The polymerase chain reaction (PCR) amplification technique was used for comparison of Listeria monocytogenes serotypes. PCR primers for the fragment of invasion-associated protein (iap) gene were highly specific for all the serotypes of L. monocytogenes. Other Listeria spp., such as Listeria ivanovii and Listeria innocua were not produced the PCR fragments by above primer set. The nucleotide sequences of PCR products showed high homologies in comparison of all the isolated serotypes except unknown type II-2. The deduced amino acid sequences of the PCR products also showed similar to one another. The various region of the PCR products, called a Thr-Asn repeat region was presented. All of isolated L. monocytogenes serotypes possessed 16 to 20 Thr-Asn repeats.
Broiler meat production worldwide has been plagued by lethal food-poisoning bacteria diseases, including listeriosis. A fatality rate of 15.6% was recorded in human beings in the EU in 2015. During 2013, a total of 200 poultry farm samples, including litter, chicken breast, farm feed, and drinking water, were collected to generate baseline data for the characterization of the genus Listeria in broiler poultry farms. Listeria spp. were detected in a total of 95 (47.5%) poultry farm samples. The isolates of Listeria spp. included L. innocua (28.5%), L. ivanovii (12.5%), L. welshimeri (4.5%), and L. monocytogenes and L. seeligeri (1% each). Listeria spp. contamination rates were higher in farm feed (70%), followed by litter (52.5%), chicken breasts (42.2%), and drinking water (10%). Almost all Listeria spp. isolates were resistant to more than three classes of antibiotics (multidrug resistant). Besides this, we observed a significant resistance level to penicillin and fluoroquinolone drugs. However, lower resistance levels were recorded for broad-spectrum cephalosporins. The inlA, inlC, and inlJ virulence genes were detected in almost all of the L. monocytogenes isolates. Thus, food safety management approaches and interventions at all stages of the broiler rearing cycle were needed to control cross-contamination and the zoonotic potential of listeriosis.
This study was carried out to characterize the antilisterial substances produced by Leuconostoc sp. W65 and to evaluate the effects of pH, temperature, and time on inhibitory activity using response surface methodology. Leucocin W65, an antilisterial substance produced by Leuconostoc sp. W65, markedly inhibited the growth of Listeria monocytogenes, L. innocua, and L. ivanovii, whereas other pathogens including Gram-negative bacteria were not susceptible. The pH was the most effective factor with regard to bacteriocin activity, while temperature and time of heat treatment had no significant effect. Fifty percent of inhibitory activity remained after 22.8 min at pH 4.2 and $121^{\circ}C$. Leucocin W65 was purified by ammonium sulfate precipitation, hydrophobic interaction chromatography, and tricine-SDS-PAGE. Compositional analysis originally estimated the peptide to be 56 amino acids in length without asparagine, glutamine, and tryptophane. The sequence of partial N-terminal amino acid residues of purified bacteriocin was identified as follows: $NH_{2}-XGXAGVXPXGGQQPXVPLXYP$.
A strain named as HJ35 was isolated from the skin of sixty-five men and fourteen women for acne therapy, in order to find an effective antimicrobial agent against Propionibacterium acnes. Isolate HJ35 was identified as Enterococcus faecium based on 16 rDNA sequence and produced enterocin HJ35 having antimicrobial activities against most lactic acid bacteria, Enterococcus spp., Staphylococcus aureus, S. epidermidis, Clostridium perfringens, some bacilli, Micrococcus flavus, Listeria monocytogenes, L. ivanovii, Escherichia coli, Pseudomonas fluorescens and Propionibacterium acnes, in the modified well diffusion method. Especially, enterocin HJ35 showed a bactericidal activity against Propionibacterium acnes P1. The antimicrobial activity of enterocin HJ35 was disappeared completely with the use of protease XIV. But enterocin HJ35 activity is very stable at high temperature (up to $100^{\circ}C$ for 30 min), in wide range of pH (3.0${\~}$9.0), and by treatment with organic solvents. The apparent molecular mass of enterocin HJ35 was estimated to be approximately 4${\~}$4.5 kDa on detection of its bactericidal activity after SDS-PAGE. In batch fermentation of E. faecium HJ35, enterocin HJ35 was produced at the midlog growth phase, and its maximum production was obtained up to 2,300 AU/mL at the late stationary phase. By employing fed-batch fermentation, the enhanced production of enterocin HJ35 was achieved up to 12,800 AU/mL by feeding with 10 g/L glucose or 6 g/L lactate.
A bacteriocin producing lactic acid bacteria was isolated from ground beef and the strain was identified as Lactobacillus plantarum ssp. by use of API carbohydrate fermentation pattern and physiological tests. The bacteriocin produced by L. plantarum KU107 exhibited a good spectrum of activity against foodborne pathogens including Bacillus cereus, Escherichia coli, Listeria ivanovii, Listeria monocytogenes, Pseudomonas aeruginosa, Pseudomonas chlororaphis, Staphylococcus aureus, Staphylococcus intermedius, Salmonella typhimurium and Yersinia enterocolitica. The bacteriocin was active over a wide pH range and stable of heat treatment, and inactivated by treatment with proteases. A bacteriocin from L. plantarum KU107 was effetive in reducing S. aureus in tryptic soy broth. On the ground beef containing S. aureus was added with the crude bacteriocin, S. aureus was inhibited during storage period at 4$\^{C}$.
Recently, there has been a growing demand for natural preservatives because of increased consumer interest in health. In this study, we produced Lactobacillus rhamnosus cell-free supernatant (LCFS) and evaluated and compared its antimicrobial activity with existing natural preservatives against pathogenic microorganisms and in chicken breast meat contaminated with Escherichia coli and Staphylococcus aureus. Lactobacillus rhamnosus cell-free supernatant possessed 30 units of lysozyme activity and contained 18,835 mg/L of lactic acid, 2,051 mg/L of citric acid and 5,060 mg/L of acetic acid. Additionally, LCFS inhibited the growth of fourteen pathogenic bacteria, S. aureus, Bacillus cereus, Listeria monocytogenes, Vibrio parahaemolyticus, Listeria innocua, S. epidermidis, L. ivanovii, E. coli, Pseudomonas aeruginosa, Shigella sonnei, Shi. flexneri, Proteus vulgaris, Pseudomonas fluorescens, and Klebsiella pneumoniae. The antibacterial activity of LCFS was stronger than that of egg white lysozyme (EWL), Durafresh (DF) and grapefruit seed extract (GSE). Additionally, LCFS maintained its antimicrobial activity after heat treatment at $50^{\circ}C{\sim}95^{\circ}C$ and at pH values of 3~9. Moreover, LCFS inhibited the growth of E. coli and S. aureus in chicken breast meat. In conclusion, it is expected that LCFS, which contains both lysozyme and three organic acids, will be useful as a good natural preservative in the food industry.
Monitoring of Listeria monocytogenes, the causative agent of listeriosis, in food is inportant for public health. The Korean Food Standards Codex has adopted a 'zero-tolerance' policy for L. monocytogenes. The standard detection method of L. monocytogenes is based on enrichment. Thus, proper enrichment methods need to be instituted to ensure quality control of the detection procedures. In this study, the growth of L. monocytogenes and Listeria innocua as a mixed culture in Listeria enrichment broth (LEB) was monitored during artificial contamination of enrichment culture. We confirmed competitive growth or interspecies inhibitory activity of L. monocytogenes and L. innocua. Interspecies growth differences and the inhibitory activity of different inoculation and mixtures L. innocua against L. monocytogenes were examined. The concentration of L. monocytogenes must be 2.0 log CFU/mL or more than L. innocua to grow better than L. innocua. It is known that Listeria spp. and L. monocytogenes show growth difference during LEB, resulting in the risk of false-negative results. The inhibition of L. monocytogenes by L. innocua was always observed when present at lower concentrations. However, it was confirmed that L. innocua suppressed when L. monocytogenes was present at a higher concentration. Therefore if a mixture of Listeria spp. is present, detecting L. monocytogenes is difficult. Thus, a new enrichment broth to improve the detection rate of L. monocytogenes is needed.
The genus Listeria consists of six closely related species and forms three phylogenetic groups: L. monocytogenes-L. innocua, L. ivanovii-L. seeligeri-L. welshimeri, and L. grayi. In this report, we attempted to examine the evolutionary relationship in the L. monocytogenes-L. innocua group by probing the nucleotide sequences of 23S rRNA and 16S rRNA, and the gene clusters lmo0029-lmo0042, ascB-dapE, rplS-infC, and prs-ldh in L. monocytogenes serovars 1/2a, 4a, and 4b, and L. innocua. Additionally, we assessed the status of L. monocytogenes-specific inlA and inlB genes and 10 L. innocua-specific genes in these species/serovars, together with phenotypic characterization by using in vivo and in vitro procedures. The results indicate that L. monocytogenes serovar 4a strains are genetically similar to L. innocua in the lmo0035-lmo0042, ascB-dapE, and rplS-infC regions and also possess L. innocua-specific genes lin0372 and lin1073. Furthermore, both L. monocytogenes serovar 4a and L. innocua exhibit impaired intercellular spread ability and negligible pathogenicity in mouse model. On the other hand, despite resembling L. monocytogenes serovars 1/2a and 4b in having a nearly identical virulence gene cluster, and inlA and inlB genes, these serovar 4a strains differ from serovars 1/2a and 4b by harboring notably altered actA and plcB genes, displaying strong phospholipase activity and subdued in vivo and in vitro virulence. Thus, by possessing many genes common to L. monocytogenes serovars 1/2a and 4b, and sharing many similar gene deletions with L. innocua, L. monocytogenes serovar 4a represents a possible evolutionary intermediate between L. monocytogenes serovars 1/2a and 4b and L. innocua.
Kim, Jae-Hun;Park, Jin-Gyu;Song, Beom-Seok;Lee, Ju-Woon;Kim, Wang-Geun;Hwang, Young-Jeong;Byun, Myung-Woo
Food Science and Preservation
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v.14
no.5
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pp.481-486
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2007
This study was conducted to evaluate the combined effect of gamma irradiation and silk peptide on the radiosensitivity of bacteria and the storage stability of ready-to-eat hamburger patty. The $D_{10}$ values obtained for Escherichia coli, Listeria ivanovii, Salmonella typhimurium and Clostridium sporogenes by gamma irradiation were 0.25, 0.50, 0.55 and 1.35 kGy, respectively. The inactivation rate of S. typhimurium ($D_{10}=0.53kGy$) inoculated into hamburger patty with 5%(w/w) silk peptide was reduced 6% compared with the control $D_{10}=0.558kGy$). In acceleration storage at $30^{\circ}C$, microorganisms were not observed in samples irradiated with 7 kGy or 10 kGy during storage. However the irradiation at 5 kGy was insufficient to sterilize the contaminated microorganisms in hamburger patty regardless of the addition of silk peptide (5%). These results indicate that the combined treatment of gamma-irradiation and silk peptide admixture could be helpful to ensure storage stability of ready-to-eat hamburger patty, by controlling the preliminary microbial load.
Kim, Hae-Jung;Lee, Na-Kyoung;Cho, Sang-Moon;Kim, Kee-Tae;Paik, Hyun-Dong
Korean Journal of Food Science and Technology
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v.31
no.4
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pp.1035-1043
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1999
Bacteriocins are natural antimicrobial compounds produced by many microorganisms associated with foods, so that there is currently much interest in their use as food biopreservatives. Goal of this study was to partially evaluate lacticin NK24 as a food biopreservative by showing antimicrobial activity of L. lactis NK24 and lacticin NK24 against food-borne spoilage and pathogenic bacteria, respectively. Lactic acid bacteria NK24 isolated from jeot-gal, Korean fermented fish foods, was tentatively identified as Lactococcus lactis and showed broad spectrum of activity against all of spoilage and pathogenic bacteria tested by deferred method. Bacteriocin production in jar fermenter was detected at the mid-log growth phase, and reached the maximum at the early stationary phase, but decreased after the stationary phase. Lacticin NK24 was partially purified by 75% ammonium sulfate precipitation followed by subsequent dialysis. This partially purified lacticin NK24 showed antimicrobial activity against Enterococcus faecalis, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Clostridium perfringens, some bacilli, Listeria monocytogenes, Listeria ivanovii, Sphin-gomonas pausimobilis, Escherichia coli and Pseudomonas aeruginosa. Thus, lacticin NK24 examined in this study show promise as a biopreservative be-cause of their broad spectrum of activity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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