• 한국미생물학회:학술대회논문집
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• 한국미생물학회 2008년도 International Meeting of the Microbiological Society of Korea
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• pp.163-163
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• 2008

Methylophaga aminisulfidivorans $MP^T$, a restricted facultative marine methylotrophic bacterium, was able to utilize methanol as a sole carbon and energy source, and possessed a methanol dehydrogenase (MDH) that is a key enzyme in the process of methanol oxidation. During purification of MDH, three types of MDH (MDH I, II, and III) were obtained in the cell free extracts from $MP^T$ cells grown on methanol. When analyzed by SDS-PAGE and ESI-FT ICR MS, MDH I was confirmed to consist of two subunits and with molecular masses of ~66 and ~10 kDa, respectively, in a form of ${\alpha}_2{\beta}_2$. While MDH II and MDH III contained an additional ~30 kDa protein, designated ${\gamma}$, in a form of ${\alpha}_2{\beta}_2{\gamma}$ and ${\alpha}_2{\beta}_2{\gamma}_2$, respectively. MDH III showed 1.5.2.0 times higher activity than MDH II, while MDH I remained the lowest activity. Based on these observations and experimental data, it seems that the original MDH conformation is ${\alpha}_2{\beta}_2{\gamma}2$ within $MP^T$ growing on methanol, and subunit ${\gamma}$ keeps MDH in an active form, and/or makes MDH easily bind to the substrate, methanol.

• 미생물학회지
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• 제34권4호
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• pp.225-230
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• 1998

카드뮴 1 mM를 함유한 배지에서 배양된 고도 카드뮴 내성 효모 Hansenula anomala B-7으로부터 분리한 malate dehydrogenase(카드뮴 적응 MDH)와 카드뮴을 함유하지 않은 배지에서 배양된 사용균주의 malate dehydrogenase(카드뮴 비적응 MDH)활성에 미치는 금속 이온의 영향을 비교 검토했다. 카드뮴 적응 MDH와 비적응 MDH 활성은 1 mM $Cd^{2+}$에 의하여 대조구에 비하여 450%와 150%가 각각 증가되었으며, 카드뮴 적응 MDH 활성은 1 mM $Zn^{2+}$, $Mn^{2+}$과 $Cu^{2+}$에 의하여 각각 147%, 150%와 135% 증가되었다. 더욱이, 카드뮴 적응 MDH 활성은 2 mM $Cd^{2+}$와 2.5 mM $Zn^{2+}$에 의하여 각각 925%와 250% 증가되었다. 카드뮴에 의한 카드뮴 적응 MDH의 활성 촉진은 효소반응 4분으로 최대값에 도달했으나, 카드뮴 비적응 MDH의 활성 촉진은 효소 반응 초기인 1분으로 최대값에 도달했다. 카드뮴 적응 MDH와 비적응 MDH의 Km값은 두 효소 모두 6.9 mM L-malate였다. 그러나, 카드뮴 비적응 MDH 활성은 카드뮴에 의하여 Km값이 변화되지 않았고 Vmax만 증가되었으나 카드뮴 적응 MDH 활성은 카드뮴에 의하여 Km값과 Vmax값 모두 변화되었다.

• Journal of Microbiology
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• 제35권3호
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• pp.200-205
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• 1997

Bothl $Ca^{2+}$ and Sr$^{2+}$-containing methanol dehydrogenases (MDH) were purified to homogeneity with yields of 48% and 42%, respectively, from Methylabacillus methanolovorus sp. strain SK5. Most of the biochemical and structural properties were similar to each other. However, some differences were found: (1) although the overall shape of the absorption spectrum of Sr$^{2+}$-MDH was very similar to that of $Ca^{2+}$-MDH, the absorption intensity originating from the cofactor in Sr$^{2+}$. MDH was higher than that in $Ca^{2+}$-MDH. Small blue shift of the maximum was also observed. These are probably due to a difference in redox state of the cofactors in $Ca^{2+}$ and Sr$^{2+}$-MDH; (2) Sr$^{2+}$-MDH was more heat-stable than $Ca^{2+}$-MDH above 56$^{\circ}C$; (3) the V$_{max}$ values for the methanol-dependent activities of Sr$^{2+}$- and $Ca^{2+}$-MDH in the presence of 3 mM KCN were 2.038 and 808 nmol/mg protein/min, respectively. In addition, the $K_{m}$ values of Sr$^{2+}$ and $Ca^{2+}$ MDH for methanol were 12 and 21 $\mu$M, respectively; (4) the endogenous activity of $Ca^{2+}$-MDH was more sensitive than that of Sr$^{2+}$-MDH in the presence of cyanide; (5) Diethyl pyrocarbonate treatment increased the enzyme activities of $Ca^{2+}$- and Sr$^{2+}$-MDH 4.2- and 1.4-folds, respectively. These results indicate that Sr$^{2+}$ stabilizes the structural conformation and enhances the activity of MDH more than $Ca^{2+}$.

• 한국동물학회지
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• 제29권3호
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• pp.208-214
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• 1986

電氣泳動法에 의해 $Mdh-1^{MM}, Mdh-1^{MS}$ en allotype으로 분류된 경상남도 남해군 동천천産 갈겨니 (Zacco temmincki)의 核型을 비교하였다. 이들 두型의 염색체수는 2n=48로 동일하지만, 7번째 염색체는 $Mdh-1^{MM}$型은 Submetacentric chromosome, $Mdh-1^{MS}$型은 metacentric chromosome으로 큰 차이를 보였다. 따라서, $Mdh-1^{MM}$型은 6쌍의 metacentric chromosome과 6쌍의 submetacentric chromosome 및 12쌍의 acrocentric chromosome으로 구성되어 있으나, $Mdh-1^{MS}$型은 7쌍의 metacentric chromosome과 5쌍의 submetacentric chromosome 및 12쌍의 acrocentric chromosome으로 구성되어 있음을 알수 있다. 이러한 sympatric한 지역에서 이들 두型의 hybrid型이 존재하지 않는 점으로 보아 이들사이에는 生殖的 隔離가 일어난 것으로 추측된다.

• 한국동물학회지
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• 제17권4호
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• pp.163-166
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• 1974

Cellulose acetate 전기영동법으로 부족류의 MDH isozyme 은 1$\\sim$2개의 band로 구성되어 있음을 알았다. 이들 부족류의 MDH isozyme은 종에 따라 특징적이므로 생화학적인 다양성의 한가지 증거라 할 수 있다. 그러나 MDH isozyme pattern은 계통상의 유연 관계를 뚜렸하게 나타내고 있지는 않다. 몇 가지 실험하여본 종에 있어서 NAD-MDH 다형현상이 나타나지 않았다.

• 한국응용곤충학회지
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• 제34권3호
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• pp.181-190
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• 1995

암컷 Aedes aegypti의 난성숙과장에서 새로 나타나는 malate dehydrogenase(L-malate, $NAD^+$ oxidoreductase, EC 1.11.37, MDH)를 DEAE-Sepharose, Sulphonyl-Sepharose, Cibacron 3FGA affinity chromatography를 이용하여 분리정제하여 그 특성을 조사하였다. 분자량은 70,000 dalton정도의 dimer 형태로 되어 있으며 최적 pH는 malate-oxaloacetate반응에서는 pH 9.0~9.2, oxaloacetate-malate 반응에서는 pH 9.8~10.2이었다. 정재된 MDH는 mitochondria에 위치하고 있으며 기질로서 malate에 대한 Km값의 경우 $1.29 \times 10^{-4}$ M, oxaloacetate에 대한 Km 값은 $6.58\times 10^{-4}$M, NAD에 대한 Km값은 $0.76\times 10^{-3}$ M이며 NADH에 대한 Km 값은 $3.8\times 10^{-3}$ M 을 보이고 있으며 각각의 기질에 의한 저해현상을 보이고 있었다. 기질에 대한 Km값을 부분적으로 분리한 DEAE-sepharose에 흡착된 원형질 MDH와 비교한 결과 malate에 대한 Km 이 $8.92\times 10^{-3}$으로 상당한 차이를 보이고 있었다. 또한 정제된 MDH는 cltrate, $\alpha$-ketoglutarate, ATP 등의 대사산물에 의하여 저해작용을 받았다. ATP 및 citrate에 의한 MDH 활성도 저해는 oxaloacetate-malate반응에서 보다는 malate-oxaloacetate 반응에서 덜 일어났다. Oxaloacetate-malate 반응의 경우 ATP에 의하여저해작용이 완전히 일어났으며 malate-oxaloacetate반응에서는 cltrate에 의하여 저해작용이 일어나지 않았다. 흡혈 후 생성되는 MDH는 난소에서 합성되며 흡혈 수 난소에서 18시간 때부터 활성도가 나타나 48시간 이후 최고 활성도가 유지되는데 TCA회로의 isocitrate dehydrogenase 의 경우 난소내에서의 활성도 변화가 MDH의 변화 양상과 같았다.

• 한국동물학회지
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• 제23권4호
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• pp.263-272
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• 1980

개구리 2種 (Rana nigromaculata와 Rana plancyi chosenica)과 도룡뇽 (Hynobius leechii)의 胚發生에 EK른 lactate dehydrogenase (LDH)와 malate dehydrogenase (MDH)의 isozyme 組成變化를 polyacrylamide 電氣泳動法으로 조사 분석하고 이를 成體의 몇 器官과 비교하였다. R. nigromaculata에서 LDH의 B subunit의 合成을 지배하는 유전자는 heterozygous이고 H. leechii에서는 A subunit의 合成을 지배하는 유전자가 heterozygousfk고 추정된다. 위의 3種의 兩棲類\ulcorner 胚에서 發生初期에는 LDH-1 (심장형)의 活性이 높으나 發生이 진행됨에 따라 LDH-5 (근육형)의 活性도 점차 증가된다. MDH의 경우 發生初期부터 MDH-m과 MDH-s가 존재하고 발생 全段階를 통하여 그 組成에는 변화가 없으나 MDH-m의 活性이 점차 증가하는 경향을 보인다.

• 한국동물학회지
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• 제15권3호
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• pp.105-110
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• 1972

cellulose acetate 전기영동법으로 한국산 개구리목의 동물 6종에서 LDH 와 MDH isozyme을 조사하였다. 개구리목의 MDH 와 LDH isozyme은 종에 따른 특징을 잘 나타내고 있었으며 포유류나 조류와는 다름을 알 수 있었다. 참개구리와 금개구리에서는 LDH 나 MDH 모두 두개의 isozyme으로 구성되어 있었고, 이두 isozyme의 pattern 역시 거의 같다고 볼 수 있었다. 산개구리 전뇌의 LDH isozyme 역시 두개의 isozyme만을 보였으나 그 pattern은 참개구리나 금개구리와 근본적으로 달랐다. 두꺼비와 무당개구리는 다섯개의 LDH isozyme을 가지고 있으나 그 pattern은 전혀 달랐다. 한편 옴개구리에서는 세개의 LDH isozyme을 볼 수 있었다. 모든 시험동물에서 두개의 MDH isozyme을 발견 할 수 있었는데 참개구리의 후엽과 소뇌 및 연수혼합 물에서는 단 하나의 MDH isozyme만이 검출되었다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제12권3호
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• pp.476-482
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• 2002

Methanol dehydrogenase (MDH) and c-type cytochromes from marine methanol-oxidizing bacterium, Methylophaga sp. MP, were purified and characterized. The native MDH had a molecular mass of 148 kDa and its isoelectric point was 5.5. Two c-type cytochromes, $c_L\;and\;c_H$, were found, and their isoelectric points were 3.4 and 8.0, respectively. The purified MDH had higher thermal stability than that of the other soil methylotrophic bacteria. The electron flow rate from MDH to cytochrome $c_L$was higher than that from MDH to cytochrome $c_H$, indicating that the physiological primary electron acceptor for MDH is cytochrome $c_L$. The electron transfer from MDH to phenazine ethosulfate (PES, artificial electron acceptor) in the two dye (PES/DCPIP)-linked assay system was not inhibited by NaCl, whereas the electron flow from MDH to cytochrome $c_L$ in the cytochrome/DCPIP-linked assay system was suppressed significantly by NaCl. Metal chelating agents such as EDTA showed the same effects on the MDH activity.

• 환경생물
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• 제17권2호
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• pp.209-215
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• 1999

온도, pH및 염도 stress가 굴(Crassostrea gigas)의 malate dehydrogenase isozyme에 미치는 영향을 전기영동법으로 분석하였다. 대조군의 MDH isozyme은 2개의 band가 양극 쪽으로 이동되어 분리되었다. 각 실험 온도와 pH를 12시간 노출시킨 실험군에서는 1개의 band만 양극 쪽에서 분리되었고, 24시간과 48시간 노출한 실험군에서는 2개의 band가 모두 양극 쪽에서 분리되었다. 염분 농도가 5ppt 와 3ppt에서 12시간 노출시켰을 때 각각 2개의 band가, 10ppt와 40ppt에서는 각각 3개의 band가 분리되었고, 24시간과 48시간 노출 실험군에서는 2개의 band가 양극 쪽에서 분리되었다. 모든 isozyme pattern에서 각 band의 활성도는 실험 조건에 따라 각각의 특이성이 나타났다. 결과적으로 MDH isozyme의 변화는 굴이 환경 stress에 대한 생화학적 반응의 결과로 간주된다.