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Properties of β-Galactosidase from Lactobacillus zymae GU240, an Isolate from Kimchi, and Its Gene Cloning

  • Le, Huong Giang;Yao, Zhuang;Kim, Jeong A;Lee, Se Jin;Meng, Yu;Park, Ji Yeong;Kim, Jeong Hwan
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제48권3호
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    • pp.287-295
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    • 2020
  • Lactobacillus zymae GU240 was previously isolated from Kimchi, a Korean fermented vegetable, as a strong GABA producer. The strain showed β-galactosidase (β-Gal) activity on MRS agar plates with X-gal. When growth and β-Gal activities of GU240 were measured using MRS (glucose, 2%, w/v) and MRSL (lactose, 2%, w/v) broths, cells were found to grow slowly in MRSL, and the β-Gal activity (36 units at 4 h) was lower than that of cells grown in MRS (94 units at 16 h). The highest OD600 value of the culture in MRS was 1.6 at 24 h at 37℃, whereas that of the culture in MRSL was 0.6 at 16 h. β-Gal activity of the culture in MRS reached the maximum (95.6 u/ml) at 16 h, decreased thereafter, and was not detected at 48 h. β-Gal activity for culture in MRSL reached its highest (36 u/ml) at 4 h and decreased gradually, but some activity (11.05 u/ml) still remained at 72 h. The structural gene encoding β-Gal in L. zymae GU240 was cloned as a 3.1 kb fragment, and DNA sequencing confirmed the presence of complete lacLM genes. lacLM genes from L. zymae GU240 showed 98-99% homologies in nucleotide sequences with other lacLM genes from L. brevis. Reverse transcription (RT)-PCR confirmed the operon structure of lacLM. The results indicated that L. zymae GU240 might be in the process of losing the ability to grow rapidly on lactose-containing medium, such as milk, due to adaptations to plant environments, including kimchi.

Efficient (3R)-Acetoin Production from meso-2,3-Butanediol Using a New Whole-Cell Biocatalyst with Co-Expression of meso-2,3-Butanediol Dehydrogenase, NADH Oxidase, and Vitreoscilla Hemoglobin

  • Guo, Zewang;Zhao, Xihua;He, Yuanzhi;Yang, Tianxing;Gao, Huifang;Li, Ganxin;Chen, Feixue;Sun, Meijing;Lee, Jung-Kul;Zhang, Liaoyuan
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제27권1호
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    • pp.92-100
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    • 2017
  • Acetoin (AC) is a volatile platform compound with various potential industrial applications. AC contains two stereoisomeric forms: (3S)-AC and (3R)-AC. Optically pure AC is an important potential intermediate and widely used as a precursor to synthesize novel optically active materials. In this study, chiral (3R)-AC production from meso-2,3-butanediol (meso-2,3-BD) was obtained using recombinant Escherichia coli cells co-expressing meso-2,3-butanediol dehydrogenase (meso-2,3-BDH), NADH oxidase (NOX), and hemoglobin protein (VHB) from Serratia sp. T241, Lactobacillus brevis, and Vitreoscilla, respectively. The new biocatalyst of E. coli/pET-mbdh-nox-vgb was developed and the bioconversion conditions were optimized. Under the optimal conditions, 86.74 g/l of (3R)-AC with the productivity of 3.61 g/l/h and the stereoisomeric purity of 97.89% was achieved from 93.73 g/l meso-2,3-BD using the whole-cell biocatalyst. The yield and productivity were new records for (3R)-AC production. The results exhibit the industrial potential for (3R)-AC production via whole-cell biocatalysis.

유산균 발효에 따른 볶은 아마씨 추출물의 폴리페놀, 플라보노이드 함량 및 항산화 활성 (Total Polyphenol Contents, Flavonoid Contents, and Antioxidant Activity of Roasted-flaxseed Extracts Based on Lactic-acid Bacteria Fermentation)

  • 박예은;김병혁;윤여초;김중규;이준형;권기석;황학수;이중복
    • 생명과학회지
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    • 제28권5호
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    • pp.547-554
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    • 2018
  • 아마(Linum usitatissimum L.)의 종자인 아마씨(Flaxseed)는 아마인(仁)이라고도 불리며 오메가-3 지방산, 식물성 에스트로겐, 알파-리놀렌산 및 식이섬유가 풍부하게 함유되어 있다. 또한 콜레스테롤 저해, 혈액응고 저해, 종양의 성장 억제 등 다양한 효과에 대한 다양한 연구가 보고 되어있다. 본 연구는 유산균을 이용해 발효한 아마씨의 기능성 성분을 조사하기 위해 가열 처리된(볶은) 아마씨에 4종의 유산균(NFFS ; Non-fermented flaxseed, BHN-LAB31, 126 ; Lactobacillus brevis, BHN-LAB41 ; Pediococcus pentosaceus, KCTC3109 ; Lactobacillus casei)을 접종하여 $37^{\circ}C$에서 7일 동안 발효를 진행하였고, 발효 후 70% 에탄올을 통해 추출하여 각 발효 유산균에 따른 추출물의 항산화 활성을 측정하였다. 그 결과, 발효하지 않은 아마씨(NFFS)에 비해 유산균 발효 아마씨에서 전반적으로 총 폴리페놀 함량 약 1.5~8배, 총 플라보노이드 함량 약 1.2배 증가된 것을 확인하였다. DPPH radical 소거 활성능은 100 ppm 농도에서 비 발효 아마씨 대비 5.6배, SOD 유사활성능은 2.3배 증가하는 것을 확인하였다. 이러한 연구결과를 종합하여 볼 때 유산균을 이용한 아마씨의 발효가 가능하며, 유산균 발효가 아마씨의 항산화능 증대에 효과적인 것을 확인하였으며 본 연구를 기반으로 한 기능성 식품 또는 화장품 소재로의 개발 및 응용이 가능할 것으로 기대된다.

유산균 발효를 이용한 자작나무 수액의 저장성 및 기호성 증진 기술 (Storage-life and Palatability Extension of Betula platyphylla Sap Using Lactic Acid Bacteria Fermentation)

  • 김종호;이운종;조윤원;김광엽
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제38권6호
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    • pp.787-794
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    • 2009
  • 자작나무 수액을 이용한 유산균 발효에 적합한 균주의 선발 실험을 통하여 선발된 Lactobacillus균을 이용하여 발효시킨 수액을 실온에서 2주일 이상의 장시간 동안 저장한 결과 $10^{7}cfu/mL$ 이상의 유산균수를 유지하며, 유기산의 생성으로 pH 4.0 이하를 유지하였고 일반세균은 검출되지 않았다. 또, 여과하여 제균을 실시할 시의 미네랄성분의 변화와 유산균에 의한 미네랄의 변화를 분석한 결과 손실량이 극히적은 것으로 나왔다. 이것으로 보아 유산균 발효에 의한 저장성 증진의 효능이 입증되었다.

항균활성 천연물질을 이용한 반추위 메탄저감용 친환경 첨가제 개발 (Development of an Environmental Friend Additive Using Antibacterial Natural Product for Reducing Enteric Rumen Methane Emission)

  • 이아름;양진호;조상범;나종삼;심관섭;김영훈;배귀석;장문백;최빛나;신수진;최낙진
    • 한국유기농업학회지
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    • 제22권3호
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    • pp.491-502
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    • 2014
  • 본 연구는 천연물질에서 유래한 반추위 메탄저감용 친환경 첨가제 개발을 위해 각기 다른 종균을 이용하여 발효한 세신 추출물의 항균활성, 항산화활성 및 in vitro 반추위 발효시험을 체계적으로 실시하였다. 접종된 균주들의 성장효율을 알아보기 위해 실시한 생균수측정 결과 L. curvatus NJ40 균주에서 유의적으로 높은 균주성장을 나타냈다(p<0.05). 항균활성측정 결과는 대조구 대비 L. curvatus NJ40 및 L. plantarum NJ45 균주와 발효된 세신 추출물이 병원균에 대한 항균효과를 나타내는 것으로 조사되었다. In vitro 반추위 발효실험에 세신 및 발효 세신 추출물을 적용한 결과, 휘발성 지방산 생성량 대비 반추위 메탄 저감효과가 나타났다. 특히 반추위 미생물 활력 및 사료이용 효율을 대표할 수 있는 휘발성 지방산 생성효율에 대한 부정적 효과 없이, 오히려 휘발성지방산 생성효율을 향상시키면서 반추위 메탄 저감효과를 가져올 수 있는 것으로 나타났다.

Antimutagenic Activities of Cell Wall and Cytosol Fractions of Lactic Acid Bacteria Isolated from Kimchi

  • Park, Kun-Young;Kim, So-Hee;Son, Tae-Jin
    • Preventive Nutrition and Food Science
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    • 제3권4호
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    • pp.329-333
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    • 1998
  • Cell wall (lactic acid bacteria-sonicated precipitate ; LAB-SP) and cytosoll(lactic acid bacteria-sonicated supernatant ; LAB-SS) fractions were prepared from kimchi fermenting lactic acid bacteria such as Leuconostoc mesenteroides, Lactobacillus brevis, Lactobacillus fermentum , Lactobacillus plantarum and Pediococcus acidilactici, with Lactobacillus acidophillus isolated from yogurt. Using the Ames mutagenicity test and SOS chormotest system, the antimutagenic acitivity of those cell fractions was studied . One hundered eighty $\mu$l of LAB-SP from lactic acid bacteria isolated from kimchi, excepting Pediococcus acidilactici, supressed the mutagenicity of 4-nitroquinoline-1-oxide(4-NQO) in Ames mutagenicity test and SOS chromotes system , by above 90% and 60% , respectively. LAB-SP from lactic acid bacteria also inhibited the mutagenicity mediated by 3-amino-1-methyl-5H-pyrido [4,3-b]indole (Trp-P-2). Lactobacillus fermentum, Lactobacillus plantarum, and Lactobacillus acidphillus had higher antimutagenicity against Trp-P-2). Lactobacillus fermentum , Lactobacillus plantarum , and Lactobacillus acidphillus had higher antimutagenicity against Trp-P-2 than the other lactic acid bacteria. However, LAB-SS of lactic acid bacteria did not show any mutagenic activity against 4-NQO in Ames mutagenicity test and SOS chromotest systems. On the mutagenicity of MEIQ and Trp-P-2 , LAB-SS of lactic acid bacteria from kimchi or dairy products exhibited a weaker inhibitory effect than LAB-SP of those bacteria. These results represent that, whether the lactic acid bacteria from kimchi are viable or nonviable, antimutagenic acitivity was still effective. We suggest that the strong, antimutaganic activity of lactic acid bacteria might be found in the cell wall fraction , rather than in the cytosol fraction.

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Effects of Rumen pH on Degradation Kinetics and Fermentation Indices of Corn Silage Ensiled with Antifungal and Carboxylesterase Producing Inoculants

  • Chang, Hong Hee;Paradhipta, Dimas Hand Vidya;Lee, Seong Shin;Lee, Hyuk Jun;Joo, Young Ho;Min, Hyeong Gyu;Kim, Sam Churl
    • 한국초지조사료학회지
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    • 제40권3호
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    • pp.131-137
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    • 2020
  • The present study investigated effects of antifungal and carboxylesterase inoculant on rumen fermentation with different rumen pH. Corn silage was treated without inoculant (CON) and with a mixed Lactobacillus brevis 5M2 and L. buchneri 6M1 (MIX). Rumen fluid was collected from two cannulated Hanwoo heifers before morning feeding (high rumen pH at 6.70) and 3 h after feeding (low rumen pH at 6.20). Dried corn silage was incubated in the rumen buffer (rumen fluid + anaerobic culture medium at 1:2 ratio) for 48 h at 39℃. Eight replications for each treatment were used along with two blanks. Both in a high and a low rumen pH, MIX silages presented higher (p<0.05) the immediately degradable fraction, the potentially degradable fraction, total degradable fraction, and total volatile fatty acid (VFA) than those of CON silages. Incubated corn silages in a low rumen pH presented lower (p<0.05) total degradable fraction, ammonia-N, total VFA (p=0.061), and other VFA profiles except acetate and propionate, than those in a high rumen pH. The present study concluded that application of antifungal and carboxylesterase inoculant on corn silage could improve degradation kinetics and fermentation indices in the rumen with high and low pH conditions.

사람에 있어 족소음경근의 해부학적 고찰 (Anatomical Study on the Foot Soeum Meridian Muscle in Human)

  • 박경식
    • Korean Journal of Acupuncture
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    • 제29권2호
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    • pp.239-249
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    • 2012
  • 본 연구는 족소음경근의 구성요소에 대하여 문헌 해석과 인체의 층별 해부를 통하여 해부학적 관점에서 관찰해 보기 위하여 수행되었다. 그리하여 다음과 같은 결론을 얻을 수 있었다. 1. 본 연구 결과 족소음경근의 구성요소와 분석방법에 있어서 기존의 연구와 다소 차이를 보여준다. 2. 족소음경근의 경로와 병증 증상 등을 고려할 때 족소음경근은 근육, 근막, 인대, 그리고 관련 신경을 포함하는 포괄적 개념으로 보인다. 3. 족소음경근의 분포는 경락과 밀접한 관련성이 있으나 일치하지는 않는 것으로 보이며 특히 치골부위 이상의 부위에선 그러할 것으로 사료된다. 4. 이론적으로 MPS와 Anatomy train 같은 가설과는 약간의 차이가 있어 보이며 굳이 관련시켜 생각할 이유가 없다고 생각한다.

약용식물 추출물에 대한 항미생물 활성 검색과 폴리페놀 함량 (Antimicrobial Effect of Methanol Extracts from Some Medicinal Herbs and the Content of Phenolic Compounds)

  • 문지숙;김선재;박윤미;황인식;김의형;박정욱;박인배;김상욱;강성국
    • 한국식품저장유통학회지
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    • 제11권2호
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    • pp.207-213
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    • 2004
  • 다양한 기능성을 갖는 생약재 32종을 대상으로 천연보존료 개발의 일환으로 메탄올로 추출한 항균활성 물질을 몇 종의 병원균과 식중독균, 식품과 관련이 있는 세균, 젖산균 및 효모 등 12종의 균주 B. subtilis, M. luteus, Sta aureus, Sta. epidermidis, Strep. mutans, E. coli, Pse. aeruginosa, Sal. typhimurium, V. vulnificus, Lac. brevis, Leu. mesenteroides, Sacch. cerevisiae에 대하여 항균활성을 검색하였으며, 항균력이 강한 생약재 추출물은 최소저해농도(MIC)를 측정하였다. 검색한 결과 계피, 목단, 적양, 정향, 팔각향 등의 메탄올 추출물은 12균주 중 세균에 대하여 항균활성이 강하였으나, 젖산균 및 효모에 대해서는 낮은 항균활성을 보였다. 최소저해농도는 B. subtilis에 대해 강한 증식억제효과를 보였고, Sta. epidermidis나 Pse. aeruginosa에 대해서도 거의 모든 추출물이 저해활성을 나타내었다. 하지만 항균활성 측정시 거의 저해가 없었던 Lue. mesenteroides도 대부분의 추출물에서 억제 효과를 나타내 항균성과는 약간 다른 결과를 보였다. 생약재 중 강한 항균력을 보인 녹차, 정향, 적양, 인진호 등은 폴리페놀 함량이 약 7 mg/g 이상으로 높아 이들 페놀성 물질들이 항균활성에 많은 영향을 준 것으로 사료된다. 따라서 여러 미생물에 의해 변패될 수 있는 식품에서 천연보존료로의 이용이 가능할 것으로 생각된다.

Physicochemical Properties and Intestinal Bacterial Growth-Promoting Effect of Cell-Wall Polysaccharides from Cucumber Peel

  • Jun, Hyun-Il;Song, Geun-Seoup;Lee, Young-Tack;Kim, Young-Soo
    • Food Science and Biotechnology
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    • 제14권3호
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    • pp.375-379
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    • 2005
  • Physicochemical properties, intestinal microbial growth, and inhibitory effects of alcohol-insoluble polysaccharide (AIP) extracted from cucumber peel were investigated. AIP was composed of 14.54% crude protein, 1.04% crude lipid, 13.74 % crude ash, 9.1% soluble dietary fiber, and 41.2% insoluble dietary fiber. AIP showed low bulk density (0.18 g/mL) and water-holding capacity (6.39 g/g), and high oil-holding capacity (3.96 g/g). Pectic substance fractions [water-soluble pectic substance (WSP), ethylenediaminetetraacetic acid-soluble pectic substance (ESP), and alkali-soluble pectic substances (ASP)] and hemicellulose fractions [1 M KOH-soluble hemicellulose (KHP1) and 4 M KOH-soluble hemicellulose (KHP4)] were obtained from sequential chemical fractionation of AIP. WSP showed higher total sugar contents than total uronic acid contents, whereas opposite results were observed in ESP and ASP. Molecular weight distributions of three pectic substance fractions were in order of ASP>ESP>WSP. Ion exchange chromatogram pattern of WSP was different from those of ESP and ASP. Major component of WSP was fraction eluted by 0.05 M ammonium acetate buffer, whereas that of ESP and ASP was fraction eluted by 0.2 M NaOH. WSP and ASP showed growth-promoting activities against Lactobacillus brevis, Bifidobacterium bifidum, and B. longum, whereas B. bifidum and B. longum for ESP. KHP1 and KHP4 fractions had significant growth-promoting activities against B. bifidum.