• 제목/요약/키워드: Lactobacillus acidophilus GP4A

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Lactobacillus acidophilus GP4A가 생산하는 박테리오신의 특성 및 정제 (Characteristics and Purification of Bacteriocin Produced by Lactobacillus acidophilus GP4A)

  • 한경식;주관석;김세헌
    • Journal of Dairy Science and Biotechnology
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    • 제17권1호
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    • pp.1-10
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    • 1999
  • 돼지의 장에서 분리된 Lαb. acidophilus GP4A가 생산하는 박테리오신은 typsin과 pepsin에 민감한 단백질성 물질이며 조사되어진 총 17종의균주들 중 Lactobacillus, Acinetobacter, Bacillus, Klebsiella, Streptococcus, Staphylococcus, Yersinia 속 등에 대하여 항균작용을 나타내었다. 또한 넓은 pH 조건에서도 안정하였으며 $65^{\circ}C$에서 20분가열시에는 어떠한 활성의 변화도 보이지 않았고 특히 $121^{\circ}C$에서 60분 가열시에도 완전하게 활성이 소실되지 않았다. 최대 활성의 박테리오신을 생산하기 위하여 적정 배양온도와 배지 pH를 조사한 결과 $37^{\circ}C$$40^{\circ}C$에서 그리고 MRS 배지 pH가 6.5${\sim}$7.5 사이 인 경우, 가장 높은 활성의 박테리오신이 생산되었다. 또한 Lab. delbrueckiisubsp. lactis 4797이 접종된 배지에 접종 초기와 2시간 후에 5% 농도로 cell free spent broth를 첨가시 18시간까지 성장을 억제할 수 있었으며$2{\times}10^8$ CFU/ml로 지시균이 접종된 배지에 5%와 10%로 첨가시에는 4시간 후 지시균의 생균수가 각각 약 10배 및 100배 정도 감소됨을 알 수 있었다. 그리고, 박테리오신은 cell free spent broth에서 냉장온도에 저장시 약 30일까지 활성이 유지 되었으며 (p<0.05) ammonium sulfate를 50%농도로 처리하고 침전물을 회수하여 Octyl sepharose CL-4B column chromatography를 실시한 결과 21.7%의 활성 회수율과 13.6배의 정제도를 보여주었다.

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Lactobacillus acidophilus GP4A 박테리오신의 정제, Bacteriolytic 작용 및 생산 관련 Plasmid의 선별 (Purification, Bacteriolytic Action and Plasmid Isolation of Acidocin 4A Produced by Lactobacillus acidophilus GP4A)

  • 한경식;전우민;김영훈;김세헌
    • Journal of Dairy Science and Biotechnology
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    • 제21권2호
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    • pp.114-119
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    • 2003
  • Lactobacillus acidophilus CP4A 균주가 생산하는 acidocin 4A를 정제하고자 ammonium sulphate 침전법 , Octyl-sepharose CL-4B column chromatography, $C_{18}$ Sep-Pak cartridge, $C_{18}$ RP HPLC, HPLC gel filtration을 실시하였고 tricine SDS-PAGE를 통해 약 4.1 kDa의 박테리오신임을 확인하였다. Acidocin 4A의 항균작용 기작을 L. delbrueckii subsp. lactis ATCC 4797을 대상으로 TEM을 이용해 관찰한 결과 세포벽이 해리되고 세포벽사이로 세포내용물이 용출되어 궁극적으로 cell lysis가 일어나는 bacteriolytic 현상을 확인하였다. 또한, acidocin 4A의 생산에 관련된 유전자의 존재 위치를 파악하고자 EtBr을 이용한 curing방법을 실시하였으며 그 결과 약 20 kb 크기의 plasmid에 acidocin 4A 생산과 자체 면역에 관련된 유전자가 존재함을 알 수 있었다.

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Characterization and Purification of Acidocin 1B, a Bacteriocin Produced by Lactobacillus acidophilus GP1B

  • Han, Kyoung-Sik;Kim, Young-Hoon;Kim, Sae-Hun;Oh, Se-Jong
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제17권5호
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    • pp.774-783
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    • 2007
  • In the present study, acidocin 1B, a bacteriocin produced by Lactobacillus acidophilus GP 1B, exhibited profound inhibitory activity against a variety of LAB and pathogens, including Gram-negative bacteria, and its mode of action was to destabilize the cell wall, thereby resulting in bactericidal lysis. Acidocin 1B was found to be heat stable, because it lost no activity when it was heated up to $95^{\circ}C$ for 60 min. It retained approximately 67% of the initial activity after storage for 30 days at $4^{\circ}C$, and 50% of its initial activity after 30 days at $25^{\circ}C$ and $37^{\circ}C$. The molecular mass of acidocin 1B was estimated to be 4,214.65 Da by mass spectrometry. Plasmid curing results indicated that a plasmid, designated as pLA1B, seemed to be responsible for both acidocin 1B production and host immunity, and that the pLA1B could be transformed into competent cells of L. acidophilus ATCC 43121 by electroporation. Our findings indicate that the acidocin 1B and its producer strain may have potential value as a biopreservative in food systems.

Comparison of Acid and Bile Tolerances, Cholesterol Assimilation, and CLA Production in Probiotic Lactobacillus acidophilus Strains

  • Oh, Se-Jong;Chai, Chang-Hun;Kim, Sae-Hun;Kim, Young-Jun;Kim, Hyung-S.;Worobo, Randy W.
    • 한국축산식품학회지
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    • 제32권4호
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    • pp.409-413
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    • 2012
  • This study aimed to compare the probiotic characteristics of twelve strains of Lactobacillus acidophilus including cholesterol assimilation and conjugated linoleic acid (CLA) production. Cholesterol assimilation exhibited some variation among L. acidophilus strains, which could be classified into three groups based on their assimilation levels (p<0.05). The high cholesterol assimilation group exhibited a significantly higher tolerance to 0.3 and 0.5% bile acid than the low cholesterol assimilation group (p<0.05). Cholesterol assimilation showed positive correlation with 0.5% bile tolerance, and a negative correlation with acid tolerance (p<0.01). Glycocholate deconjugation activity showed no relationship with cholesterol assimilation, whereas taurocholate deconjugation activity was shown to have negative correlation with cholesterol assimilation (p<0.05). CLA production by L. acidophilus strains exhibited a wide variation, ranging from 2.69 to 5.04 mg/g fat. CLA production of L. acidophilus GP1B was the highest among the tested strains, but there was no evidence for differences in CLA production in strain specificity. Based on these results, the cholesterol assimilation of L. acidophilus strains may not be related to deconjugation activity, but may in-fact be attributed to their bile-tolerance.

Lactobacillus acidophilus RMK567의 동결건조 컬쳐로 제조한 요구르트에서 GABA 생성력 (GABA Productivity in Yoghurt Fermented by Freeze Dried Culture Preparations of Lactobacillus acidophilus RMK567)

  • 임상동;유성호;양해동;김상기;박승용
    • 한국축산식품학회지
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    • 제29권4호
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    • pp.437-444
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    • 2009
  • GABA 생성 젖산균으로 선발한 Lactobacillus acidophilus RMK567 균주를 멸균한 50 L의 MRS broth가 들어 있는 fermenter에 접종하여 40oC의 발효온도에서 24시간 배양 하였다. L. acidophilus RMK567 생균수는 $10.04{\pm}0.13$ Log CFU/mL이었으며, 이때 5.16시간의 유도기(L)를 거쳐 2.203시간의 세대시간(g)으로 증식하였으며, 생장률상수(k)는 0.454세대/h 이었다. 50 L의 MRS 배양액으로부터 회수한 cell paste의 총 중량은 487 g, 수분함량은 40.5%이었으며, 생균수는 12.48 Log CFU/g 이었다. Cell paste에 glycerol, glucose 및 polydextrose 등의 동결보호제를 첨가하여 $-45^{\circ}C$에서 deep frozen하고 84 mtorr의 진공 하에서 3시간 동결건조하여 총 408 g의 FD cell powder를 생산하였다. FD cell powder에 Streptococcus thermophilus를 혼합한 FD starter cultures의 수분함량은 4.25%, 3.90%, 및 4.08%이었으며, 생균수는 각각 12.42(FDA-GY), 12.60(FDB-GG)과 12.91(FDC-GP) Log CFU/g이었다. 모든 FD starter cultures는 $-18^{\circ}C$ 저장 초기부터 급속히 사멸하여 3.24% 이하의 생존률을 보였다. 각 동결보호제 처리구 간의 생균수 차이는 유의성을 보이지 않았으나, 저장기간에 따른 유의성은 p<0.01 수준에서 관찰되었다. 원유를 기초로 하는 요구르트 조제액에 MSG의 농도를 0.02%, 0.04% 및 0.05%을 첨가하고, FD starter culture로 배양한 요구르트의 GABA 함량은 각각 $155.16{\pm}8.53$ ppm, $243.82{\pm}4.27$ ppm 및 $198.64{\pm}23.46$ ppm 이었다. 이 결과는 L. acidophilus RMK567의 FD starter culture가 동결건조 공정에 의하여 GABA 생성력이 감소하지 않았으며, GABA 함량이 높은 요구르트 제조에 유용하다는 사실을 보여주는 것이었다.