Objectives: In this study, it was carried out to evaluate the acute oral toxicity of Root of Polygala teunifolia Willd. in Sprague-Dawley (SD) rats. Methods: Male and female rats were administered orally with Root of Polygala teunifolia Willd. water extract of 1,000 mg/kg (low dosage group), 2,000 mg/kg (middle dosage group) and 4,000 mg/kg (high dosage group). We daily observed number of deaths, clinical signs and gross findings for 7 days. After 7 days, we measured body and organs weight. Also we analyzed hematological changes. Results: No dead SD rats and no clinical signs were found during the experiment period. Also other specific changes were not found between control and treated groups in hematology and serum biochemistry. But we found out histopathological changes in liver fat tissues of female. In addition, there were no significant changes of gross body and individual organs weight. Conclusions: These results suggest that water soluble extract of Root of Polygala teunifolia Willd. has not acute oral toxicity and oral $LD_{50}$ value was over 4,000 mg/kg in SD rats.
Kim, Nam-Soo;Shen, Yan-Nan;Kim, Tae-Yoon;Byun, Sung-June;Jeon, Ik-Soo;Kim, Sang-Hoon
BMB Reports
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v.40
no.2
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pp.212-217
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2007
The chicken oviduct is a dynamic organ that produces secretory proteins such as ovalbumin during the laying period. In this study, we identified oviduct-specific proteins in hens during the egg-laying period by proteomic analysis. Proteins extracted from the magnum of hens of different ages (5, 35, and 65 weeks) were analyzed by two-dimensional gel electrophoresis to compare the intensity of proteins among samples. Approximately 300 spots were detected on each gel. Based on the comparison of image gels, we found that the intensity of eight spots in 35-week magnums was increased at least by 2-fold compared with the others. Five of the eight spots were identified as calumenin, acidic ribosomal phosphoproteins (ARP), prohibitin, heart fatty acid-binding protein, and anterior gradient-2 (AGR-2). In particular, ARP and AGR-2 were highly expressed in 35- week magnums compared with 5- and 65-week magnums. In addition, the level of these proteins was consistent with their RNA levels. Expression of AGR-2 mRNA was detected in the mature magnum, whereas no signal was observed in premature tissue. Among various tissues, expression of AGR-2 mRNA was highest in the magnum, high in the isthmus, and five fold lower in muscle. It was undetectable in the liver and in other tissues (heart and kidney). However, the mRNA levels of other proteins were ubiquitous among tissues. In transcriptional activity of AGR-2, a 3.0 kb fragment of promoter region containing potential estrogen receptor binding sites had enhanced its activity strongly. In conclusion, these results suggest that AGR-2 has functional regulatory roles in the chicken oviduct during the egglaying period.
We have cloned a novel mouse zinc finger protein gene Znf313 by rapid amplification of cDNA ends (RACE) according to the homologue of human ZNF313 gene. The cDNA is 2,163 base pairs (bp) in length and encodes a 229 amino acids (aa) protein with a $C_3HC_4$ ring finger domain and three $C_2H_2$ domains. 89% and 93% nucleotide (nt) and aa sequence identity is observed with its human homologue. Revealed by Northern blot and RT-PCR, full mRNA consists of 2.16 kb and widely expresses in tissues as a single transcript, most abundantly in heart, liver, kidney and testis. The expression of Znf313 in testis is detected in all development stages. Western blot analysis also reveals that Znf313 is expressed in the tissues. Immunohistochemical staining and subcellular localization demonstrate that Znf313 is expressed both in the cytoplasm and nucleus whereas predominantly localized in the nucleus. Present data suggests that Znf313 gene might play a fundamental role in gene transcription and regulation in organism and relates to spermatogenesis.
Park, Sang-Shin;Lee, Jong-Seok;Bae, Kang-Gyu;Yu, Kook-Hyun;Han, Hey-Chul;Min, Tae-Jin
The Korean Journal of Mycology
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v.29
no.1
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pp.67-71
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2001
A steroid compound, F-l with antioxidative activity from the fruit bodies of Fomitella fraxinea was isolated by ethyl acetate extraction, silica gel column chromatography, and preparative silica thin layer chromatography. The structure of the compound was determined to be crgosta-7,22-diene-3-one-$16{\beta}-ol$ by IR, NMR, and GC-Mass. The compound exhibited inhibition on lipid peroxidation of rat liver microsomes, with $IC_{50}$ value of $3.8{\mu}g/ml$.
Chronic alcohol consumption contributes to numerous diseases, including cancers, cardiovascular diseases, and liver cirrhosis. Epidemiological studies have shown that excessive alcohol consumption is a risk factor for dementia. Along this line, Alzheimer's disease (AD) is the most common form of dementia and is caused by the accumulation of amyloid-$\beta$ ($A{\beta}$ plaques in neurons. In this study, we hypothesized that chronic ethanol consumption is associated with pathological processing of APP in AD. To investigate the relationship between chronic alcohol consumption and $A{\beta}$ production, brain samples from rats fed an alcohol liquid diet for 5 weeks were analyzed. We show that the expression levels of APP, BACE1, and immature nicastrin were increased in the cerebellum, hippocampus, and striatum of the alcohol-fed group compared to the control group. Total nicastrin and PS1 levels were induced in the hippocampus of alcohol-fed rats. These data suggest that the altered expression of APP and $A{\beta}$-producing enzymes possibly contributes to the chronic alcohol consumption-mediated pathogenesis of AD.
Kim, Hye-Kyeong;Choi, Sung-Won;Lee, Hae-Jeung;Lee, Joo-Hee;Choi, Hay-Mie
BMB Reports
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v.36
no.3
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pp.258-264
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2003
This study examined the effect of dietary polyunsaturated fatty acids (PUFA) that were supplemented with vitamin E on lipid peroxidation, glutathione-dependent detoxifying enzyme system activity, and lipogenic fatty acid synthase (FAS) expression in rat liver. Male Sprague-Dawley rats were fed semipurified diets containing either 1% (w/w) corn oil or 10% each of beef tallow, corn oil, perilla oil, and fish oil for 4 wk. Alpha-tocopherol was supplemented in perilla oil (0.015%) and fish oil (0.019%). Hepatic thiobarbituric acid reactive substances, an estimate of lipid peroxidation, were not significantly different among the dietary groups. The glutathione peroxidase, glutathione reductase, and glutathione S-transferase activities were all elevated by the polyunsaturated fats, especially fish oil. The activity of FAS was reduced in the polyunsaturated fat-fed groups in the order of fish oil, perilla oil, and corn oil. The mRNA contents decreased in rats that were fed the 10% fat diets, particularly polyunsaturated fats, compared with the rats that were fed the 1% corn oil diet. Similarly, the inhibitory effect was the greatest in fish oil. These results suggest that lipid peroxidation can be minimized by vitamin E; PUFA in itself has a suppressive effect on lipogenic enzyme.
The purpose of this study was to investigate the effects of altering relative intakes of fat and carbohydrates on serum lipid profiles, hepatic acyl-CoA synthetase (ACS), carnitine palmitoyltransferase-I (CPT-I), and the acetyl-CoA carboxlyase (ACC) mRNA level in Sprague-Dawley rats. For four weeks the rats were fed either an AIN-76 diet or one of its modified diets that were supplemented with 20% beef tallow (high-fat diet, HF) and 66.3% sucrose (highsucrose diet, HS). The HS group had significantly higher serum triglyceride and total cholesterol concentrations when compared with the other groups. Serum LDL-cholesterol concentrations in the HS and HF groups were significantly higher when compared to the normal diet (ND) group. Serum HDL-cholesterol levels of the ND and HS groups were significantly higher than those of the HF group. The hepatic total lipid level of the HF group was significantly higher than those of other groups; triglyceride levels of the HS and HF groups were significantly higher than those of the ND group. Hepatic ACS mRNA levels of the HF group were significantly higher than those of the ND group. Hepatic CPT-I mRNA levels were higher in the HF group than other groups. Also, ACC mRNA levels in the liver increased in the HF group. In conclusion, changes in the composition of dietary fat and carbohydrates could affect the hepatic ACS, CPT-I, and ACC mRNA levels. These results facilitate our understanding of the coordinated regulation of the ACS, CPT-I, and ACC mRNA levels and will serve to enhance our understanding of the molecular mechanisms that underlie the regulation of fatty acid metabolism.
BACKGROUND/OBJECTIVES: Recent living condition improvements, changes in dietary habits, and reductions in physical activity are contributing to an increase in metabolic syndrome symptoms including diabetes and obesity. Through such societal developments, humankind is continuously exposed to metabolic diseases such as diabetes, and the number of the victims is increasing. This study investigated Cordyceps militaris water extract (CMW)-induced glucose uptake in HepG2 cells and the effect of CMW treatment on glucose metabolism. MATERIALS/METHODS: Colorimetric assay kits were used to determine the glucokinase (GK) and pyruvate dehydrogenase (PDH) activities, glucose uptake, and glycogen content. Either RT-PCR or western blot analysis was performed for quantitation of glucose transporter 2 (GLUT2), hepatocyte nuclear factor 1 alpha ($HNF-1{\alpha}$), phosphatidylinositol 3-kinase (PI3k), protein kinase B (Akt), phosphorylated AMP-activated protein kinase (pAMPK), phosphoenolpyruvate carboxykinase, GK, PDH, and glycogen synthase kinase 3 beta ($GSK-3{\beta}$) expression levels. The ${\alpha}-glucosidase$ inhibitory activities of acarbose and CMW were evaluated by absorbance measurement. RESULTS: CMW induced glucose uptake in HepG2 cells by increasing GLUT2 through $HNF-1{\alpha}$ expression stimulation. Glucose in the cells increased the CMW-induced phosphorylation of AMPK. In turn, glycolysis was stimulated, and glyconeogenesis was inhibited. Furthermore, by studying the mechanism of action of PI3k, Akt, and $GSK-3{\beta}$, and measuring glycogen content, the study confirmed that the glucose was stored in the liver as glycogen. Finally, CMW resulted in a higher level of ${\alpha}-glucosidase$ inhibitory activity than that from acarbose. CONCLUSION: CMW induced the uptake of glucose into HepG2 cells, as well, it induced metabolism of the absorbed glucose. It is concluded that CMW is a candidate or potential use in diabetes prevention and treatment.
Kim, Se-Kwon;Kim, Yong-Tae;Byun, Hee-Guk;Park, Pyo-Jam;Ito, Hisashi
BMB Reports
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v.34
no.3
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pp.219-224
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2001
To identify the antioxidative peptides in the gelatin hydrolysate of bovine skin, the gelatin was hydrolyzed with serial digestions in the order of Alcalase, pronase E, and collagenase using a three-step recycling membrane reactor. The second enzymatic hydrolysate (hydrolyzed with pronase E) was composed of peptides ranging from 1.5 to 4.5 kDa, and showed the highest antioxidative activity, as determined by the thiobarbituric acid method. Three different peptides were purified from the second hydrolysate using consecutive chromatographic methods. This included gel filtration on a Sephadex G-25 column, ion-exchange chromatography on a SP-Sephadex C-25 column, and high-performance liquid chromatography on an octadecylsilane chloride column. The isolated peptides were composed of 9 or 10 amino acid residues. They are: Gly-Glu-Hyp-Gly-Pro-Hyp-Gly-Ala-Hyp (PI), Gly-ProHyp-Gly-Pro-Hyp-Gly-Pro-Hyp-Gly (PII), and Gly-ProHyp-Gly-Pro-Hyp-Gly-Pro-Hyp (PIII), as characterized by Edman degradation and fast-atom bombardment mass spectrometry. The antioxidative activities of the purified peptides were measured using the thiobarbituric acid method, and the cell viability with a methylthiazol tetrazolium assay The results showed that PII had potent antioxidative activity on peroxidation of linoleic acid. Moreover, the cell viability of cultured liver cells was significantly enhanced by the addition of the peptide. These results suggest that the purified peptide, PII, from the gelatin hydrolysate of bovine skin is a natural antioxidant, which has potent antioxidative activity.
Using the Phred/Phrap/Polyphred/Consed pipeline established in the National Livestock Research Institute of Korea, we predicted candidate coding single nucleotide polymorphisms (cSNPs) from 7,600 expressed sequence tags (ESTs) derived from three cDNA libraries (liver, M. longissimus dorsi, and intermuscular fat) of Hanwoo (Korean native cattle) steers. From the 7,600 ESTs, 829 contigs comprising more than two EST reads were assembled using the Phrap assembler. Based on the contig analysis, 201 candidate cSNPs were identified in 129 contigs, in which transitions (69%) outnumbered transversions (31%). To verify whether the predicted cSNPs are real, 17 SNPs involved in lipid and energy metabolism were selected from the ESTs. Twelve of these were confirmed to be real while five were identified as artifacts, possibly due to expressed sequence tag sequence error. Further analysis of the 12 verified cSNPs was performed using the program BLASTX. Five were identified as nonsynonymous cSNPs, five were synonymous cSNPs, and two SNPs were located in 3'-UTRs. Our data indicated that a relatively high SNP prediction rate (71%) from a large EST database could produce abundant cSNPs rapidly, which can be used as valuable genetic markers in cattle.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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