Tracking the fate of individual cells and their progeny through lineage tracing has been widely used to investigate various biological processes including embryonic development, homeostatic tissue turnover, and stem cell function in regeneration and disease. Conventional lineage tracing involves the marking of cells either with dyes or nucleoside analogues or genetic marking with fluorescent and/or colorimetric protein reporters. Both are imaging-based approaches that have played a crucial role in the field of developmental biology as well as adult stem cell biology. However, imaging-based lineage tracing approaches are limited by their scalability and the lack of molecular information underlying fate transitions. Recently, computational biology approaches have been combined with diverse tracing methods to overcome these limitations and so provide high-order scalability and a wealth of molecular information. In this review, we will introduce such novel computational methods, starting from single-cell RNA sequencing-based lineage analysis to DNA barcoding or genetic scar analysis. These novel approaches are complementary to conventional imaging-based approaches and enable us to study the lineage relationships of numerous cell types during vertebrate, and in particular human, development and disease.
Kim, Jae-Cheol;Kim, In-Taek;Kwon, Tae-Kyoung;Choi, Yang-Hee
한국IT서비스학회:학술대회논문집
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2006.05a
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pp.233-240
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2006
This paper measures and compares the traffic of a series of Massively Multiplayer On-line Role Playing Games(MMORPG). The target games are 'Lineage' and 'Lineage II' developed by NCsoft, which are ones of the world's largest MMORPGs in terms of the number of concurrent users. We collected about 1 tera bytes of packets of 'Lineage II' for four days including a weekend. These packets are analyzed and compared with those of 'Lineage.' Packet size, packet inter-arrival time, and bandwidth usage are compared. The traffic of the two games shows much difference because original 'Lineage' is a kind of 2-D based MMORPG, while 'Lineage II' is 3-D based. By comparing the characteristics of the traffic of these games, we can anticipate future needs of network and game structure.
Objective: Nanog homeobox (NANOG) is a core transcription factor that contributes to pluripotency along with octamer binding transcription factor-4 (OCT4) and sex determining region-Y box-2 (SOX2). It is an epiblast lineage marker in mammalian pre-implantation embryos and exhibits a species-specific expression pattern. Therefore, it is important to understand the lineage of NANOG, the trophectoderm, and the primitive endoderm in the pig embryo. Methods: A loss- and gain-of-function analysis was done to determine the role of NANOG in lineage specification in parthenogenetic porcine blastocysts. We analyzed the relationship between NANOG and pluripotent core transcription factors and other lineage makers. Results: In NANOG-null late blastocysts, OCT4-, SOX2-, and SOX17-positive cells were decreased, whereas GATA binding protein 6 (GATA6)-positive cells were increased. Quantitative real-time polymerase chain reaction revealed that the expression of SOX2 was decreased in NANOG-null blastocysts, whereas that of primitive endoderm makers, except SOX17, was increased. In NANOG-overexpressing blastocysts, caudal type homeobox 2 (CDX2-), SOX17-, and GATA6-positive cells were decreased. The results indicated that the expression of primitive endoderm markers and trophectoderm-related genes was decreased. Conclusion: Taken together, the results demonstrate that NANOG is involved in the epiblast and primitive endoderm differentiation and is essential for maintaining pluripotency within the epiblast.
The lineage village is a very characteristic form of village in Korea. Although it was known as having established on the base of the Lineage Law, the complexities of political and economical structures played an important role in the process of establishing the village. The continuous political struggles between the scholar officials forced them to abuse the blood ties as well as the academic and regional relation. Using the disorder of land ownership system, the ruling elite made chances to expand the private land ownership, and these became the fiscal background of the formation of the lineage village and the agglomeration. The capital area's lineage villages were used of fiscal background by scholar officials lived in Hanyang. In the reason of political struggle, the initiator came to Osan-ri in late 16th Century. And in early 17th century, with a government dignitary, Shin Kye-Young, and with the reproduction of population, Osan-ri formed a typical lineage village with many clan households in the late of 17th century.
Olig2 transcription factor is widely expressed throughout the central nervous system; therefore, it is considered to have multiple functions in the developing, mature and injured brain. In this mini-review, we focus on Olig2 in the forebrain (telencephalon and diencephalon) and discuss the functional significance of Olig2 and the differentiation properties of Olig2-expressing progenitors in the development and injured states. Short- and long-term lineage analysis in the developing forebrain elucidated that not all late Olig2+ cells are direct cohorts of early cells and that Olig2 lineage cells differentiate into neurons or glial cells in a region- and stage-dependent manner. Olig2-deficient mice revealed large elimination of oligodendrocyte precursor cells and a decreased number of astrocyte progenitors in the dorsal cortex, whereas no reduction in the number of GABAergic neurons. In addition to Olig2 function in the developing cortex, Olig2 is also reported to be important for glial scar formation after injury. Thus, Olig2 can be essential for glial differentiation during development and after injury.
Objective: The Agu is the only native pig breed in Japan, which is reared in Okinawa prefecture, the southernmost region in Japan. Its origins are considered to be of Asian lineage; however, the genetic background of the Agu is still unclear. The objective of this study was to elucidate the maternal lineage of the Okinawa indigenous Agu pig with the use of the mitochondrial DNA (mtDNA) control region. Methods: The mtDNA control regions of Agu pigs were sequenced and the phylogenetic relationship among Agu, East Asian and European pigs was investigated with the use of 78 Agu individuals. Results: Twenty-seven polymorphic sites and five different haplotypes (type 1 to type 5) were identified within the Agu population. Phylogenetic analysis indicated that types 1 and 2 were included in East Asian lineages; however, the remaining types 3, 4, and 5 were of European lineages, which showed a gene flow from European pigs in the 20th century. Sixty-seven out of 78 Agu individuals (85.9%) possessed mtDNA haplotypes 1 and 2 of the East Asian lineage, which were identical to two haplotypes of ancient mtDNA (7,200 to 1,700 years before the present) excavated at archaeological sites in Okinawa. Conclusion: This study confirmed that the East Asian lineage is dominant in the maternal genetic background of the Agu population, supporting the hypothesis that the ancestors of the Agu pig were introduced from the Asian continent.
The mosquito-borne pathogen Zika virus may result in neurological disorders such as Guillain-Barré syndrome and microcephaly. The virus is classified as a member of the Flaviviridae family and its wide spread in multiple continents is a significant threat to public health. So, there is a need to develop animal models to examine the pathogenesis of the disease and to develop vaccines. To examine the clinical profile during Zika virus infection, we infected neonatal and adult wild-type mice (C57BL/6 and Balb/c) and compared the clinical signs of African-lineage strain (MR766) and Asian-lineage strain (PRVABC59, MEX2-81) of Zika virus. Consistent with previous reports, eight-week-old female Balb/c mice infected with these viral strains showed no changes in body weight, survival rate, and neurologic signs, but demonstrated increases in the weights of spleens and hearts. However, one-day-old neonates showed significantly lower survival rate and body weight with the African-lineage strain than the Asian-lineage strain. These results confirmed the pathogenic differences between Zika virus strains. We also evaluated the clinical responses in neonatal and adult mice of different strains. Our findings suggest that these are useful mouse models for characterization of Zika virus for vaccine development.
Park, Kwang-Wook;Choi, Sung-Sik;Lee, Dong-Ho;Lee, Hwang;Choi, Seung-Kyu;Park, Chang-Sik;Lee, Sang-Ho
Reproductive and Developmental Biology
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v.35
no.1
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pp.23-31
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2011
Two piglets and one juvenile pig were used to investigate closely what types of cells express green fluorescent protein (GFP) and if any, whether the GFP-tagged cells could be used for stem cell transplantation research as a middle-sized animal model in bone marrow cells of recloned GFP pigs. Bone marrow cells were recovered from the tibia, and further analyzed with various cell lineage markers to determine which cell lineage is concurrently expressing visible GFP in each individual animal. In the three animals, visible GFP were observed only in proportions of the plated cells immediately after collection, showing 41, 2 and 91% of bone marrow cells in clones #1, 2 and 3, respectively. The intensity of the visible GFP expression was variable even in an individual clone depending on cell sizes and types. The overall intensities of GFP expression were also different among the individual clones from very weak, weak to strong. Upon culture for 14 days in vitro (14DIV), some cell types showed intensive GFP expression throughout the cells; in particular, in cytoskeletons and the nucleus, on the other hand. Others are shown to be diffused GFP expression patterns only in the cytoplasm. Finally, characterization of stem cell lineage markers was carried out only in the clone #3 who showed intensive GFP expression. SSEA-1, SSEA-3, CD34, nestin and GFAP were expressed in proportions of the GFP expressing cells, but not all of them, suggesting that GFP expression occur in various cell lineages. These results indicate that targeted insertion of GFP gene should be pursued as in mouse approach to be useful for stem cell research. Furthermore, cell- or tissue-specific promoter should also be used if GFP pig is going to be meaningful for a model for stem cell transplantation.
Fusarium wilt caused by Fusarium oxysporum f. sp. fragariae (Fof) is the most important diseases of a strawberry field in Korea. We surveyed phylogenetic analysis, pathogenicity test, and fungicide response about Fof isolates isolated from Korea. Twenty-seven isolates of F. oxysporum isolated from strawberry plants were conducted in this study. Specific amplification by Fof specific primer was confirmed in all 26 isolates except Fo080701 isolate. The nuclear ribosomal intergenic spacer region and the translation elongation factor EF-lα gene sequences of isolates revealed three main lineages. Most of all isolates were contained DNA lineage group 1, but 2 and 3 group was shown only one and three isolates, respectively. All isolates were shown in pathogenicity with cv. Seolhyang. The EC50 mean values of prochloraz ranged 0.02-0.1 ㎍/ml except for Fo080701 and effectively inhibited mycelial growth at low concentrations. The EC50 value of metconazole was also 0.04-0.22 ㎍/ml, showing a similar inhibitory effect to that of prochloraz. The EC50 value of pyraclostrobin was 0.23-168.01 ㎍/ml, which was different according to the strain. In the field trial, boscalid+fludioxonil, fluxapyroxad+pyraclostrobin, and prochloraz manganese were selected as the effective fungicides for controlling Fusarium wilt.
Mesenchymal stem cells (MSCs) in the bone marrow and other somatic tissues reside in an environment with relative low oxygen tension. Cobalt chloride ($CoCl_2$) can mimic hypoxic conditions through transcriptional changes of some genes including hypoxia-inducible factor-$1{\alpha}$ (HIF-$1{\alpha}$) and vascular endothelial growth factor (VEGF). This study evaluated the potential role of $CoCl_2$ preconditioning on multi-lineage differentiation of C3H/10T1/2, a murine MSC line to understand its possible molecular mechanisms in vitro. $CoCl_2$ treatment of MSCs markedly increased HIF-$1{\alpha}$ and VEGF mRNA, and protein expression of HIF-$1{\alpha}$. Temporary preconditioning of MSCs with $CoCl_2$ induced up-regulation of osteogenic markers including alkaline phosphatase, osteocalcin, and type I collagen during osteogenic differentiation, followed by enhanced mineralization. $CoCl_2$ also increased chondrogenic markers including aggrecan, sox9, and type II collagen, and promoted chondrocyte differentiation. $CoCl_2$ suppressed the expression of adipogenic markers including $PPAR{\gamma}$, aP2, and $C/EBP{\alpha}$, and inhibited adipogenesis. Temporary preconditioning with $CoCl_2$ could affect the multi-lineage differentiation of MSCs.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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