A lactic acid bacterium showing antimicrobial activity against fish pathogen was isolated from gastrointestinal tract of flounder for the purpose of use as an aquaculture probiotics. From the analysis of morphological and physiological characteristics, the isolated strain was named as Lactococcus sp. HM58. Antimicrobial substance (AMS) from Lactococcus sp. HM58 showed strong growth inhibitory activity against Streptococcus sp., which is a fish pathogenic bacterium. AMS was presumed a proteinaceous compound with stability in heat and wide pH range from 2 to 10. It was started to produce in exponential growth phase and was not produced any more in stationary phase. It showed comparatively broad antimicrobial spectrum against most of gram positive bacteria used for this study. About $84\%$ of Lactococcus sp. HM58 was able to survive in the artificial gastric juice though it was low to the extent in the artificial bile juice. In the sensitivity test for various antibiotics, this strain was highly sensitive for doxycycline, erythromycin, amoxicillin clavu1anic acid and ampicillin.
Lactococcus sp. 1112-1 균주가 생산하는 bacteriocin을 정제하고 특성을 조사하였다. CM-sephadex ion exchange column chromatography, Sephadex G-50 gel filtration, SDS-PAGE를 행함으로서 수율 16.2 정제도 123배의 단일물질을 얻었다. 이 물질은 열에 비교적 안정하여 $60^{\circ}C$에서 60분간 열처리 할 때 38의 잔존활성을 유지하였으며 알카리쪽에서는 비교적 불안정하여 pH 8.0에서 48시간 처리시 77의 활성을 소실하였다. 이 물질은 26개의 아미노산 잔기를 이루고 있었다.
A lactic acid bacterium LAB3113, isolated from traditionally fermented Kimchi was found to produce bacteriocin whose activity was very specific toward lactobacilli and not effective against any other bacteria. Lactobacilli affected by the inhibitory substance included Lactobacillus delbrueckii-lactis, L. johnsonii, L. gsseri, and L. curvatus. Based upon biochemical and physiological characteristics, LAB3113 was classified as Lactococcus lactis, and its bacteriocin was named as lactococcin K3113. Lactococcus lactis. LAB3113 produced bacteriocin at th early stage of growth and the concentration of the bacteriocin did not decrease even after alt stationalry phase. Optimal temperature of bacteriocin production was $25^{\circ}C$ at the initial pH 7.0. Partially purified lactococcin K3113 was completely inactivated by protease, but not affected by lipase, lysozyme and RNase. The bacteriocin was very heat-stable even after autoclaving for 20 min. It was also stable in pH changes, an was not affected by th presence of solvents. lacotococcin K3113 appeared to act in bactericidal mode against L. delbrueckii-lactis ATCC4797. Molecular weight of lactococcin K3113 was calibrated as 10,500 dal by SDS-PAGE an activity staining. Lactococcus lactis LAB3113 had four residential plasmids of 3.7kb, 11.2kb, 15.5kb, and 48kh in molecular sizes. Plasmid profile analysis of mutant strain revealed that 15.5 kb plasmid was re-sponsible for the production of lactococcin K3113 and its immunity to the bacteriocin.
젓갈에서 분리된 Lactococcus lactis SA72균주로부터 유용 박테리오신인 lacticin SA72의 생산을 최적화하기 위해 배양용 배지 및 배양조건을 검토하였다. 유산균의 대표적인 배양 배지인 BHI, MRS, Ml7배지에 대해서 검토한 결과, 이중 MRS배지가 최적 배지로 결정되었다. 이 MRS배지에 0.5% glucose를 첨가한 경우, 더 높은 활성을 얻을 수 있었다. pH의 영향을 검토하였을 때는, 초기 pH에서는 pH 7이었고, 발효조에서의 배양기간 동안 pH 6으로 조절할 때가 높은 활성을 보였다. 배양온도는 $32^{\circ}C$로 유지할 때가 활성이 우수하였다. 회분식 배양에서는 최대 3,200AU/m1을 얻을 수 있었으며, 유가식 배양으로 10g/1 glucose를 주기적으로 공급하였을 때 , 약 6,400 AU/ml로 가장 높은 활성을 얻을 수 있었다.
Park, Eun-Min;Kim, Young-Hwa;Park, So-Jin;Kim, Yun-Im;Ha, Yu-Mi;Kim, Sung-Koo
생명과학회지
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제14권4호
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pp.683-688
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2004
API test를 통해서 김치에서 분리한 유산균이 Lactococcus lactis subsp. lactis의 한 종임 을 확인하고 Lactococcus lactis subsp. lactis YH-10이라 명명하고, 생산된 박테리오신을 lacticin YH-10으로 명명하였다. Lactococcus lactis subsp. lactis YH-10을 $25^{\circ}C$, 3$0^{\circ}C$와 37$^{\circ}C$에서 배양한 결과 $25^{\circ}C$에서 박테리오신을 생성하였다. Lacticin YH-10은 여러 가지 단백질 분해효소에 의해 항균활성을 소실하였으므로, 단백질로된 박테리오신임을 확인하였다. 또한 $\alpha$-amylase, $\beta$-amylase, glucoamylase의 처리에도 활성을 일부 소실하였으므로 박테리오신의 분류 중 classIV에 속함을 알 수 있었다 Ammonium sulfate정제한 후 SDS-PAGE를 통해 박테리오신의 분자량이 대략 14kDa임이 확인되었다. Lacticin YH-10은 단백질계 물질로서 인체 내에서 분해가 가능하기 때문에 일반 화학 보존제 보다 인체에 안정함을 알 수 있다. Lacticin YH-10은 낮은 pH와 높은 온도에서 항균활성을 가지고 있기 때문에 식품보존제로서 이용할 수 있다.
Lactococcus lactis subsp. cremoris FC는 카스피해 요구르트의 명칭으로 강한 점성을 가지는 것을 특징으로 하는 코카커스 지방 유래의 발효유로부터 분리된 균주로 있다. 본 연구는 Lc. lactis subsp. cremoris FC의 생장에 대한 lactoferrin group(native-lactoferrin, apo-lactoferrin, 그리고 holo-lactoferrin)과 transferrin (apo-transferrin과 holo-transferrin)의 첨가가 생장에 미치는 영향을 알아보기 위하여 수행하였다. Lc. lactis subsp. cremoris FC의 생장에 lactoferrin과 transferrin의 첨가효과는 0.5 또는 1 mg/mL의 농도로 첨가하는 것이 생장 촉진에 좋은 효과를 나타내는 것으로 조사되었다.
The ppage resistance mechanism of Lactococcus lactis subsp. cremoris ATCC 11602-A1 was investigated. When parent and A1 were incubated at 30 and 40$^{\circ}C$, A1 grew well and multiplication of phage(MOI=1)on A1 slightly occurred at 40$^{\circ}C$ in contrast with parent. There was a great difference of proteolytic activity between parent and A1, irrespective of the temperature. As a result of ADS treatment oon culture broth, survival rate of A1 was 27% at the lethal concentration of parent and adsorption rate of phage was increased to 95~97%, which was considered to come from the exposure of phage receptor site masked by an unknown component. These results suggest that acridine orange (AO) treatment leads to the modification of cell wall, conferring resistance to high temperature and lytic phage. No change in plasmid profiles of A1 at 30 and 40$^{\circ}C$ were found, which suggests that plasmid is not relative to temperature-resistance of A1.
The characteristics of the bacteriophage resistant Lactococcus lactis subsp. cremoris ATCC 11602-A1, the phage-resistant mutant of Lactococcus lactis subsp. cremoris ATCC 11602, was examined. Electron microscopic study of phage adsorption to A1 revealed that after 10 min. incubation of the host-phage mixture, A1 did not show phage adsorption, and after 60 min. did not show a real burst and the release of new phage particles which could be detected in the mixture of its parent strain and phage. However, the phage adsorption rate of A1 after SDS treatment increased to 98%. Moreover, when the cell walls from A1 and parent strain, and the polysaccharide(PS) and peptidoglycan(PG) of their cell wall were mixed with phage and incubated for 15 min., PS and PG from A1 did not bind phage, but only SD-treated cell wall bound phage, and the cell wall and PS of parent strain bound phage. Both A1 and parent strain treated with 0.2 N HCl-and 5% TCA(100$$C) did not bind phage. The results suggest that the phage receptor is still present in the cell wall of the A1, but a cell wall constituent hydrolyzed by SDS blocks phage adsorption by masking the phage receptor. It also suggests that the phage receptor of parent strain is associated with PS of the cell wall.
치즈숙성과정 중에서 Lactococcus lactis subsp. cremoris KH (lac$^{+}$ prt$^{+}$ ) and KHA (lac$^{-}$ prt$^{-}$ )의 혼합균에 의하여 일어나는 반응을 연구하였다. 혼합균의 성장 특징은 한쪽 균의 도움에 의하여 같이 성장하는 특징을 나타내었으며, 이 혼합균의 단백질분해효소의 양은 충분히 적었다. 이 결과로부터 치즈숙성과정 중에 홈합균의 균밀도가 높게 유지되더라도, 이 혼합균에 의하여 생성되는 쓴 맛의 생성량은 큰 문제가 되지 않는다는 결론을 얻을 수 있다. 그러므로, 치즈 숙성 과정을 촉진시키는데 있어서 KHA1의 혼합균은 좋은 치즈스타터균의 하나라고 할 수 있다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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