역에서 채집된 자 각장 $13{\pm}2mm$의 개체를 사용하였다. 강모의 발달과 탈피단계는 미지 부분을 절개, 현미경으로 관찰하여 그 미세구조를 바탕으로 판정하였다. M. dalei의 주 탈피단계는 5개 (Stage A, B, C, D와E)로 나눌 수 있었다. Stage B에서는 setal cone의 생성을 확인할 수 있었으며, Stage $D_1'$에서는 setal shafts을 관찰할 수 있었다. 탈피단계 (Stage E)는 매우 빠르게 진행되어, 1분을 초과하지 않았다.
본 연구는 산란계의 환우 유도와 환우 후의 생산성에 대한 환우용 사료의 영향을 평가하기 위해 수행하였다. ISA Brown 81수(62주령)를 무작위로 세 처리구(2개의 환우 시험구와 1 개의 대조구)로 분류하였다. 시험 개시 4주 동안은 적응 기간으로 하였으며, 대조구는 시험 기간 동안 옥수수-대두박 위주의 기초 사료를 자유 섭취하였다. 환우 처리구는 절식에 의한 처리구(절식 환우구)와 급여에 의한 처리구(급이 환우구)로 구분하였다. 환우구는 2주 동안 절식시킨 후, 1주 동안은 산란계 기초 사료로 대체한 다음 자유 급여하였다. 급이 환우구는 옥수수, 소맥피, 단백피 위주의 저단백질, 저에너지(CP 13.2%, ME 2,196 kal/kg) 사료를 4주 동안 급여한 후, 산란계 기초 사료를 자유 섭취하였다. 시험 기간 동안, 산란율, 계란품질, 사료 섭취량, 난포 수란관의 무게가 측정되었다. 환우기간 동안에 급이 환우구의 사료 섭취량은 대조구에 비해 낮았으며, 체중은 환우 처리구에서 대조구에 비해 유의적으로 낮게 나타났다. 산란율은 절식 환우구에서는 4일까지 0%로 감소하였으나, 급이 환우구에서는 10일까지 9.3%로 감소하였다. 환우 14일째, 환우 처리구의 난포 수란관의 무게는 대조구보다 낮게 나타났다. 환우 후, 환우 처리구의 산란율과 난가 두께가 향상되었으나, 처리구간에 유의적인 차이는 없었다. 급이 환우구의 난중은 절식 환우구의 난중보다 무겁게 나타났다. 결론적으로, 저단백질 저에너지 사료가 환우 유도와 환우 후의 생산성을 효과적으로 개선시키지만, 에너지 수준에 따른 환우용 사료에 대한 연구가 더욱 요구된다.
Background: Hepatitis C virus(HCV), a family of Flaviviridae, has a host cell-derived envelope containing a positive-stranded RNA genome, and has been known as the maj or etiological agent for chronic hepatitis, hepatic cirrhosis, and hepatocellular carcinoma. There remains a need to dissect a molecular mechanism of pathogenesis for the development of therapeutic and effective preventive measure for HCV. Identification of cellular receptor is of central importance not only to understand the viral pathogenesis, but also to exploit strategies for prevention of HCV. This study was aimed at identifying peptide mimotopes inhibiting the binding of E2 protein of HCV to MOLT-4 cell. Methods: In this study, phage peptide library displaying a random peptides consisting of 7 or 12 random peptides was employed in order to pan against E2 protein. Free HCV particles were separated from the immune complex forms by immunoprecipitation using anti-human IgG antibody, and used for HCV-capture ELISA. To identify the peptides inhibiting E2-binding to MOLT-4 cells, E2 protein was subj ect to bind to MOLT-4 cells under the competition with phage peptides. Results: Several phage peptides were selected for their specific binding to E2 protein, which showed the conserved sequence of SHFWRAP from 3 different peptide sequences. They were also able to recognize the HCV particles in the sera of HCV patients captured by monoclonal antibody against E2 protein. Two of them, showing peptide sequence of HLGPWMSHWFQR and WAPPLERSSLFY respectively, were revealed to inhibit the binding of E2 protein to MOLT-4 cell efficiently in dose dependent mode. However, few membrane-associated receptor candidates were seen using Fasta3 programe for homology search with these peptides. Conclusion: Phage peptides containing HLGPWMSHWFQR and WAPPLERSSLFY respectively, showed the inhibition of E2-binding to MOLT-4 cells. However, they did not reveal any homologues to cellular receptors from GenBank database. In further study, cellular receptor could be identified through the screening of cDNA library from MOLT-4 or hepatocytes using antibodies against these peptide mimotopes.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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