SIPK와 WIPK의 상위 단계 인산화 효소로 알려진 NtMEK2가 DEX 유도성 시스템에 의해 밝혀졌다. 이 NtMEK2 유전자가 지속적으로 활성화된 돌연변이체인 $NtMEK2^{DD}$의 발현은 SIPK와 WIPK를 활성화 시켜 주므로 과민감 반응과 같은 세포 괴사를 야기하는 것으로 나타나 NtMEK2-SIPK/WIPK 체계가 담배에서 방어 반응을 조절하고 있음을 알 수 있었다. 그러나 NtMEK2-SIPK/WIPK 체계에 의해서 조절 되는 하위 기질이나 방어관련 유전자들에 대한 연구는 아직 미비한 상태이다. 그래서 본 연구는 NtMEK2-SIPK/WIPK 체계에 매개되는 하위 유전자들을 분리하기 위하여 $NtMEK2^{DD}$ 형질전환 식물체를 이용해 ACP에 기초한 DDRT-PCR을 수행하였다. 그 결과 본 연구를 통해 처음으로 pI2-4, MTS2, SINA, CDM1, HRGP 및 DEG45를 포함해 여섯 개의 DEG들을 선발하였다. 이 유전자들의 발현은 $NtMEK2^{DD}$ 형질전환에서 다시 확인하였으며 특히 pI2-4, CDM1, HRGP의 유전자 발현은 다른 유전자들과 비교해 볼 때 살리실산과 담배모자이크바이러스에 강하게 반응하여 증폭됨을 알 수 있었다. 이러한 결과를 볼 때 NtMEK2-SIPK/WIPK 체계에 의해 조절되는 세 개의 유전자는 병저항성에 관여하고 있음을 제시한다 하겠다.
Biological exposure indices (BEI) of toluene, perchloroethylene (PCE) and methyl ethyl ketone (MEK) for Korean workers were studied respectively. Environmental exposures in workplace to organic solvent were measured by personal sampling. Blood toluene, blood perchloroethylene, urinary trichloroacetic acid and urinary MEK were determined by headspace gas chromatography. Urinary hippuric acid were determined by HPLC and corrected by creatinine. BEIs for Korean workers were calculated as the levels of determinants which are correspond to permissible exposure limits in Korea. Blood toluene level of 2.2mg/l and urinary hippuric acid level of 1.7g/g creatinine are correspond to an exposure of 100 ppm toluene. Blood PCE concentration of 1.6mg/l and urinary trichloroacetic acid concentration of 2.9mg/l are correspond to an exposure of 50ppm PCE. Urinary MEK concentration of 1.0mg/l is correspond to an exposure of 200ppm of MEK. BEIs for Korean workers determined in this study are very different to ACGIH's BEI as urinary determinants are much lower and blood determinants are much higher than ACGIH's BEI.
공침법에 의하여 얻어진 고순도 극미립자인 $BaTiO_3$ 분말의 분산거동을 조사하였다 분산매로는 수용매와 비수용매인 methyl ethyl ketone(MEK)과 ethanol (ETOH)을 이용하였다 Suspension 에서의 입자의 분산상태는 pH 변화와 MEK, ETOH의 몰 비를 조절하여 각각의 suspensions에 polymer(polyvinyl butyral)를 첨가시켜 변화하였으며 그 거동은 유동학적 성질 침강 거동 electrokinetic 성질을 측정함으로써 파악되었다 비 수용매의 몰 비가 3:1 MEK/ETOH-$BaTiO_3$에서 polymer를 0.5~1% 첨가시켰을 때 입자의 분산이 가장 잘 이루어졌다.
Anthrax lethal toxin은 탄저병의 치사원인이 되는 독소이며, Lethal toxin은 두 종류의 단백질 PA (Protective antigen)과 LF (lethal factor)로 구성되어 진다. PA는 세포표면의 수용체와 결합하여 LF를 세포질 안으로 이동시켜 주는 역할을 한다. LF는 금속 이온$(Zn^{2+})$ 의존적 단백질 가수분해 효소로써 MKKs[MAPK (mitogen-activated protein kinase) kinases] 집단 단백질의 아미노 말단 부분을 절단하여 대상 세포를 죽음으로 유도하는 것으로 알려져 있다. 본 연구에서는 LF에 대한 특성 분석 및 억제제 개발에 과한 연구를 위해 cell-based high-throughtput screens 개발에 선행되어야 하는 기초 자료를 마련하는데 그 목적이 있다. 이를 위하여 LF의 절단 대상이 되는 기질이 MEK1을 yeast내에서 동시 발현시켜 LF의 활성을 검증하였다. 먼저 효모(Saccharomyces cerevisiae)를 숙주로 하여 LF의 기질인 MEK1 발현 vector를 구축하였고, 구축된 발현 system을 기본을 LF 활성을 검증하고자 yeast에 형질전환하여 plasmid의 안전성 및 MEK1 유전자의 발현 및 LF에 의한 MEK1 아미노말단의 절단 부위를 확인하였다. 본 연구는 세포내 검증 system 도입의 기초적 자료를 제공하였으며, yeast내의 MEK1 발현은 탄저병의 저해제 선별 및 활성 측정 검증을 생체에서 고효율적이며, 안정적으로 할 수 있다는 가능성을 나타냈다.
본 논문은 $TiO_2$(Degussa, P-25), 바인더(A-9540) 그리고 용제의 배합비율을 바꾸어 코팅액을 제조하여 알루미늄 금속판에 코팅한 후, 고농도의 IPA를 주입하여 분해효율을 고찰하였다. 고형분 함량 비율 변화에서는 $TiO_2$ 함량은 증가하고 바인더가 감소할수록 좋은 효율을 보였고, 용제는 에탄올과 MEK 두 가지 중에 MEK의 분해효율이 좋았다. 용제(MEK)함량 비율 변화에서는 일정량의 용제가 있을 경우 분해효율이 좋았고, 용제함량이 낮아질 경우 코팅액 점도가 높아지고 건조 후에는 표면이 갈라지는 현상을 보였다. 결국, 용제함량 비율 변화는 바인더 함량 실험에도 영향을 주어 1.75 : 0.25 : 10일 때 가장 좋은 분해효율을 보였다.
The principal objective of this study was to evaluate the chemopreventive and therapeutic effects of a combination of all-trans-retinoic acid (RA) and knockdown of delta-like 1 homologue (Drosophila) (DLK1) on neuroblastoma, the most common malignant disease in children. As unfavorable neuroblastoma is poorly differentiated, neuroblastoma cell was induced differentiation by RA or DLK1 knockdown. Neuroblastoma cells showed elongated neurite growth, a hallmark of neuronal differentiation at various doses of RA, as well as by DLK1 knockdown. In order to determine whether or not a combination of RA and DLK1 knockdown exerts a greater chemotherapeutic effect on neuroblastoma, cells were incubated at 10 nM RA after being transfected with SiRNA-DLK1. Neuronal differentiation was increased more by a combination of RA and DLK1 knockdown than by single treatment. Additionally, in order to assess the signal pathway of neuroblastoma differentiation induced by RA and DLK1 knockdown, treatment with the specific MEK/ERK inhibitors, U0126 and PD 98059, was applied to differentiated neuroblastoma cells. Differentiation induced by RA and DLK1 knockdown increased ERK phosphorylation. The MEK/ERK inhibitor U0126 completely inhibited neuronal differentiation induced by both RA and DLK1 knockdown, whereas PD98059 partially blocked neuronal differentiation. After the withdrawal of inhibitors, cellular differentiation was fully recovered. This study is, to the best of our knowledge, the first to demonstrate that the specific inhibitors of the MEK/ERK pathway, U0126 and PD98059, exert differential effects on the ERK phosphorylation induced by RA or DLK1 knockdown. Based on the observations of this study, it can be concluded that a combination of RA and DLK1 knockdown increases neuronal differentiation for the control of the malignant growth of human neuroblastomas, and also that both MEK1 and MEK2 are required for the differentiation induced by RA and DLK1 knockdown.
It is suggested that FGF/Ras/MEK/Erk signaling plays crucial roles in specification and cell division of the mesodermal precursor cells in ascidian embryos. To investigate how the number of cell division in tissue precursor cells is determined, we have characterized Wee1 homolog, Hr-Wee1 of the ascidian Halocynthia roretzi. We found that the Hr-Wee1 mRNA is expressed both maternally and zygotically. Maternal transcript is localized to the cytoplasm in the animal cells, while zygotic expression is seen in cells of the endoderm lineage from 32-cell to 110-cell stages. Zygotic in situ signal is detected in the A-line neural plate cells of neurulae, and in epidermal cells of the head region of tailbud embryos. Embryos treated with MEK signaling inhibitor showed a similar pattern to normal embryos in expression of Hr-Wee1. Therefore, it is likely that MEK signaling does not affect the maternal and zygotic expression of Hr-Wee1.
투과 증발은 막을 근거로 한 에너지 절약형 분리공정으로서 전통적인 증류 분리공정과 비교하여 높은 선택도를 나타내기 때문에 액상 혼합물 분리에 대체 공정으로서 주목받고 있다. 투과 증발에 이용되는 분리막으로서 제올라이트 분리막은 고분자 분리막보다 열적, 기계적, 화학적 안정성이 우수하며 특히 silicalite-1 분리막은 큰 소수성을 나타내기 때문에 유기화합물을 수용액으로부터 효과적으로 분리할 수 있다. 본 연구에서는 silicalite-1 분리막을 이용한 투과 증발 실험을 통하여 케톤계 휘발성 유기화합물을 분리하였다. 아세톤과 MEK의 공급 농도가 증가함에 따라 아세톤과 MEK의 투과 플럭스는 증가하였으며 선택도는 감소함을 관찰할 수 있었다.
Members of the colony stimulating factor cytokine family play important roles in macrophage activation and recruitment to inflammatory lesions. Among them, granulocyte-macrophage colony stimulating factor (GM-CSF) is known to be associated with immune response to mycobacterial infection. However, the mechanism through which Mycobacterium tuberculosis (MTB) affects the expression of GM-CSF is poorly understood. Using PMA-differentiated THP-1 cells, we found that MTB infection increased GM-CSF mRNA expression in a dose-dependent manner. Induction of GM-CSF mRNA expression peaked 6 h after infection, declining gradually thereafter and returning to its basal levels at 72 h. Secretion of GM-CSF protein was also elevated by MTB infection. The increase in mRNA expression and protein secretion of GM-CSF caused by MTB was inhibited in cells treated with inhibitors of p38 MAPK, mitogen-activated protein kinase kinase (MEK-1), and PI3-K. These results suggest that up-regulation of GM-CSF by MTB is mediated via the PI3-K/MEK1/p38 MAPK-associated signaling pathway.
Toluene, n-hexane, and methyl ethyl ketone(MEK) were exposed to the activated carbon fiber(ACF) and 3M(Model 3500) diffusive samplers under low and high humidity levels. In order to evaluate these two samplers, the sampling capacity, sampling rate, reverse diffusion, and storage stability were obtained. At low humidity level($8{\pm}3%RH$), the adsorption amount of all three organic vapors to the ACF diffusive sampler showed a positive linear relationship up to 8 hours. However, at high humidity level($90{\pm}5%RH$), n-hexane and MEK maintained a positive linear relationship up to 1.5 hrs, but decreased in their adsorption amounts afterwards. On the other hand, the adsorption amount of n-hexane, MEK, and toluene to 3M diffusive sampler showed almost a positive linear relationship up to 8 hours at both humidity levels. At low humidity level, there was almost no reverse diffusion for both 3M and ACF diffusive samplers. However, when the ACF diffusive sampler was used at high humidity level, there was about 52.63% of MEK sample loss and about 92.59% of n-hexane sample loss. The storage stabilities of the ACF and 3M diffusive samplers were both relative stable except for MEK. In the case of MEK, the difference between the analysis of the organic vapor right after the sampling and that of 3 weeks later at room temperature was 45% for the ACF diffusive sampler and 18% for the 3M diffusive sampler. Since the storage stability of the samples stored in a refrigerator was relatively stable, they need to be refrigerated until the analysis is done.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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