• 한국식품영양과학회지
• /
• 제36권5호
• /
• pp.534-539
• /
• 2007

본 연구는 김치로 분리한 우량 종균인 Leu. citreum GJ7의 급성독성을 시험하기 위하여 ICR 마우스에게 1회 Leu. citreum GJ7을 복강 또는 경구투여한 후 사망률, 체중의 변화, 일반 및 임상증상, 육안적 소견 등을 관찰하였다. 복강투여 후 24시간 관찰한 결과, 일부 Leu. citreum GJ7 투여군에서 부분적으로 사망례가 관찰은 되었으나 나머지 시험동물은 계속 생존하여 2,500 mg/kg까지는 평균치사량을 산출할 수 없었다. 또한 5,000 mg/kg을 14일 동안 경구투여하였을 경우에는 사망례가 없었으며, 특이한 임상증상도 관찰되지 않았다. 복강 혹은 경구투여한 후 마우스의 체중변화에 있어서도 대조군과 Leu. citreum GJ7 투여군 사이에 유의성 있는 차이는 보이지 않았으며, 생존동물의 부검결과에서도 내부 장기의 육안적 이상이 관찰되지 않았다. 따라서 Leu. citreum GJ7은 본 실험의 모든 조건에서 $LD_{50}$이 복강투여 시 2,500 mg/kg, 경구투여 시 5,000 mg/kg 이상인 저독성의 안전한 물질로 사료된다.

• Applied Biological Chemistry
• /
• 제34권4호
• /
• pp.334-338
• /
• 1991

고상법으로 새로운 반응기구에 의한 bradykinin 및 $(D-Phe7\;-Leu^8)$ bradykinin을 합성하였다. Coupling은 N, N'-dicyclohexylcarbodiimide로 행하였으며 HBr 용액으로 cleavage한 후 조펩티드는 high pressure liquid chromatography로 정제하였다. 이들 펩티드의 순도는 paper chromatography, thin layer chromatography, paper electrophoresis, 융점측정기 및 아미노산기분석기에 의하여 분석하였다. Endopeptidase인 ${\alpha}-chymotrypsin$과 trysin, exopeptidase인 carboxypeptidase A와 leucine aminopeptidase를 사용하여 in vitro 상에서 이들 펩티드의 분해실험을 하였다. ${\alpha}-Chymotrypsine$ 및 carboxypeptidase A에 의하여 이들 펩티드는 빠르게 분해하였으나 leucine aminopeptidase는 N-말단의 2번 위치에 proline의 imino결합 때문에 분해하지 않았다.

• 한국미생물·생명공학회지
• /
• 제34권3호
• /
• pp.196-203
• /
• 2006

김치로부터 3종의 EPS 생성 유산균을 분리하였다. 분리균주는 Leuconostoc kimchii, Leuconostoc citreum, Leuconostoc mesenteroides로 동정되었으며, 각각 Leuconostoc kimchii GJ2, Leuconostoc citreum C3, Leuconostoc mesenteroides C11로 명명하였다. EPS생성 김치유산균의 장내 정착성 여부 확인 결과 pH 3.0의 0.05 M sodium phosphate buffer와 인공위액에서 2시간 처리한 후에도 3균주 모두 초기균수($10^8\;CFU/ml$)를 유지하였으며 인공담즙에서 24시간 처리한 후에도 3균주 모두 초기균수($10^8\;CFU/ml$)를 유지하며 3종의 EPS생성 김치유산균 Leu. kimchii GJ2, Leu. citreum C3, Leu. mesenteroides C11이 장내 정착하면서 probiotics로서 작용할 수 있을 것임을 확인하였다. 반면, 대조군으로서 분리균주가 EPS를 생성하지 않았을 때의 경우에는 내산성, 인공위액, 인공담즙에서 처리 후 생균수가 $10^{1-2}\;CFU/ml$ 감소현상을 보여 균체의 EPS생성 여부가 probiotics로서 기능할 수 있는데 결정적 요인임을 보여주었다. 특히 Leu. kimchii GJ2의 경우 E. coli, Pseudomonas, Listeria, Micrococcus, Salmonella, Staphylococcus, Streptococcus속 등의 유해 균주에서 항균활성을 나타내었으며, 생산 항균물질은 단백질성 물질로 확인되었다. 김치유산균 Leu. kimchii GJ2, Leu. citreum C3, Leu. mesenteroides C11로부터의 EPS 생성량은 sucrose(5%) 배지에서 각각 21.49 g/l, 16.46 g/l, 22.98 g/l 였으며, 정제 시에도 각각 14.61 g/l, 7.73 g/l, 4.77 g/l로 기존의 EPS 생성 유산균에서의 생산량에 비해 10배 이상의 높은 생산량을 나타내었다. TLC 및 HPLC를 이용한 EPS 구성 당 확인 결과 3균주 모두 glucose로만 구성된 homopolysaccharides로 확인되었다. EPS 생성량이 가장 좋은 Leu. kimchii GJ2의 평균 분자량은 360,606 Da이었으며, 나머지 두 균주에 대해서는 생성 EPS 형태와 점도의 차이로 미루어 보아 생성 EPS의 분자구조와 분자량이 서로 다른 것으로 판단하였다.

• Pediatric Gastroenterology, Hepatology & Nutrition
• /
• 제2권2호
• /
• pp.164-168
• /
• 1999

Background: Wilson disease (WD) is an autosomal recessive disorder of copper transport and characterized by degenerative changes in the brain, liver dysfunction, and Kayser-Fleischer rings due to toxic accumulation of copper. Since the identification of Wilson disease gene (ATP7B), more than 80 mutations have been detected among the different ethnic groups. Methods: Twenty three children with Wilson disease were included in this study. They were all diagnosed by low serum ceruloplasmin and increased 24 hour urinary copper excretion with characteristic clinical findings. We analysed WD gene mutation by assessing the nucleotide sequence of exon 7, 8, 9 and 10 including intron-exon boundaries of ATP7B gene from genomic DNA. Results: Arg778Leu mutation was identified in 16 WD patients; three were homozygous and 13 were heterozygous for this mutation. Of the 46 alleles, 19 alleles had a Arg778Leu mutation (19/46=41%). Homozygote patients had neurologic forms of WD. Arg778Leu mutation was not found among 50 normal healthy persons. Conclusion: Arg778Leu mutation is a common mutation in Korean WD gene. Arg778Leu mutation screening might be used as a useful supplementary diagnostic test in some patients to confirm Wilson disease in Korea.

• 한국식품과학회지
• /
• 제27권4호
• /
• pp.506-515
• /
• 1995

저온발효된 김치에서 분리되어 Leuconostoc mesenteroides subsp. mesenteroides, Leu. mesenteroides subsp. dextranicum, Leu. paramesenteroides, Leu. lactis, Lactobacillus bavaricus 및 Lac. homohiochii로 각각 동정된 저온성 젖산균 60주에 대하여 여러 조건에서의 배양특성들을 조사하였다. 모든 균주들이 $5^{\circ}C,\;10^{\circ}C$ 및 $37^{\circ}C$에서 증식하였고, $45^{\circ}C$에서는 증식하지 못하였다. 최적 증식 온도는 Leu. mesenteroides의 균주들은 $33{\sim}34^{\circ}C$이었고, Lactobacillus속의 균주들은 $34{\sim}36^{\circ}C$이었다. Leu. mesenteroides와 Lactobacillus속의 균주들은 모두 초기 pH 4.8 및 4.2에서 증식하였으나 4.0에서는 증식하지 못하였다. Glucose broth에서의 최종 pH는 Leu. mesenteroides의 균주들은 $3.85{\sim}4.10$이었고, lactobacillus속 균주들은 $3.82{\sim}3.99$이었다. 60균주 모두 litmus milk에서 우유를 응고시키지 못하였고, litmus를 환원시키지도 못하였다. Leu. mesenteroides와 Lactobacillus속의 균주들은 모두 에탄올 7% 함유배지와 NaCl 6.5% 함유배지에서 증식하였고, 에탄올 15% 함유배지와 NaCl 10% 함유배지에서는 증식하지 못하였다. 모든 균주들이 pH 3.5인 인공위액과 40%의 담즙액에서 내성을 나타내었다. 특히 Leu. mesenteroides의 균주들은 모두 pH 3.0인 인공위액에서도 내성을 나타내었다. 본 젖산균들의 생리적인 특성은 여러 점에서 Bergey's Manual of Systematic Bacteriology에 기재된 내용들과 일치하지 않으므로 더욱 정밀한 조사를 실시하여 분류학상의 위치를 정확히 밝혀 볼 필요가 있을 것으로 생각되었다.

• 분석과학
• /
• 제35권3호
• /
• pp.129-135
• /
• 2022

본 연구는 alumina, leucine, alumina와 leucine을 9:1로 혼합한 분말(이하 Al-Leu (9:1)), alumina와 leucine을 5:1로 혼합한 분말(이하 Al-Leu (5:1)), alumina와 sodium lactate를 5:1로 혼합한 분말(이하 Al-Lac (5:1))을 자연상태 시료지문을 남긴 후 1, 7, 14, 30일로 노화시킨 잠재지문에 전처리한 후 cyanoacrylate fuming(이하 CA 훈증법)으로 현출 증강을 시도하였다. 전체적으로 미처리한 후 CA 훈증한 잠재지문보다 alumina, leucine, Al-Leu (9:1), Al-Leu (5:1), Al-Lac (5:1) 분말로 전처리한 잠재지문의 면적값과 특징점 개수가 향상되었다. 따라서 5종류의 개시제가 CA 훈증 시 현출 증강을 향상시키는 것을 확인하였다.

• 셀메드
• /
• 제6권2호
• /
• pp.13.1-13.7
• /
• 2016

Fatigue is a common complaint and affects the quality of life in modern people. Physical stress may induce activation of certain immune cells. Fermented porcine placenta (FPP) has been used to alleviate fatigue. Inflammatory cytokines are produced by physical stress and results in symptoms of fatigue. However, the role of FPP on fatigue-associated inflammatory cytokine production has not been elucidated yet. Thus, we estimated the anti-fatigue effect of FPP and its active components, leucine (Leu) and lysine (Lys) in activated RAW264.7 macrophages and forced swimming test (FST) fatigue animal model. Pretreatment with FPP, Leu, or Lys significantly inhibited the lipopolysaccharide (LPS)-induced tumor necrosis factor-α, interleukin (IL)-1β, and IL-6 production without inducing cytotoxicity on LPS-stimulated RAW264.7 macrophages. FPP, Leu, or Lys inhibited the production of nitric oxide and downregulated the expression of inducible nitric oxide synthase on LPS-stimulated RAW264.7 macrophages. Furthermore, caspase-1 activities increased by LPS were significantly reduced by FPP, Leu, or Lys. In the FST, inflammatory cytokine levels of the mice administrated with FPP, Lys, and Leu were significantly reduced compared with the control group at 21 days. Collectively, these results show that anti-fatigue effect of FPP and its active components, Leu and Lys might be derived from the down-regulating of inflammatory mediators.

• 한국식품영양학회지
• /
• 제10권1호
• /
• pp.110-116
• /
• 1997

여과제균한 배추즙에 김치에서 분리한 7주의 젖산균을 단독 접종하고 1$0^{\circ}C$, 2$0^{\circ}C$, 3$0^{\circ}C$ 및 4$0^{\circ}C$에서 배양하면서 각각의 증식곡선을 작성하고, 이를 이용하여 각 배양온도에서의 유도시간과 세대시간을 구하였다. 3$0^{\circ}C$에서 배양할 때의 유도시간은 Leu. mesenteroides subsp. dextranicum은 168분, Leu. mesenteroides subsp. mesenteroides는 204분, Leu. paramesenteroides는 612분, Lac. bavaricus는 258분, Lac. homohiochii는 228분, Lac. plantarum은 270분 그리고 Lac. brevis는 264분이었고, 세대시간은 Leu. mesenteroides subsp. dextranicum 및 Leu. mesenteroides subsp. mesenteroides는 36분, Lac. bavaricus는 33분, Lac. homohiochii는 39분, Lac. plantarum은 66분, Lac. brevis는 42분 그리고 Leu. paramesenteroides는 162분이었다. 배양온도를 3$0^{\circ}C$에서 1$0^{\circ}C$로 낮출 때 모든 균주들의 유도시간과 세대시간이 크게 연장되었는데, 이러한 연장은 Lac. plantarum에서 더욱 현저하게 나타났다. 1$0^{\circ}C$, 2$0^{\circ}C$ 및 3$0^{\circ}C$에서는 Leu. mesenteroides subsp. mesenteroides의 유도시간과 세대시간이 Lac. plantarum의 그것보다 더 짧았다. 그러나 4$0^{\circ}C$에서는 이러한 양상이 완전히 전도되었다. 전반적으로 보아 배양온도가 낮아질수록 Leu. mesenteroides subsp. mesenteroides의 증식에 상대적으로 더 유리하였고, 배양온도가 높아질수록 Lac. plantarum의 증식에 상대적으로 더 유리하였다.

• BMB Reports
• /
• 제34권3호
• /
• pp.244-249
• /
• 2001

The anabolic acetolactate synthase III was purified to homogeneity from Serratia marcescens using DEAE-Sepharose, Phenyl-Sepharose, and hydroxylapatite column chromatography The native molecular weight of the enzyme was approximately 165 kDa. The enzyme is composed of two large and two small subunits with molecular weights of 64 and 15 kDa, respectively. The N-terminal sequence of the large and small subunit of the enzyme was Ser-Ala-Thr-Pro-Gln-Pro-Ser-Thr-Arg-Phe-Thr-Cys-Ala-Gln-Leu-Ile-Ala-His-Leu and Met-Leu-Gln-Pro-Gln-Asp-Lys-Pro-Gln-Val-Ile-Leu-Glu-Leu-Ala-Val-Arg-Asn-His-Pro-Gly-Val-Met-Ser-His-Val, respectively. The optimum pH and pI value were 7.5 and 5.5, respectively The $IC_{50}$ values were $20\;{\mu}M$ and $14\;{\mu}M$ for valine and herbicide SU7, respectively. The substrate specificity ratio, R value, was determined to be approximately 40, which suggests that this enzyme prefers the formation of $\alpha$-aceto-$\alpha$-hydroxybutyrate leading to the synthesis of isoleucine.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
• /
• 제11권4호
• /
• pp.649-655
• /
• 2001

The kinetics of the thermolysin-catalyzed synthesis of N-(benzyloxycarbonyl)-L-phenylalanyl-L-leucine ethyl ester (Z-Phe-LeuOEt) from N-(benzyloxycarbonyl)-L-phyenylalanine (Z-Phe) and L-leucine ethyl ester (LeuOEt) in an ethyl acetate saturated aqueous system in a batch operation were studied. The kinetics for the synthesis of Z-Phe-LeuOEt were expressed using a rate equation for the rapid equilibrium random bireactant mechanism. The four kinetic constants involved in the rate equation were determined numerically by the quasi-Newton method so as to fit the calculated results with the experimental data. Within the pH and temperature range examined, the $K_{cat}$ value for the synthesis of Z-Phe-LeuOEt reached a maximum at pH 7.0 and $45^{\circ}C$, whereas the affinity between Z-Phe and thermolysin reached a maximum at pH 6.0 adn $40^{\circ}C$. The inhibitory effect of Z-Phe on the condensation reaction decreased as the pH and temperature decreased. In contrast, they affinity between LeuOEt and thermolysin remained unchanged within the pH and temperature range examined. Therefore, it was concluded that the protonation state of the carboxyl groups. of Z-Phe was more imprtant than that of the amono groups of LeuOEt for the synthesis of Z-Phe-LeuOEt in the present solvent system. The equilibrium yield at pH 6.0 and $30^{\circ}C$ was 8% higher than that at pH 7.0 and $40^{\circ}C$, although the rate was much slower. This result suggested that the affinity between the enzyme and the substrate rather than the overall rate was a more important factor affecting the equilibrium yield, when the peptide synthesis was carried out in a product-precipitation system.