김치로부터 Listeria spp.를 억제하는 박테리오신을 생산하는 젖산균 4균주를 선발하여 Leuconostoc mesenteroides subsp. mesenteroides (2균주), Leuconostoc paramesenteroides 및 Pediococcus pentosaceus로 동정하였다. 실험한 모든 Listeria monocytogenes 균주들은 모든 분리 균주의 박테리오신에 의해 억제되었으나, L. denigrificans 28과 L. welchimeri 89는 Leu. paramesenteroides 분리균주에 의해 억제되지 않았다. 분리균주들 중에서 P. pentosaceus의 박테리오신이 가장 항균활성이 높았고, 항균범위도 넓었다. Leuconostoc 분리균주들의 박테리오신의 항균활성은 pronase E에 의해 완전히 불활성화 되었으나 P. pentosaceus의 것은 완전히 불활성화되지 않았다. 분리균주들의 박테리오신은 catalase, ${\alpha}$-amylase, lysozyme 및 $100^{\circ}C$ 30분의 열처리에 대해서 안정하였다.
1,4-Dihydroxy-2-naphthoic acid (DHNA), a precursor of menaquinone (vitamin K2), has an effect on growth stimulation of bifidobacteria and prevention of osteoporosis, making it a promising functional food material. Therefore, we tried to clone the menB gene encoding DHNA synthase from Leuconostoc mesenteroides CJNU 0147. Based on the genome sequence of Leu. mesenteroides ATCC 8293 (GenBank accession no., CP000414), a primer set (Leu_menBfull_F and Leu_menBfull_R) was designed for the PCR amplification of menB gene of CJNU 0147. A DNA fragment (1,190 bp), including the menB gene, was amplified, cloned into pGEM-T Easy vector, and sequenced. The deduced amino acid sequence of MenB (DHNA synthase) protein of CJNU 0147 had a 98% similarity to the corresponding protein of ATCC 8293. The menB gene was subcloned into pCW4, a lactic acid bacteria - E. coli shuttle vector, and transferred to CJNU 0147. The transcription of menB gene of CJNU 0147 (pCW4::menB) was increased, when compared with those of CJNU 0147 (pCW4) and CJNU 0147 (−). The DHNA was produced from it at a detectable level, indicating that the cloned menB gene of CJNU 0147 encoded a DHNA synthase which is responsible for the production of DHNA, resulting in an increase of bifidogenic growth stimulation activity.
동치미에서 분리한 Leu. mesenteroides subsp. cremoris DLAB19 균주의 MNNG와 4-NQO에 대한 항돌연변이원성물질 생산을 위한 최적 조건을 조사한 결과, 탄소원으로 glucos들 첨가시 가장 높은 항돌연변이 효과를 나타내었으며, 질소원으로서 yeast extract와 bactopeptone 첨가시 항돌연변이 효과가 우수하였다. 탄소원으로 glucose의 농도를 2% 첨가시 MNNG와 4-NQO에 대한 항돌연변이 효과가 가장 우수하였으며, 질소원으로서 yeast extract와 bac-topetone의 농도를 1% 첨가시 가장 우수한 항돌연변이효과를 나타내었다. 항돌연변이원성 물질 생산을 위한 최적 배양 조건은 pH, 배양 온도, 배양 속도가 각각 7.0, 3$0^{\circ}C$ 및 150 rpm이었다. 상기의 최적 조건에서 36시간 배양시 가장 높은 항돌연변이 효과를 나타내었는데 S. enterica serovar typhimurium TA100과 TA98을 이용한 겨우 항돌연변이 효과가 각각 96.4%와 53.8%이었다.
Alternan known as a kind of dextran is a linear and cyclic polysaccharide which is synthesized with sucrose by alternaansucrase (EC2.4.1.140) of Leuconostoc mesenteroides. But this polysaccharide is different from dextran in its structure and other properties. For the purpose of applying alternan for the food, cosmetic, and pharmaceutical industries, we isolated an excellent alternan-porducing strain, Leu. mesenteroides CBI-110. The optimum culture conditions were studied to improve the yield, and the activity of alternansucrase was increased up to 33U/ml in the optimum culture media. The concentrations of $Mn^{2+}$ and $Cu^{2+}$ ions were 0.01% and 0.03%, respectively, for the effective production of alternan. Finally, we obtained 25.6g/L of alternan.
본 연구는 김치에 분포하는 것으로 알려져 있는 대표적인 젖산균에 관한 콜레스테롤 저하 효과에 관하여 연구하였다. Lactobacillus 1종, Leuconostoc 2종과 Weissella 2종을 대상으로 콜레스테롤 저하 효과를 측정하였다. 김치 초기 발효균인 Leu. citreum은 55.46% 콜레스테롤 감소율을 보였고, 대표적인 산패균인 Lac. plantarum은 55.91%, Leu. mesenteroides은 56.37%였으며 W. kimchii,, W. confusa 등에서도 55% 이상의 콜레스테롤 저하 효과가 나타났다. 김치의 발효 숙성 과정에 나타나는 젖산균들이 시험관 내에서 콜레스테롤 저하 효과가 확인되어, 향후 in vivo 조건하에서 콜레스테롤 저하에 어느 정도 영향을 미치는지 검토해볼 필요가 있다고 사료된다.
김치발효에 관여하는 균종들에 대해 항균작용이 있는 것으로 알려진 adipic acid를 김치제조시 첨가하고, 동시에 adipic acid 저항성 변이균주인 Leuconostoc mesenteroides와 Leu. paramesenteroides 두 균주를 김치에 starter로서 첨가하여 발효시키므로써 김치의 저장기간 연장과 풍미증진 효과를 조사하였다. 또한 이를 위한 변이균주의 최적의 첨가량을 조사하였다. 김치발효의 주요 숙성균주로서 산에 약한 Leu. mesenteroides와 Leu. paramesenteroides 두 균주를 adipic acid에 대한 저항성을 갖도록 변이시킨 후 adipic acid 0.16%와 함께 두 변이주를 각각 단독으로 또는 두 변이균주의 혼합균주(1 : 10)로서 김치제조시 starter로 첨가한 경우. 단독첨가 보다는 혼합균주인 경우가 산패지연 효과와 관능특성 면에서 우수하였으며 혼합균주의 최적 첨가량은 0.005%로 조사되었다.
The object of this study was to investigate the effects of blanching and lactic acid bacterial inoculation on the quality of kimchi. The pHs of the group added Leuconostoc mesenteroides were rapidly decreased, and then kept almost steady states. However, the pHs of the groups added Bifidobacterium bifidum were gradually decreased. Blanching treatment reduced the number of viable cells. At the beginning of the fermentation, the total organic acid contents of the blanched groups were lower than those of the non-blanched groups, but later on they were higher. With fermentation, the contents of malic, citric and fumaric acid were decreased in the control group, but increased in the cultured groups and all blanched groups. The cutting forces of the blanched groups were higher than those of the non-blanched groups during the whole fermentation period. The inoculation of Leu. mesenteroides was effective on the preservation of ascorbic acid. Blanching and the inoculation of Leu. mesenteroides gave good effect on the sensory acceptability. The acceptability of the groups added Bifidobacterium bifidum was low in initial fermentation period, but increased during the late fermentation period.
김치발효 중에 주로 나타나는 Lac. plantarum, Leu. mesenteoides, Ped. acidilactici, Lac. brevis 등의 젖산균들이 김치발효에 미치는 영향을 규명하고자, 이 젖산균들을 순수 배양하여 염도 2.31%의 김치즙에 접종한 후 $30^{\circ}C$, $21^{\circ}C$, $7^{\circ}C$에서 발효시키면서 알코올 당의 변화 및 생균수의 변화를 관찰하고 관능검사를 하였다. Ethyl alcohol은 control group과 Leu. mesenteoides를 접종한 시료, 4종의 젖산균을 혼합 접종한 시료에서 검출되었으며 특히 $14^{\circ}C$에서 더 많은 양이 검출되었다. 당은 발효가 진행됨에 따라 감소하였고, 감소 정도는 pH 및 총산도의 변화와 잘 일치하였다. 총 생균수는 발효초기에는 증가하다가 서서히 감소하는 경향을 보였으며 control group과 Leu. mesenteroides에 있어서 김치가 적당히 익은 정도의 pH및 산도를 보이는 시기와 최고의 균수에 도달하는 시기가 일치하였다. 관능검사 결과 모든 온도에서 Control group이 냄새와 맛이 가장 좋았고 그 다음 4종의 젖산균을 혼합접종한 시료 Leu. mesentenoides를 접종한 시료의 순으로 나타났으며, 온도에 있어서는 $14^{\circ}C$에서 맛과 냄새가 좋았다.
열무김치로부터 김치유산균을 분리하고 프로바이오틱스로 이용 가능한 균주를 선발하기 위하여 인체의 장관과 유사한 인체장모델시스템(SHIMS)을 이용한 in silico 실험을 수행하였다. 열무김치에서 분리한 5종과 표준균주 12종에 대해 내산성 및 내담즙산성을 시험하여 생존율이 높은 2종의 균주를 선발하였다. 선발한 균주를 SHIMS에서 시험하여 가장 높은 생존율을 나타낸 균주의 16S rRNA를 분석한 결과 Leu. mesenteroides로 동정되었으며 이 김치유산균을 Leu. mesenteroides K01으로 명명하였다. 이 균주는 SHIMS에서 생존율이 높았기 때문에 프로바이오틱스로 다양하게 이용할 가치가 있다고 판단된다.
Previous studies have confirmed that fermented whey produced by Leuconostoc mesenteroides CJNU 0147 or Lactobacillus casei CJNU 0588 display bifidogenic growth stimulator (BGS) activity. The present study sought to determine if the strain itself can improve the growth of bifidobacteria in co-cultures. In reinforced clostridial medium (RCM), both strains stimulated the growth of a Bifidobacterium lactis strain during the exponential phase and also stimulated the growth during almost all growth phases in whey broth. Fermented whey containing viable Leu. mesenteroides CJNU 0147 and L. casei CJNU 0588 cells maintained viability of the B. lactis strain stored at $10^{\circ}C$ in MRS broth. Viable cell count of the B. lactis strain without the fermented whey was decreased to 5.6 log cfu/mL after 15 days, whereas that of the strain with the fermented whey was slightly increased to 7.1 log cfu/mL as compared with initial viable cell count of 6.9 log cfu/mL.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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