• Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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• v.25 no.1
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• pp.150-156
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• 1996

유산균의 균주개량방법의 일환으로 photoplast fu-sion 기법과 electrofusion법을 이용하여 protease 활성, lipase 활성, 내열성, 내산성 등이 우수한 L. bulgaricus와 bacteriocin을 생산하는 L. acidophilus 간의 융합시켜 얻은 융합주들의 생리학적 성질을 검토하였다. 산 생성능, 내열성, 내산성 protease, lipase 활성 등 L. bulgaricus가 L. acidophilus보다 우수하였다. L. bulgaricus는 lactose와 sorbos를 이용하였으나. mal-tose 와 dorbitol을 이용하지 못하는 반면 , L. acidophilus는 matose를 이용하고 lactose 와 sorbose를 이용하지 못하였다. 융합주 가운데서는 367810번이 모균주의 발효능 특성을 함께 지님으로서 재조합체임을 확인 할 수 있었으며, sorbitol의 경우 모균주에서는 발효능이 전혀 나타나지 않았음에도 불구하고 융합주 4, 7번이 발효능을 나타내어 융합과정에서 새로운 형질을 획득하기도 한다는 사실을 알 수 있었다. Lactase 활성은 모균주 모두 높은 $\beta-galactosidase$ 활성을 보였으나, $phospho-\beta-galactosidase$ 활성은 거의 없었으며 융합주들도 다소 차이는 있었지만 모균주와 유사한 효소활성을 나타내었다. 발효에 있어서 key enzyme으로 작용하는 protease. lipase 등의 효소활성도 모균주의 활성보다 우수한 융합주도 존재하였다.

• Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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• v.25 no.1
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• pp.143-149
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• 1996

균주개량 방법의 일환으로 electrofusion 법을 이용하여 protease 화성, lipase 활성, 내열성, 내산성 등이 우수한 L. bulgaricus와 bacteriocin을 생산하는 L. acidophilus 간의 융합조건을 검토하였다. Electrofusion에 의해 생성된 융합주는 식별하기 위해 streptomycin(2mg/ml)과 lincomycin(5$\mu\textrm{g}$/ml)에 내성을 나타내는 L. bulgaricus 변이주이와 kanamucin (600$\mu\textrm{g}$/ml)에 내성을 나타내는 L. acidophilus 88 변이주를 분리하였다. Electrofusion을 500V/cm, 100mses(49phms, 2300 capacotance)에서 수행했을 때 가장 융합이 잘 일어났으며 전기장의 세시와 시간이 증가할수록 융합요율이 현저히 감소하였다. 2가 양이온은 대체적으로 융합효율을 감속시키는 경향을 나타내었으나 1mM MgCl$_2$에서 융합 효율이 약간 증가하였다. PEG 400을 elec-trogusion buffer에 30%되도록 첨가했을 때, 가장 양호한 융합효율을 나타내었으며 그 이상에서는 오히려 융합 효율이 감소하였다. Electrofusion법과 PEG 매개에 의한 융합법의 융합 효율을 비교한 결과, 거의 비슷한 융합 효율을 나타내었으나 electrofusion 법과 PEG매개에 의한 융합법을 혼합하였을 때 가장 양호한 융합 효율을 나타내었다.