• 한국염색가공학회지
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• 제18권5호
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• pp.8-14
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• 2006

An earthworm protease, Lumbricus rubellus, was used to improve the dyeing properties of protein fibers such as wool and silk. The optimal condition for the activity of the earthworm pretense was about $40^{\circ}C$ at pH 7. The wool and silk were treated with the protease extracted from an earthworm and the K/S values of the dyed wool and silk were measured using a spectrophotometer in order to compare the dye uptake. The pretense treatment enhanced the dyeing properties of protein fibers without severe changes in mechanical properties. The surface appearances of pretense-treated fibers were observed by microscopy analysis.

• 약학회지
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• 제39권6호
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• pp.666-670
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• 1995

The plasmin activity of euglobulin fraction treated with earthworm extract(EWE) increased concentration dependently when EWE(0.5, 1.0 and 2.0 mg each) were added to normal plasma. It was shown that lumbrokinase in EWE may be moved to euglobulin fraction and activated plasminogen. Also anticoagulation and fibbrinolysis were studied when EWE(7.5, 30 and 120 mg/kg) were added to rat model. Prothrombin time (PT) were 19.7${\pm}$ 3.8, 22.5${\pm}$ 2.5 and 24.5${\pm}$ 5.0sec. activated partial thromboplastin time (APTT) were 25.7${\pm}$ 5.9, 28.7${\pm}$ 5.2 and 36.5${\pm}$ 19.1 sec. After 15 days, the production of D-dimer were 242.3${\pm}$ 47.4, 250.0${\pm}$ 11.9 and 205.8${\pm}$ 12.2mg/ml plasma, respectively. These data showed that EWE acted on the coagulation factor of intrinsic and extrinsic system.

• 한국동물학회:뉴스레터
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• 제12권2호
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• pp.113.1-113
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• 1995

• 한국동물학회:학술대회논문집
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• 한국동물학회 1995년도 한국생물과학협회 학술발표대회
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• pp.249.1-249
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• 1995

• Archives of Pharmacal Research
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• 제20권1호
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• pp.17-23
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• 1997

A saline suspension of Lumbricus rubellus earthworm powder (EWP) was administered to rats (1 g/kg/day) orally for 15 days to evaluate an oral effectiveness for thrombotic disorders. Blood was drawn at 2-day interval after the administration. Several parameters for antithrombotic, anticoagulant and fibrinolytic activities were measured, including platelet aggregation, clotting time, plasmin activity and the levels of FDP (fibrin/fibrinogen degradation products), D-dimer, and t-PA antigen. It did not affect platelet aggregation induced by ADP and collagen but anticoagulant activity (aPTT and TT) was gradually increased to two-folds for the first 5 days of administration and back to normal. Fibrinolytic activity of euglobulin fraction was highest on the 11 th day after the administration. The level of FDP was elevated to be comparable to the positve control$ (5-10 {\mu}g/ml)$ after 9-day treatment. Oral administration of the EWP could also reduce the formation of venous thrombus induced with viper venom. Complete blood count (CBC) profiles were within normal ranges except for a slight increase in white blood cells after the oral administration for 15 days. These results suggested that the EWP may be valuable for the prevention and/or treatment of thrombotic diseases.

• BMB Reports
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• 제37권2호
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• pp.199-205
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• 2004

The six lumbrokinase fractions (F1 to F6) with fibrinolytic activities were purified from earthworm Lumbricus rubellus lysates using the procedures of autolysis, ammonium sulfate fractionation, and column chromatography. The proteolytic activities on the casein substrate of the six iso-enzymes ranged from 11.3 to 167.5 unit/mg with the rank activity orders of F2 > F1 > F5 > F6 > F3 > F4. The fibrinolytic activities of the six fractions on the fibrin plates ranged from 20.8 to 207.2 unit/mg with rank orders of F6 > F2 > F5 > F3 > F1 > F4. The molecular weights of each iso-enzyme, as estimated by SDS-PAGE, were 24.6 (F1), 26.8 (F2), 28.2 (F3), 25.4 (F4), 33.1 (F5), and 33.0 kDa (F6), respectively. The plasminogen was activated into plasmin by the enzymes. The optimal temperature of the six iso-enzymes was $50^{\circ}C$, and the optimal pH ranged from pH 4-12. The four iso-enzymes (F1-F4) were completely inhibited by PMSF. The two enzymes (F5 and F6) were completely inhibited by aprotinin, TLCK, TPCK, SBTI, LBTI, and leupeptin. The N-terminal amino acid (aa) sequences of the first 20 to 22 residues of each fraction had high homology. All six isoenzymes had identical aa residues 2-3 and 13-15. The N-terminal 21-22 aa sequences of the F2, F3, and F4 isoenzymes were almost the same. The N-terminal aa sequences of F5 and F6 were identical.

• 한국환경농학회지
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• 제14권1호
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• pp.82-87
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• 1995

육상생태계에서 농약 및 일반화학물질의 환경생태독성을 평가할 때, 중요 항목으로 지렁이(earthworm)에 대한 독성시험 자료가 필요하다. 그런데 국내에서 지렁이 독성시험을 할 때, 가장 문제가 되는 점은, 독성시험을 목적으로 사육하는 지렁이가 없어, 결과의 신뢰성에 다소 문제가 있다. 따라서 본 연구에서는, 독성시험에 사용하는 종인 Lumbricus rubellus, Eisenia foetida를 실험실에서 사육할 수 있도록, 사육배지의 조성을 달리하여 성장인자의 차이를 조사하였다. 사육배지는 OECD Guideline에서 제시한 인공토양을 기본으로 하여(인공토양 Ⅰ), 조성을 달리한 인공토양 Ⅱ와 Ⅲ을 사용하였고, 먹이는 같게 공급하였다. 결과는 다음과 같다. 1) 지렁이 생체량은 L. rubellus의 경우, 인공토양Ⅰ에서 가장 양호하였고, E. foetida는 인공토양 Ⅰ과 Ⅱ에서 양호하였으므로, 이 두종을 함께 사육하는 경우는 인공토양 Ⅰ의 조성을 가진 배지에서 사육하는 것이 생체량의 증가면에서는 유리할 것이다. 2) 누적난포(cocoon) 생산량은 두종 모두 인공토양 Ⅰ에서 가장 많았고, L. rubellus는 E. foetida에 비하여 약 3배 많이 생산하였으므로, 본 실험에서의 사육조건은 L. rubellus에게 더 적합한 것으로 판단된다. 3) 누적치사율은 모든 처리 토양에서 두종 모두 10% 이하로 낮았다. 4) 난포당 부화된 지렁이 수는 $1.5 {\sim} 2.3$ 마리로 종간 및 토양처리에 따른 차이에 크지 않았다. 따라서 위의 두종을 실험실에서 사육하는데는 L. rubellus의 경우 인공토양 Ⅰ의 배지로 해서, 현재의 먹이를 공급해 주면, 비교적 잘 사육할 수 있으나, E. foetida의 경우는 사육배지뿐만 아니라, 먹이에 대한 문제도 검토되어야 할 것이다.

• 생명과학회지
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• 제16권6호
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• pp.919-924
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• 2006

다양한 독성물질 및 이들의 대사산물의 효율적인 생물독성 평가시스템이 지속적으로 개발되고 있다. 본 연구에서는 대분비계 교란물질인 endosulfan, bisphenol A, vinclozolin 및 3,5-dichloroaniline을 대상으로 인간 간암세포주, 지렁이, 효모를 이용한 세포독성 및 성장억제 효과를 평가하였다. 인간 간암세포주 독성평가에서는 endosulfan, 3,5-dichloroaniline, bisphenol A의 순으로 독성이 나타났으며, 지렁이 독성평가에서는 endosulfan, bisphenol A, 3,5-dichloroaniline의 순으로 독성이 나타났다. 효모를 이용한 독성평가에서는 3,5-dichloroaniline, endosulfan, bisphenol A의 순으로 독성이 나타나 다른 시스템과는 부분적인 차이가 나타났으며, vinclozolin의 경우 3가지 독성평가 시스템에서 모두 독성이 나타나지 않았다. 이러한 결과는, 동일한 물질을 서로 다른 생물 독성평가 시스템을 사용하여 평가하는 경우, 부분적인 오류가 나타날 수 있음을 암시하고 있으며, 독성 유무 판단은 가능하더라도, 독성 정량평가 및 독성 정도를 비교하는 것은 어렵다는 것을 제시하고 있다. 또한 본 결과는, 다양한 물질 및 이들의 대사산물의 일차적 독성평가에는 지렁이 및 효모시스템이 빠르고 경제적임을 암시하고 있으며, 독성이 인정될 경우 인간세포주 및 동물시험에 의한 검증이 효율적이라고 판단된다.

• 생명과학회지
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• 제16권1호
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• pp.108-113
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• 2006

독성물질의 무독화 연구의 화학적 분석방법의 문제점을 보완하고, 난분해성 독성물질의 분해 미생물을 효율적으로 탐색하기 위해, 지렁이와 microplate를 이용한 빠르고 간편한 독성평가 시스템을 구축하였다. 본 방법은 지렁이의 사육이나 특수시설이 필요하지 않으며, 치사 및 무게감소가 현저하게 나타나지 않는 저농도, 단기간 처리시에도 신속하게 독성의 정량평가가 가능하다 실제 endosulfan 및 다양한 endosulfan 유도체, 구조적 유사체 등을 대상으로 독성 평가한 결과, endosulfan, endosulfan sulfate, aldrin 및 dieldrin 에서만 독성이 나타나 기존의 연구결과와 잘 일치하였다. 이를 이용하여 endosulfan분해 및 무독화 균주 선별을 시도한 결과, 기존 endosulfan분해 및 무독화 균주로 선별된 KE-1, KE-8, KS-2P균주 처리의 경우에는 지렁이의 독성이 거의 나타나지 않았으나, E. coli, B. subtilis, 및 YSU 균주들을 처리한 경우에는, 지렁이 사멸과 함께 심각한 독성이 나타났다. 따라서, 본 시스템은 독성물질의 독성평가뿐 아니라, 독성물질의 분해 및 무독화 미생물 선별에 매우 유용함을 확인하였다.

• BMB Reports
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• 제32권6호
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• pp.567-572
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• 1999

We have previously shown that a DNA fragment is responsible for the anticoagulatory effect of an earthworm, Lumbricus rubellus. The anticoagluant increased the activated partial thromboplastin time (APTT) and also inhibited the thrombin activity observed with either N-${\alpha}$-p-tosyl-L-arginine methyl ester (TAME) or H-D-phenyl-alanyl-L-pipecoil-L-arginine-p-nitroanilide (S-2238). Since trypsin digestion of the anticoagulant further increased the APTT, the possible presence of a regulatory protein for the anticoagulatory DNA was investigated by digesting the anticoagulant with trypsin and isolating the DNA fragment with C4-reversed phase HPLC. The DNA fragment lacking a regulatory protein was eluted in the flow-through fraction, and analyzed with thrombin and activated factor X. Activated factor X activity was more strongly inhibited than thrombin activity. For DNA digestion, we treated the anticoagulant with DNase and purified the DNA-binding protein with a FPLC Resource-S cation exchange column. The regulatory protein, with an $M_r$ of 55.0 kDa, reduced the anticoagulatory effect of the DNA fragment.