• KSBB Journal
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• 제27권1호
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• pp.61-66
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• 2012

In the screening process of organic solvent tolerant bacteria showing good growth in media containing several kinds of organic solvents, one strain was isolated and identified as Bacillus sp. BCNU 5006. The strain was able to tolerate many organic solvents including benzene, toluene, xylene, octane, dodecane, butanol and ethylbenzene. Likewise, it could also utilize these solvents as the sole source of carbon with significant enzyme production. The lipolytic enzyme stability of Bacillus sp. BCNU 5006 was studied in the presence of several kinds of solvents at a 25% (v/v) concentration. The highest enzyme stability was observed in the presence of octane (107%), followed by ethylbenzene (88%), decane (86%), and chloroform (85%). Especially, BCNU 5006 lipase was determined to be more stable than immobilized enzyme (Novozyme 435) in the presence of octane, chloroform and xylene. This organic solvent tolerant Bacillus sp. BCNU 5006 could be expected as a potential bioremediation agent and biocatalyst for biodegradation and provide on organic-solvent-based enzymatic synthetic method in industrial chemical processes.

• 한국응용과학기술학회지
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• 제8권1호
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• pp.55-58
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• 1991

Biosurfactant have a low toxicity, good biodegradable, various structure. It can be used for a broad range of purposes in a large variety of different applications. Sorbitol mono alkyl ester synthesized by the Porcine Pancreatic lipase catalyzes transesterification reaction between a sugar alcohol and plant oils. We are examined the surface tension, emusion stability and critical micelle concentration were evaluated. Consequently It has a good properties of biosurfactant.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제16권1호
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• pp.145-148
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• 2006

A new functional lipolytic enzyme (AT4) has recently been found from Agrobacterium tumefaciens C58 Cereon using a genome-wide approach. The enzyme has some sequence similarity to E. coli acetyl hydrolase, Emericella nidulans lipase, Moraxella sp. lipase, Acinetobacter lwoffii esterase, and Streptomyces hygroscopicus acetyl hydrolase. However, the sequence similarities are very low (less than $25\%$), suggesting that it is a new lipase/esterase enzyme. ill the present study, intact cell of the A. tumefaciens strain was shown to have lipolytic activity on a tributyrin-LB plate. The AT4 gene was then expressed at a high level in E. coli BL21 (DE3) cells and the enzyme was purified simply by Ni-NTA column chromatography. The purified enzyme showed hydrolytic activity toward p-nitrophenyl caproate, but not toward olive oil, suggesting that the AT4 enzyme was a typical esterase rather than lipase. AT4 esterase had a maximum hydrolytic activity at $45^{\circ}C$ and pH 8.0, when p-nitrophenyl caproate was used as a substrate. It was relatively stable up to $40^{\circ}C$ and at pH 5.0-9.0. Calcium ion and EDT A did not affect the activity and thermal stability of the enzyme. As for substrate specificity, AT4 enzyme could rapidly hydrolyze acetyl and butyl groups from p-nitrophenyl esters and 1-naphthyl esters. In addition, it also released acetyl residues from acetylated glucose and xylose substrates. Therefore, this new esterase enzyme might be used as a biocatalyst in acetylation and deacetylation reactions performed in the fine chemical industry.

• 한국균학회지
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• 제25권2호통권81호
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• pp.143-151
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• 1997

Aspergillus niger와 Penicillium notatum간의 lipase 우수 생성 종간 형질전환체를 획득하고, 유전분석과 정제를 통하여 다음과 같은 결과를 얻었다. P. notatum의 영양요구물을 확인하여 본 결과 Tyrosine 요구성임을 알 수 있었다. 핵전이를 위한 원형질체 형성 및 재생 조건에서는 Novozym 234의 농도 1%, 삼투안정제는 0.6M KCl, 효소의 처리시간은 180분 그리고 최적 pH는 5.8로 나타났다. 핵전이에 의한 형질전환의 빈도는 $1.3{\times}10^{-4}{\sim}3.8{\times}10^{-4}$으로 비교적 낮은 편이었다. 유전적 안정성, conidia의 크기, DNA 함량의 측정 그리고 핵염색의 결과 형질전환체의 핵형은 aneuploid로 추정되었다. 형질전환체의 lipase 활성은 모균주와 비교하여 $1.2{\sim}1.7$배 증가하였다.

• 한국식품영양과학회지
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• 제41권4호
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• pp.566-570
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• 2012

본 연구는 지충이 추출물의 lipase 저해활성을 알아보고, 식품산업에 적용가능성을 확인하기 위해 열, pH 및 감마선 조사에 대한 안정성을 검토하였다. 지충이 추출물을 1, 2.5 및 5 mg/mL의 농도에서 lipase 저해활성을 측정한 결과, 에탄올 추출물에서 각각 16.12, 19.32 및 37.37%의 저해활성을 보여 물 추출물보다 높은 저해활성을 보였다. 높은 저해활성을 보인 지충이 에탄올 추출물의 열 안정성을 검토한 결과, 모든 처리구에서 기존의 lipase 저해활성보다 유의적으로 증가하는 경향을 나타내었으며, 특히 $121^{\circ}C$, 15 min 처리구에서 대조구에 비해 약 13% 정도 저해활성이 가장 많이 증가하였다. pH 안정성을 검토한 결과, 중성영역(pH 4-8)에서는 안정하였으나, pH 2 및 10 조건하에서 대조구에 비해 다소 감소하는 경향을 보였다. 감마선 조사에 대한 안정성 검토 결과, 모든 처리구에서 유의적인 차이 없이 안정한 것을 확인하였다. 이상의 결과로 lipase 저해활성을 지니는 지충이 에탄올 추출물이 식품산업에 폭넓게 이용될 수 있을 것으로 사료된다.

• 한국식품과학회지
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• 제17권6호
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• pp.490-494
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• 1985

물에 녹지않는 기질을 사용할 수 있고, 다시 효소를 회수하여 다음에 사용하고자 할때 효소와 기질등 과의 분리등 여러 가지 장점이 있는 2상계(이상계(二相界))를 사용하여 Rhizopus arrhizus의 리파제에 의한 에스테르 교환반응을 위한 기본 실험으로써 물에 녹지 않는 각종 유기용매 중에서 이 반응을 위한 가장 좋은 유기용매를 고르고자 유기용매가 리파제의 안정도와 활성도에 미치는 영향을 보았다. 이실험에서 사용된 유기용매는 n-hexane, n-heptane, n-octane, isooctane, cyclohexane등 5개의 탄화수소와 doethylether, diisopropylether, di-n-butylether등 3개의 에테르이다. 실험 결과 diiso-propylether와 isooctane 이 다른 유기용매에 비해 월등히 2상계를 이용한 에스테르 교환 반응에 좋은 용매임을 알았다.

• Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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• 제6권2호
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• pp.150-155
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• 2001

It has been observed that water, which is absolutely essential for enzyme activity, can induce the agglomeration of enzyme particles in organic media. Although enzyme agglomeration is significant in that it usually reduces enzyme activity and stability, little attention has been paid to the quantitative analysis of enzyme agglomeration behavior in nonaqueous biocatalytic systems. In this study, the effect of water and silica gel on enzyme agglomeration were investigated using Candida rugosa lipase and cyclohexane as a model enzyme and an organic medium. The extent of enzyme agglomeration was quantified by sieve analysis of freeze-dried agglomerates. Increasing the water content of the medium increased the size of the enzyme agglomerates, and it was found that water produced during the esterification reaction could also promote the agglomeration of enzyme particles suspended in organic media. On the other hand, the size of the enzyme agglomerates was remarkably reduced in the presence of silica gel at the same water content. We also show that this increase in the size of enzyme agglomerates results in lower reaction rates in organic solvents.

• 한국식품과학회지
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• 제36권2호
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• pp.211-216
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• 2004

회분식 반응기(stirred-tank batch reactor)를 사용한 DAG, MAG 함유 기능성유지를 비용매계(solvent-free system) 조건에서 효소적 반응을 이용하여 합성하였다. 48시간 동안 합성된 지질을 HPLC를 사용한 TAG, 1,3-DAG, 1,2-DAG 및 MAG 함량 분석결과 각각 45.05, 16.27, 23.05 및 14.98%로 분석되었으며 체중개선 기능성 유지의 지방산 조성 분석결과 palmitic, palmitoleic, stearic, oleic, linoleic 및 linolenic acid가 13.21, 0.15, 2.02, 34.36, 49.12 및 1.14 mol%로 분석되었다. 합성된 지질의 ${\alpha},\;{\gamma}$ 및 ${\delta}-tocopherol$ 함량을 분석한 결과는 각각 0.014, 0.029 및 0.010%로 분석되었으며 총 tocopherol 함량은 0.053%로 나타났다. 또한 재구성된 지질을 사용하여 산가, 비누화가, 요오드가를 측정하였으며 융점 및 결정화점을 살펴보고 이를 통하여 옥수수유로 유래된 DAG, MAG를 함유한 체중개선 기능성 유지의 이화학적, 물리적 특징을 규명하였다. 체중개선 기능성 유지의 산화 안정성 실험을 시행한 결과 체중개선 기능성 유지가 원료유인 옥수수유보다 높은 과산화물가와 p-anisidine가를 보였으며 각기 달리 혼합한 rosemary추출물(100, 200 및 300ppm)이 체중개선 기능성 유지와 옥수수유의 산화를 감소 시켰다.

• International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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• 제27권2호
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• pp.329-332
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• 2013

In present preliminary report, we showed the possibility of silk sericin (SS) in enzyme immobilization. SS beads were prepared and enzymes were immobilized on it. The specific activity of immobilized a-chymotrypsin retained more than 87% compared to the free enzyme. The immobilized a-chymotrypsin has better stability against ethanol especially those immobilized on SS beads coagulated in methanol. Immobilized trypsin and lipase had also comparable apparent activity compared to free enzyme. Our result indicates that SS could be a good candidate for enzyme immobilization support due to its hydrophilicity.

• 한국식품영양과학회지
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• 제35권10호
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• pp.1399-1404
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• 2006

기능성식품 소재로 사용할 수 있는 재구성지질의 산화안정성을 검토하기 위하여 대두유, CLA와 caproic acid에 lipase를 가하여 반응시켜 합성한 재구성지질과 이의 유탁액에 각종 항산화제를 첨가하고 $60^{\circ}C,\;150^{\circ}C$의 열처리한 것과 광을 조사하면서 저장과정 중 POV, TBA값, AV를 측정한 결과는 다음과 같았다. 대두유와 재구성지질을 $60^{\circ}C$에서 열처리하였을 때 대두유가 재구성지질에 비하여 산화가 더 빠르게 진행되었으며 항산화제를 첨가한 재구성지질은 산화유도기간이 길어졌으나 10일이 지나면서 POV가 100 meq/kg에 도달해 식용이 불가능한 상태가 되었다. 재구성지질에 항산화제를 첨가하였을 때 산화억제 효과는 tea polyphenol extract>$\alpha-tocopehrol$>rosemary extract>ascorbyl palmitate의 순으로 tea polyphenol extract가 가장 우수하였으며 $150^{\circ}C$에서 열처리하였을 때에도 저장 3일에 대두유의 POV가 117 meq/kg, 재구성지질이 92 meq/kg로서 3일이 지나면서 식용이 불가하였으며 고온에서의 항산화제의 산화억제정도는 저온에서와 같은 경향이었다. 유지유탁액이 일반적인 유지 상태보다 산화속도가 빨랐으며 유탁액 상태에서도 항산화제의 산화억제효과는 가열처리 때와 유사하였다. 대두유와 재구성지질에 대하여 광을 조사하여 산화시킬 때 가열산화에서와 같이 재구성지질이 더욱 안정하였으며 조사기간이 길수록 신화정도는 차이가 심하였으며 유탁액 상태에서 더욱 불안전하였다.