We evaluated cytotoxic effect based on the MTT assay and identified altered proteins in 5-FU(fluorouracil) treated HT29 cells using two-dimensional gel electrophoresis and MALDI-TOF/TOF-MS. As proteins inducing apoptosis, siah binding protein 1 and p47 protein isoform a were up-regulated and tumor protein translationally-controlled 1 was down-regulated by 5-FU treatment. And mannose 6 phosphate receptor binding protein 1 controls DNA mismatch repair system was increased. We suggest 5-FU promotes a cytotoxicity under the action of these proteins in colon cancer cells.
Proceedings of the Korea Society of Poultry Science Conference
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2006.11a
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pp.74-76
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2006
닭의 간은 해독작용, 당의 저장, 혈장 단백질의 합성 등 주요 기능을 하는 것으로 알려져 있다. 본 연구는 간에서 성장 단계별로 발현량에 차이를 보이는 단백질들을 비교해 보았다. 2차원적 전기 영동에 의해 분리된 300개 이상의 단백질들이 확인되었으며 이 중 성장 단계별 특이적인 13개의 단백질은 MALDI-TOF MS에 의하여 분석이 되어졌다. 본 연구를 통하여 밝혀진 단백질들은 생화학적인 연구에 중요한 자료를 제공할 것으로 사료된다.
Two polysaccharides, ACP-UMP and ACP-ULF, were purified from the aerial part of Artemisia capillaris by anion-exchange chromatography, ultrafiltration, and gel filtration chromatography. The polysaccharides appeared to be homogenious from the results of HPLC. The molecular weights of ACP-UMF and ACP-ULF were estimated to be 16305.92 D and 3292.26 D, respectively, by MALDI-TOF MS. The sugar compositions were determined by GC to be arabinose 10.05%, xylose 1.67%, mannose 5.45G, galactose 39.06%, glucose 15.43% for ACP-UMF and arabinose 11.60%, xylose 11.15%, mannose 6.37% galactose 32.47%, glucose 18.35% for ACP-ULF. A polysaccharide, SP-M was determined to be 2462.52 D by MALDI-TOF MS. SP-M consisted mainly of rhamnose 36.49%, arabinose 29.00%, and glucose 19.38%. Incubation of CCl4-intoxicated hepatocytes with ACP-UMF reduced the levels of glutamic pyruvic transaminase (GPT) and cellular malondialdehyde (MDA) to 62.8% and 23.8%. ACP-ULF also reduced the levels of GPT and MDA to 46.1% and 38.1% and 26.3%, respectively.
Matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry (MALDI-TOF MS) was used to observe folic acid and its derivatives such as tetrahydrofolate and 5-methyltetrahydrofolate in a vitamin tablet and in foods. Folic acid in a vitamin tablet was determined using angiotensin I as an internal reference. Tetrahydrofolic acid, 5-methyltetrahydrofolic acid, and an oxygenated folate were observed from a human blood sample using graphite plate. The results show that these mass spectrometric methods are useful for quickly obtaining a profile of folates.
The cleavage of fullerene oxides with several aromatic amines such as 4-nitroaniline, 3-nitroaniline, 4-isopropylaniline in the present of $FeCl_3$ occurred under ultrasonic irradiation in air at $25{\sim}43^{\circ}C$. The aminated fullerenes were confirmed by MALDI-TOF-MS and UV-vis spectra.
Inclusion compounds using cyclic poly(oxyethylene)s as host molecules have been used to polymerize pyrrole chemically in aqueous medium. This general synthetic strategy makes it possible to grow rigid aromatic polymers in aqueous medium by chemical oxidation method. It is an easy method to obtain rigid polymers in a very mild manner. Some threaded and water-soluble polypyrroles are obtained, and their characterization is performed by NMR, IR, UV, and MALDI-TOF MS measurements.
MALDI-TOF-MS technique was applied to obtain structural and compositional information of synthetic polyamides, Nylon6 and Nylon66. Mass spectra of both the original and the hydrolyzed polyamide samples were analyzed using the self calibration method as well as the internal calibration method with the standard materials of known masses. The MALDI-TOF mass spectra of Nylon6 samples showed the presence of protonated, sodiated, and potassiated ions that were assigned to cyclic and NH2/COOH terminated linear oligomers. From the MALDI-TOF mass spectra of Nylon66 samples, the potassiated linear oligomers with three different end groups are identified as well as the cyclic oligomers, i.e., NH2/COOH terminated oligomers, NH2/NH2 terminated oligomers, and COOH/COOH terminated oligomers. Full characterization of the molecular species and end groups present in the polyamide samples has been achieved, and also the changes in mass spectral patterns after the hydrolysis of the samples are presented.
Various microorganisms play important roles in food fermentation, food spoilage, and agriculture. In this study, the biotype of 54 yeast and bacterial strains having high potential for utilization in food and agriculture, including Candida spp., Lactobacillus spp., and Acetobacter spp., were characterized by matrix-assisted laser desorption/ionization time-of flight mass spectrometry (MALDI-TOF MS). This characterization using a fast and robust method provides much-needed information on the selected microorganisms and will facilitate effective usage of these strains in various applications. Importantly, the unique protein profile of each microbial species obtained from this study was used to create a database of fingerprints from these species. The database was validated using microbial strains of the same species by comparing the mass spectra with the created database through pattern matching. The created reference database provides crucial information and is useful for further utilization of a large number of valuable microorganisms relevant to food and agriculture.
Sonochemical synthesis of fullerene oxides $[C_{70}O_n](n=1{\sim}2)$ by fullerene$[C_{70}]$ and metal hexacarbonyl complexes $M(CO)_6$(M=Cr, Mo, W) took place under air atmosphere. The reactivity of fullerene$[C_{70}]$ and several metal hexacarbonyl complexes $M(CO)_6$(M=Cr, Mo, W) under same ultrasonic condition increased in the order of $Mo(CO)_6$ > $W(CO)_6$ > $Cr(CO)_6$. The MALDI-TOF-MS, UV-visible spectra, and HPLC analysis confirmed that the products of sonochemical reaction were $[C_{70}O_n](n=1{\sim}2)$.
Fullerene oxides were synthesized by fullerene ($C_{70}$) and several amine N-oxides such as 3-picoline N-oxide, pyridine N-oxide hydrate, quinoline N-oxide, and isoquinoline N-oxide under ultrasonic condition at $25{\sim}43^{\circ}C$. The reactivity of fullerene ($C_{70}$) with various amine N-oxides undo, ultrasonic irradiation showed the same in all of the proceeding experiments; 3-picoline N-oxide : pyridine N-oxide hydrate : quinoline N-oxide : isoquinoline N-oxide. The MALDI-TOF MS, UV-vis spectrophotometer and HPLC analysis confirmed that the products of fullerene oxidation are [$C_{70}(O)n$] (n=1).
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[게시일 2004년 10월 1일]
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