Objective: Recent studies have demonstrated that lin-28 homolog B (LIN28B)/miRNA let-7 (let-7) plays a role in the regulation of pubertal onset in mammals. However, the role of LIN28B/let-7 in the onset of ovine puberty remains unknown. We cloned the Duolang sheep Lin28B cDNA sequence, detected the expression change of LIN28B, let-7a and let-7g in hypothalamus, pituitary and ovary tissues at three different pubertal stages. Methods: The reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) was used to clone the cDNA sequence of LIN28B gene from Duolang sheep and the bioinformatics methods were applied to analyze the amino acid sequence of LIN28B protein. The mRNA expression levels of the LIN28B gene at different pubertal stages were examined by real time RT-PCR. Results: LIN28B cDNA of Duolang sheep was cloned, and two transcripts were obtained. The amino acid sequence of transcript 1 shares 99.60%, 98.78%, and 94.80% identity with those of goat, wild yak and pig, respectively. Strong LIN28B mRNA expression was detected in the hypothalamus, pituitary, ovary, oviduct and uterus, while moderate expression was found in the liver, kidney, spleen and heart, weak expression was observed in the heart. No expression was found in the lungs. Quantitative real-time PCR (QPCR) and western-blot analysis revealed that the LIN28B was highly expressed in the hypothalamus and ovary at prepuberty stages, and this expression significantly decreased from the prepuberty to puberty stages (p<0.05). Markedly increased levels of mRNA expression were detected in the pituitary from prepuberty to puberty (p<0.05) and then significantly decreased from puberty to post-puberty (p<0.05). The expression levels of let-7a and let-7g showed no significant changes among different pubertal stages (p>0.05). Conclusion: These results provided a foundation for determining the functions of LIN28B/let-7 and their role in the onset of sheep puberty.
Lin28a has diverse functions including regulation of cancer, reprogramming and regeneration, but whether it promotes injury or is a protective reaction to renal injury is unknown. We studied how Lin28a acts in unilateral ureteral obstruction (UUO)-induced renal fibrosis following unilateral ureteral obstruction, in a mouse model. We further defined the role of Lin28a in transforming growth factor (TGF)-signaling pathways in renal fibrosis through in vitro study using human tubular epithelium-like HK-2 cells. In the mouse unilateral ureteral obstruction model, obstruction markedly decreased the expression of Lin28a, increased the expression of renal fibrotic markers such as type I collagen, α-SMA, vimentin and fibronectin. In TGF-β-stimulated HK-2 cells, the expression of Lin28a was reduced and the expression of renal fibrotic markers such as type I collagen, α-SMA, vimentin and fibronectin was increased. Adenovirus-mediated overexpression of Lin28a inhibited the expression of TGF-β-stimulated type I collagen, α-SMA, vimentin and fibronectin. Lin28a inhibited TGF-β-stimulated SMAD3 activity, via inhibition of SMAD3 phosphorylation, but not the MAPK pathway ERK, JNK or p38. Lin28a attenuates renal fibrosis in obstructive nephropathy, making its mechanism a possible therapeutic target for chronic kidney disease.
To, Van;Kim, Hyun Ju;Jang, Wijeong;Sreejith, Perinthottathil;Kim, Changsoo
한국발생생물학회지:발생과생식
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제25권4호
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pp.313-319
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2021
Hub cells comprise a niche for germline stem cells and cyst stem cells in the Drosophila testis. Hub cells arise from common somatic gonadal precursors in embryos, but the mechanism of their specification is still poorly understood. Here we find that RNA binding proteins Lin28 and Imp mediate transcript stability of Bowl, a known hub specification factor; Bowl transcripts were reduced in the testis of Lin28 and Imp mutants, and also when RNA-mediated interference against Lin28 or Imp was expressed in hub cells. In tissue culture Luciferase assays involving the Bowl 3'UTR, stability of Luc reporter transcripts depended on the Bowl 3'UTR and required Lin28 and Imp. Our findings suggest that proper Bowl function during hub cell specification requires Lin28 and Imp in the testis hub cells.
A stem cell niche provides an environment that governs stem cell maintenance and division. Thus, the development of a proper niche is of prime importance to stem cell behaviors. Mechanisms of niche development are beginning to be revealed in the Drosophila male gonad. Niche cells are initially dispersed throughout the gonad, then assemble at its apical tip through the anterior migration of posteriorly located niche cells. The molecular mechanisms of this migration and assembly are still poorly understood. Here we show evidence suggesting that Lin28, an RNA-binding protein and regulator of let7 genesis, might be an intrinsic factor for the anterior migration of niche cells. We found that a dispersed, ectopic niche, a phenotype observed with anterior migration defects, occurs in lin28 mutant gonads. This phenotype is rescued by expression of lin28 in the niche cells. These findings suggest that Lin28 might be required for the anterior migration of niche cells.
Park, Geon Tae;Seo, You-Mi;Lee, Su-Yeon;Lee, Kyung-Ah
Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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제39권2호
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pp.87-93
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2012
Objective: Lin28 has been known to control the proliferation and pluripotency of embryonic stem cells. The purpose of this study was to determine the downstream effectors of Lin28 in mouse embryonic stem cells (mESCs) by RNA interference and microarray analysis. Methods: The control siRNA and Lin28 siRNA (Dharmacon) were transfected into mESCs. Total RNA was prepared from each type of transfected mESC and subjected to reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) analysis to confirm the downregulation of Lin28. The RNAs were labeled and hybridized with an Affymetrix Gene-Chip Mouse Genome 430 2.0 array. The data analysis was accomplished by GenPlex 3.0 software. The expression levels of selected genes were confirmed by quantitative real-time RT-PCR. Results: According to the statistical analysis of the cDNA microarray, a total of 500 genes were altered in Lin28-downregulated mESCs (up-regulated, 384; down-regulated, 116). After differentially expressed gene filtering, 31 genes were selected as candidate genes regulated by Lin28 downregulation. Among them, neuropeptide Y5 receptor and oocyte-specific homeobox 5 genes were significantly upregulated in Lin28-downregulated mESCs. We also showed that the families of neuropeptide Y receptor (Npyr) and oocyte-specific homeobox (Obox) genes were upregulated by downregulation of Lin28. Conclusion: Based on the results of this study, we suggest that Lin28 controls the characteristics of mESCs through the regulation of effectors such as the Npyr and Obox families.
Park, Sung Won;Lee, Seung-Tae;Sohn, Young Bae;Cho, Sung Yoon;Kim, Se-Hwa;Kim, Su Jin;Kim, Chi Hwa;Ko, Ah-Ra;Paik, Kyung-Hoon;Kim, Jong-Won;Jin, Dong-Kyu
Clinical and Experimental Pediatrics
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제55권10호
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pp.388-392
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2012
Purpose: Single-nucleotide polymorphism (SNP) markers within LIN28B have been reported to be related to the timing of pubertal growth. However, no study has investigated the frequency of genetic markers in girls with precocious puberty (PP) or early puberty (EP). This study aimed to determine the frequency of putative genetic markers in girls with PP or EP. Methods: Genomic DNAs were obtained from 77 and 109 girls that fulfilled the criteria for PP and EP, respectively. The controls in this study were 144 healthy volunteers between 20 and 30 years of age. The haplotypes were reconstructed using 11 SNPs of LIN28B, and haplotype association analysis was performed. The haplotype frequencies were compared. Differences in the clinical and laboratory parameters were analyzed according to the haplotype dosage. Results: Eleven SNPs in LIN28B were all located in a block that was in linkage disequilibrium. The haplotype could be reconstructed using 2 representative SNPs, rs4946651 and rs369065. The AC haplotype was less frequently observed in the PP group than in the controls (0.069 vs. 0.144, P=0.010). The trend that girls with non-AC haplotypes tended to have earlier puberty onset (P=0.037) was illustrated even in the EP+PP patient group by Kaplan-Meier analysis. Conclusion: The results of the present study showed that non-AC haplotypes of LIN28B had a significant association with PP in girls.
본 논문에서는 자동차의 위치 및 자세 추정에 사용되는 칼만 필터 가속기를 내장한 차량용 ECU(electronic control unit)를 설계하고 구현하였다. 프로세서 코어는 RISC-V를 사용하였으며 칼만 필터의 행렬 연산을 수행하는 가속기, 차량 내 통신에 사용되는 CAN(controller area network) 제어기, 센서 연결에 사용되는 LIN(local interconnect network) 제어기를 내장하였다. 칼만 필터 연산은 시간 업데이트와 측정 업데이트의 두 단계로 나뉘며 시간 업데이트 단계에서는 현재 상태변수와 오차 공분산을 예측하고 측정 업데이트 단계에서는 입력값을 받아 칼만 이득을 계산하여 값을 보정한다. 보통 소프트웨어에서는 곱셈에 부동소숫점 연산을 사용하지만 본 논문에서는 하드웨어 면적을 줄이기 위해 정밀도 분석을 고려한 고정소숫점 곱셈기를 사용하였다. 설계된 ECU는 Verilog HDL을 이용하여 검증하였으며 28nm 실리콘 공정으로 구현하였다. 28nm 실리콘 공정으로 구현하였을 때 동작 주파수는 100MHz, 면적은 0.37mm2, 게이트 수는 76만 게이트였다.
A mini-projector prototype employing a LED light source, a nontelecentric structure, and an LCOS panel for application in the integrated 3D display was fabricated. A seamless image was obtained by tilting an array of mini-projectors. Seamless quality was created by the excellent uniformity of the projection intensity on the mini-projector's screen, which was simulated as 98.34%. Great uniformity can be realized by optimizing the design of the light source and the optics configuration, which is the key to such realization.
Shipping companies are key components of the logistics industry, which is extremely significant in enhancing the country's comprehensive national power and promoting global trade development. In the context of the implementation of the new development pattern strategy in China and the impact of the global novel coronavirus (COVID-19), this paper takes 22 Chinese shipping listed companies as the research object and analyses the operational efficiency of them from 2011 to 2020 based on the Super-SBM DEA Model and Window DEA Model. Factors affecting the efficiency are further analyzed with the Tobit model. The research conclude that the operational efficiency of Chinese shipping companies as a whole shows a steady increase from 2011 to 2020. Although most of them are in a relatively ef ective operation state, fewer are absolutely effective companies. Besides efficiency among companies differs obviously, which indicates the potential of further improvement and promotion. What's more, factors such as current economic development level, enterprise size, human resources quality and enterprise turnover speed have significant positive correlation to the operation efficiency of Chinese shipping listed companies, which is significant to improve the operation efficiency of Chinese shipping companies.
This study experimentally investigated the improvement of bond strength and durability of concrete containing high volume fly ash. Concrete mixtures made with 0%, 25% and 60% replacement of cement with class F fly ash were prepared. Water-binder ratios ranged from 0.28 to 0.72. The compressive, flexural and pullout bond strength, the resistance to chloride-ion penetration, and the water permeability of concrete were measured and presented. Test results indicate that except for the concretes at early ages, the mechanical properties, bond strength, and the durability-related chloride-ion permeability and water permeability of concrete containing high volume (60% cement replacement) fly ash were obviously superior to the concrete without fly ash at later ages of beyond 56 days. The enhanced bond strength for the high volume fly-ash concrete either with or without steel confinement is a significant finding which might be valuable for the structural application.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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