Double stranded targets on the cDNA microarray contain representatives of both the coding and noncoding strands, which will introduce hybridization competition with probes. Here, the effect of double and single strands of targets on the signal intensity and the ratios of Cy5/Cy3 within the same slide were compared. The results show that single stranded targets can increase the hybridization efficiency without changing the Cy5/Cy3 ratio. Based on these results, a new strategy was established by generating cDNA targets with asymmetric PCR, instead of conventional PCR, to increase the sensitivity of the cDNA microarray. Furthermore, the feasibility of this approach was validated. The results indicate that the cDNA microarray system based on asymmetric PCR is more sensitive, with no decrease in the reliability and reproducibility as compared with that based on conventional symmetric PCR.
Xiong, Jinbo;Yao, Zhiqiang;Ma, Jianfeng;Liu, Ximeng;Li, Qi;Ma, Jun
KSII Transactions on Internet and Information Systems (TIIS)
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v.8
no.1
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pp.282-304
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2014
Each cloud service has numerous owners and tenants, so it is necessary to construct a privacy preserving identity management and access control mechanism for cloud computing. On one hand, cloud service providers (CSP) depend on tenant's identity information to enforce appropriate access control so that cloud resources are only accessed by the authorized tenants who are willing to pay. On the other hand, tenants wish to protect their personalized service access patterns, identity privacy information and accessing newfangled cloud services by on-demand ways within the scope of their permissions. There are many identity authentication and access control schemes to address these challenges to some degree, however, there are still some limitations. In this paper, we propose a new comprehensive approach, called Privacy pReserving Identity and Access Management scheme, referred to as PRIAM, which is able to satisfy all the desirable security requirements in cloud computing. The main contributions of the proposed PRIAM scheme are threefold. First, it leverages blind signature and hash chain to protect tenant's identity privacy and implement secure mutual authentication. Second, it employs the service-level agreements to provide flexible and on-demand access control for both tenants and cloud services. Third, it makes use of the BAN logic to formally verify the correctness of the proposed protocols. As a result, our proposed PRIAM scheme is suitable to cloud computing thanks to its simplicity, correctness, low overhead, and efficiency.
Shouhua Liu;Jianfeng Li;Hamidreza Aghajanirefah;Mohammad Khishe;Abbas Khishe;Arsalan Mahmoodzadeh;Banar Fareed Ibrahim
Steel and Composite Structures
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v.47
no.2
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pp.147-165
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2023
The paper contrasts conventional seismic design with a design that incorporates buckling-restrained bracing in three-dimensional reinforced concrete buildings (BRBs). The suboptimal structures may be found using the multi-objective chimp optimization algorithm (MEN-ChOA). Given the constraints and dimensions, ChOA suffers from a slow convergence rate and tends to become stuck in local minima. Therefore, the ChOA is improved by niching and evolutionary operators to overcome the aforementioned problems. In addition, a new technique is presented to compute seismic and dead loads that include all of a structure's parts in an algorithm for three-dimensional frame design rather than only using structural elements. The performance of the constructed multi-objective model is evaluated using 12 standard multi-objective benchmarks proposed in IEEE congress on evolutionary computation. Second, MEN-ChOA is employed in constructing several reinforced concrete structures by the Mexico City building code. The variety of Pareto optimum fronts of these criteria enables a thorough performance examination of the MEN-ChOA. The results also reveal that BRB frames with comparable structural performance to conventional moment-resistant reinforced concrete framed buildings are more cost-effective when reinforced concrete building height rises. Structural performance and building cost may improve by using a nature-inspired strategy based on MEN-ChOA in structural design work.
Junhua Xiao;Jiapei Ma;Jianfeng Xue;Zhiyong Liu;Yingqi Bai
Geomechanics and Engineering
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v.34
no.5
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pp.481-489
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2023
Drained cyclic triaxial tests were conducted on a saturated sand to examine its deformation characteristics under either axial or lateral cyclic loading condition. To apply lateral cyclic loading, the cell pressure was cycled while maintaining a constant vertical stress. The strain accumulations and flow direction in the soil were presented and discussed considering various initial stress ratios (η0), cyclic stress amplitudes and cyclic stress paths. The results indicate that axial strain accumulation shows an exponential increase with the maximum stress ratio (ηmax). The initial deviatoric stress has comparable effects with lateral cyclic stress amplitude on the accumulated axial strain. In contrast, the accumulated volumetric strain is directly proportional to the lateral cyclic stress amplitude but not much affected by η0 values. Due to the anisotropy of the soil, the accumulated axial and lateral bulging strains are greater in lateral cyclic loading when compared to axial cyclic loading even though ηmax is the same. It is also found that ηmax affects soil's lateral deformation and increasing the ratio could change the lateral deformation from contraction to bulging. The flow direction depends on ηmax in the sand under lateral cyclic loading, regardless of η0 values and the cyclic stress amplitudes, and a large ηmax could lead to great deviatoric strain but a little volumetric strain accumulation.
Interferon regulatory factor 6 (IRF6) gene is a member of the IRF-family, and plays functionally diverse roles in the regulation of the immune system. In this report, the 13,720 bp porcine IRF6 genomic DNA structure was firstly identified with a putative IRF6 protein of 467 amino acids. Alignment and phylogenetic analysis of the porcine IRF6 amino acid sequences with their homologies to other species showed high identity (over 96%). Tissues expression of IRF6 mRNA was observed by RT-PCR, the results revealed IRF6 expressed widely in eight tissues. One SNP (HQ026023:1383 G>C) in exon7 and two SNPs (HQ026023:130 G>A; 232 C>T) in the 5′ promoter region of porcine IRF6 gene were demonstrated by DNA sequencing analysis. A further analysis of SNP genotypes associated with immune traits including IFN-${\gamma}$ and IL10 concentrations in serum was carried out in three pig populations including Large White, Landraces and Songliao Black pig (a Chinese indigenous breed). The results showed that the SNP (HQ026023:1383 G>C) was significantly associated with the level of IFN-${\gamma}$ (d 20) in serum (p = 0.038) and the ratio of IFN-${\gamma}$ to IL10 (d 20) in serum (p = 0.041); The other two SNPs (HQ026023:130 G>A; 232 C>T) were highly significantly associated with IL10 level in serum both at the day 20 (p = 0.005; p = 0.001) and the day 35 (p = 0.004; p = 0.006). Identification of the porcine IRF6 gene will help our further understanding of the molecular basis of the IFN regulation pathway in the porcine immune response. All these results should indicate that the IRF6 gene can be regarded as a molecular marker associated with the IL10 level in serum and used for genetic selection in the pig breeding.
Cluster of differentiation 4 (CD4) is mainly expressed on $CD4^+$ T cells, which plays an important role in immune response. The aim of this study was to detect the association between polymorphisms of the CD4 gene and T lymphocyte subpopulations in pigs, and to investigate the effects of genetic variation on the CD4 gene expression level in immune tissues. Five missense mutations in the CD4 gene were identified using DNA pooling sequencing assays, and two main haplotypes (CCTCC and AGCTG) in strong linkage disequilibrium (with frequencies of 50.26% and 46.34%, respectively) were detected in the population of Large White pigs. Our results indicated that the five SNPs and the two haplotypes were significantly associated with the proportions of $CD4^-CD8^-$, $CD4^+CD8^+$, $CD4^+CD8^-$, $CD4^+$ and $CD4^+/CD8^+$ in peripheral blood (p<0.05). Gene expression analysis showed the mRNA level of the CD4 gene in thymus was significantly higher than that in lymph node and spleen (p<0.05). However, no significant difference was observed between animals with CCTCC/CCTCC genotype and animals with AGCTG/AGCTG genotype in the three immune tissues (p>0.05). These results indicate that the CD4 gene may influence T lymphocyte subpopulations and can be considered as a candidate gene affecting immunity in pigs.
Objective: The aim of this study was to clone alternative splicing isoforms of pig myoneurin (MYNN), predict the structure and function of coding protein, and study temporal and spatial expression characteristics of each transcript. Methods: Alternative splice isoforms of MYNN were identified using RNA sequencing (RNA-seq) and cloning techniques. Quantitative real-time polymerase chain reaction (qPCR) was employed to detect expression patterns in 11 tissues of Large White (LW) and Mashen (MS) pigs, and to study developmental expression patterns in cerebellum (CE), stomach (ST), and longissimus dorsi (LD). Results: The results showed that MYNN had two alternatively spliced isoforms, MYNN-1 (GenBank accession number: KY470829) and MYNN-2 (GenBank accession number: KY670835). MYNN-1 coding sequence (CDS) is composed of 1,830 bp encoding 609 AA, whereas MYNN-2 CDS is composed of 1,746 bp encoding 581 AA. MYNN-2 was 84 bp less than MYNN-1 and lacked the sixth exon. MYNN-2 was found to have one $C_2H_2$ type zinc finger protein domain less than MYNN-1. Two variants were ubiquitously expressed in all pig tissues, and there were significant differences in expression of different tissues (p<0.05; p<0.01). The expression of MYNN-1 was significantly higher than that of MYNN-2 in almost tissues (p<0.05; p<0.01), which testified that MYNN-1 is the main variant. The expression of two isoforms decreased gradually with increase of age in ST and CE of MS pig, whereas increased gradually in LW pig. In LD, the expression of two isoforms increased first and then decreased with increase of age in MS pig, and decreased gradually in LW pig. Conclusion: Two transcripts of pig MYNN were successfully cloned and MYNN-1 was main variant. MYNN was highly expressed in ST, CE, and LD, and their expression was regular. We speculated that MYNN plays important roles in digestion/absorption and skeletal muscle growth, whereas the specific mechanisms require further elucidation.
Lu Xu;Zhongliang Wang;Shihao Liu;Zhiheng Wei;Jianfeng Yu;Jun Li;Jie Li;Wen Yao;Zhiliang Gu
Animal Bioscience
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v.37
no.3
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pp.437-450
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2024
Objective: Vanin-1 (VNN1) is a pantetheinase that catalyses the hydrolysis of pantetheine to produce pantothenic acid and cysteamine. Our previous studies have shown that the VNN1 is specifically expressed in chicken liver which negatively regulated by microRNA-122. However, the functions of the VNN1 in lipid metabolism in chicken liver haven't been elucidated. Methods: First, we detected the VNN1 mRNA expression in 4-week chickens which were fasted 24 hours. Next, knocked out VNN1 via CRISPR/Cas9 system in the chicken Leghorn Male Hepatoma cell line. Detected the lipid deposition via oil red staining and analysis the content of triglycerides (TG), low-density lipoprotein-C (LDL-C), and high-density lipoprotein-C (HDL-C) after VNN1 knockout in Leghorn Male Hepatoma cell line. Then we captured various differentially expressed genes (DEGs) between VNN1-modified LMH cells and original LMH cells by RNA-seq. Results: Firstly, fasting-induced expression of VNN1. Meanwhile, we successfully used the CRISPR/Cas9 system to achieve targeted mutations of the VNN1 in the chicken LMH cell line. Moreover, the expression level of VNN1 mRNA in LMH-KO-VNN1 cells decreased compared with that in the wild-type LMH cells (p<0.0001). Compared with control, lipid deposition was decreased after knockout VNN1 via oil red staining, meanwhile, the contents of TG and LDL-C were significantly reduced, and the content of HDL-C was increased in LMH-KO-VNN1 cells. Transcriptome sequencing showed that there were 1,335 DEGs between LMH-KO-VNN1 cells and original LMH cells. Of these DEGs, 431 were upregulated, and 904 were downregulated. Gene ontology analyses of all DEGs showed that the lipid metabolism-related pathways, such as fatty acid biosynthesis and long-chain fatty acid biosynthesis, were enriched. KEGG pathway analyses showed that "lipid metabolism pathway", "energy metabolism", and "carbohydrate metabolism" were enriched. A total of 76 DEGs were involved in these pathways, of which 29 genes were upregulated (such as cytochrome P450 family 7 subfamily A member 1, ELOVL fatty acid elongase 2, and apolipoprotein A4) and 47 genes were downregulated (such as phosphoenolpyruvate carboxykinase 1) by VNN1 knockout in the LMH cells. Conclusion: These results suggest that VNN1 plays an important role in coordinating lipid metabolism in the chicken liver.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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