To characterize the polysaccharides which exist as soluble forms in fruit wines, crude polysaccharides were isolated from red, white, raspberry, wild grape, and pear wine, respectively. Among them, the crude polysaccharide (RW-0) in red wine showed the highest yield and considerable amounts of thiobarbituric acid (TBA)-positive materials. The pectic polysaccharide RW-2 was purified to homogeneity from RW-0 by subsequent size-exclusion chromatography using Sephadex G-75 and its structure was characterized. RW-2 consisted of 14 different monosaccharides which included rarely observed sugars in general polysaccharides, such as 2-O-methyl-fucose, 2-O-methyl-xylose, apiose (Api), 3-C-carboxy-5-deoxy-L-xylose (aceric acid, AceA), 3-deoxy-D-manno-2-octulosonic acid (Kdo), and 3-deoxy-D-lyxo-2-heptulosaric acid (Dha). Methylation analysis indicated that RW-2 comprised at least 20 different glycosyl linkages such as 3,4-linked fucose, 2,3,4-linked rhamnose, 3'-linked apiose, and 2,3,3'-linked apiose, being characteristic in rhamnogalacturonan II (RG-II). High performance size-exclusion chromatography indicated that RW-2 mainly comprised RG-II of higher molecular weight (12,000), and that the changes of molecular weight to apparent 7,000 under less than pH 2.0 were observed. These analyses indicated that the higher molecular weight polysaccharide in RW-2 was mainly present as a RG-II dimer.
토양에서 분리한 세포외 다당류 생산균주 PS-12는 형태학적, 생리학적, 화학적 분석에 의하여 Bacillus sp.에 속하는 균주로 동정되었으며, 분리균주 PS-12는 Bacillus sp. PS-12로 명명하였다. Bacillus sp. PS-127가 생산하는 세포외 다당류는 에탄올 침전, cetylpyridinium chloride (CPC) 침전과 gel permeation chromatography를 이용하여 정제하였으며, 정제된 다당류 PS-12의 당조성은 glucose, mannose, galactose와 fucose가 7:3.2:2:1의 몰비로 구성되어있었다. Bacillus sp. PS-12로부터 분리된 다당류 PS-12를 이용하여 면역증강효과를 확인하였다. TNF-${\alpha}$ 및 lL-6 측정은 RAW264.7 대식세포주를 사용하였으며 cytokine 정량을 위하여 ELISA kit를 이용하였다. RAW264.7 세포주에 대한 PS-12의 세포독성을 확인하기 위하여 세포독성이 10% 미만을 나타내는 농도인 2 ${\mu}g$/ml을 PS-12의 최대농도로 측정하였다. PS-12는 ${\mu}g$/ml에서 TNF-${\alpha}$를 정상세포보다 50배 이상 높은 수치로 생산하였다. 또한 lL-6의 생산을 농도 의존적으로 증가시켰다. 이러한 결과로부터 PS-127가 면역세포에 대해 세포독성을 거의 나타내지 않는 농도에서 대식세포로부터 TNF-${\alpha}$와 11-6의 cytokine 생산을 함으로써 면역증강효과를 나타낸다는 것을 확인하였다.
Lectin activities and chemical characteristics of Escherichia coli, Lactobacillus spp. and Bifidobacterium spp. originating from the porcine cecal mucosal layer were studied based on hemagglutination assay (HA) and hemagglutination inhibition assay (HIA). Although all the bacterial strains were able to agglutinate erythrocytes of porcine or rabbit origin, much higher HA titers were consistently observed for Lactobacillus spp. than for E. coli or for Bifidobacterium spp. A remarkable reduction in HA titers occurred by the treatment of E. coli and Lactobacillus spp. with protease or trypsin and of Bifidobacterium spp. with protease, trypsin or periodate. There were no significant effects on the HA titers of the three groups of bacteria after the treatment with lipase. Hemagglutination of E. coli was strongly inhibited by D (+)-mannose and D (+)-galactose; Lactobacillus spp. by $\alpha$-L-rhamnose and methyl-$\beta$-galactopyranoside; Bifidobacterium spp. by D (+)-alactose, $\alpha$-L-rhamnose, $\alpha$-L-fucose, L (+)-arabinose, D (+)-mannose, D (-)-fructose at a relatively low concentration (1.43 to 3.75 mg/ml). These results, combined with the enhanced HA activities of the three bacterial strains by modification of rabbit erythrocytes with neuraminidase and abolished HA activity of E. coli after treatment with $\beta$-galactosidase, indicate that it might be the glycoproteinous substances surrounding the surface of the bacterial cells that are responsible for the adhesions of these microorganisms by recognizing the specific receptors on the red blood cell.
Kim, Kui-Jin;Lee, Ok-Hwan;Lee, Han-Chul;Kim, Young-Cheul;Lee, Boo-Yong
Food Science and Biotechnology
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제16권2호
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pp.212-217
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2007
Fucoidan (fucan sulfate) is a fucose-containing sulfated polysaccharide from brown algae such as Fucus vesiculosus, Ecklonia kurome, and Cladosiphon okamuranus. The aim of this study was to investigate the effect of fucoidan on the expression of diabetes-related genes in mouse cell line 3T3-L1. 3T3-L1 adipocytes were cultured for 48 hr with or without fucoidan (10, 100, and 500 ppm) on a 60 mm dish. Reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) was used for measurement of peroxisome proliferators activated receptor ${\gamma}\;(PPAR{\gamma})$, CCAAT/enhancer binding protein ${\alpha}\;(C/EBP{\gamma})$, and glucose transporter 4 (GLUT4) RT-PCR analysis revealed that expression level of GLUT4, $PPAR{\gamma}$, and $C/EBP{\alpha}$ mRNAs increased with fucoidan treatment from 10 to 500 ppm in a dose-dependent manner. Fucoidan appears to enhance insulin sensitivity by increasing the expression level of diabetes-related genes in 3T3-L1 adipocytes. Therefore, fucoidan is potentially useful as a natural therapeutic material for hyperglycemia in type II diabetes patients.
본 연구에서는 다양한 추출방법(열수, 가압가열, 초고압 추출방법)을 통해 톳 추출물을 제조하였으며 품질특성을 실시하여 효과적인 톳 추출방법을 제시하고자 하였다. 추출 수율은 초고압 추출물, 가압가열 추출물, 열수 추출물 순으로 높은 수율을 확인하였으며 색도의 경우 열수 추출물에서 높은 명도와 황색도를 나타내었고 가압가열 추출물에서는 적색도가 높았다. 추출방법에 따른 톳 추출물의 전당 함량을 측정한 결과, 전체적으로 모든 추출물이 40~60%의 높은 전당 함량을 보였으며 특히 가압가열 추출물의 함량이 높았다. 또한 시료별 전당 함량의 경우 가압가열, 열수, 초고압 추출물의 순으로 높은 함량을 보였으며 이는 환원당과 단백질 함량에서도 동일한 결과를 나타내었다. 그러나 우론산 및 총 아미노산 함량의 경우 초고압 추출물이 다른 추출물보다 높은 함량을 보였으며, 특히 asparagine의 경우 초고압 추출물에서만 검출되었다. 톳의 다당류 성분을 알아보고자 에탄올을 이용하여 조다당류를 추출한 결과 수율의 경우 초고압 추출물에서 4.75%로 높았으며 가압가열, 열수 추출물의 순으로 나타났다. 또한 high performance anion exchange chromatography를 통하여 조다당류의 구성당을 살펴본 결과 fucose가 주 당성분인 polysaccharide임을 알 수 있었으며 galactose, glucose, xylose가 함유되어 있음을 알 수 있었다. 이러한 결과를 종합해 볼 때 높은 온도와 압력을 가해 추출할 경우 해조류의 수율 및 유용성분의 추출이 용이해짐을 알 수 있었으며 추후 적절한 압력과 온도 설정관련 연구를 통해 해조 가공산업에 유용할 것으로 판단된다.
Brown algal extracts have long been used as feed supplements to promote health of farm animals. Here, we show new molecular insights in to the mechanism of action of a fucose containing polymer (FCP) rich fraction from the brown seaweed Ascophyllum nodosum using the Caenorhabditis elegans-Pseudomonas aeruginosa PA14 infection model. FCP enhanced survival of C. elegans against pathogen stress, correlated with up-regulation of key immune response genes such as: lipases, lysozyme (lys-1), saponin-like protein (spp-1), thaumatin-like protein (tlp-1), matridin SK domain protein (msk-1), antibacterial protein (abf-1), and lectin family protein (lfp). Further, FCP caused down regulation of P. aeruginosa quorum sensing genes: (lasI, lasR, rhlI, and rhlR), secreted virulence factors (lipase, proteases, and elastases) and toxic metabolites (pyocyanin, hydrogen cyanide, and siderophore). Biofilm formation and motility of pathogenic bacteria were also greatly attenuated when the culture media were treated with FCP. Interestingly, FCP failed to mitigate the pathogen stress in skn-1, daf-2, and pmk-1 mutants of C. elegans. This indicated that, FCP treatment acted on the regulation of fundamental innate immune pathways, which are conserved across the majority of organisms including humans. This study suggests the possible use of FCP, a seaweed component, as a functional food source for healthy living.
탄닌 분해균 선발배지를 이용하여 탄닌 분해활성 보유 유산균을 발효 침채류로부터 분리하는 과정에서 오이소박이, 파김치, 총각김치로부터 다당류로 추정되는 점질물질을 생산하는 균주 4종을 선발하였다. 이들 균주의 165 rDNA 염기서열에 의한 계통유전학적 동정 결과, CK31은 Enterobacter cowanii, CK32는 Escherichia senegalensis, YK5는 Enterobacter asburiae, GK23은 Enterobacter ludwigii와 99% 이상의 매우 높은 상동성을 나타내었다. 가장 많은 양의 점질 물질을 세포 외로 생성하는 CK3l 균주는 rhamnose, fucose, arabinose, mannose, galactose, glucose의 중성당 조성을 가지고 있는 분자량 약 420 kDa heteropolysaccharide를 생산하는 것으로 나타났다.
Sanchez, Borja;Saad, Naima;Schmitter, Jean-Marie;Bressollier, Philippe;Urdaci, Maria C.
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제20권6호
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pp.978-984
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2010
This paper examines the probiotic bacterium Lactobacillus rhamnosus GG, and how it reacts to the presence of mucin in its extracellular milieu. Parameters studied included cell clustering, adhesion to mucin, extracellular protein production, and formation of final metabolites. L. rhamnosus GG was found to grow efficiently in the presence of glucose, N-acetylglucosamine, or mucin (partially purified or purified) as sole carbon sources. However, it was unable to grow using other mucin constituents, such as fucose or glucuronic acid. Mucin induced noticeable changes in all the parameters studied when compared with growth using glucose, including in the formation of cell clusters, which were easily disorganized with trypsin. Mucin increased adhesion of the bacterium, and modulated the production of extracellular proteins. SDS-PAGE revealed that mucin was not degraded during L. rhamnosus GG growth, suggesting that this bacterium is able to partially use the glucidic moiety of glycoprotein. This study goes some way towards developing an understanding of the metabolic and physiological changes that L. rhamnosus GG undergoes within the human gastrointestinal tract.
국내산 갈조류로부터 생리 기능성이 우수한 수용성 식이섬유 소재를 개발하기 위한 기초자료를 얻기위해 다시마와 미역(엽상체와 포자엽 각각)으로부터 fucoidan을 추출, 정제하여 그 특성을 조사하였다 Fucoidan의 추출 조건은 pH 2.0의 산성 추출액으로 $65^{\circ}C$I에서 1시간 씩 3회 추출을 하였고 cetylpyridinium chloride를 사용하여 부분 정제하였다. 부분 정제 fucoidan의 수율은 다시마 $2.71\%$, 미역포자엽 $6.65\%$, 미역 엽상체$0.40\%$였다. 특히 미역포자엽의 수율이 가장 높은 반면에 미역 엽상체는 가장 낮아 부위에 따른 차이가 매우 큼을 알 수 있었다. DEAE-Sephadex A-25 이온 교환 칼럼으로 부분 정제 fucoidan을 분획한 결과 다시마, 미역포자엽 모두 3종의 fraction으로 분획되었고 각 fraction은 전기 영동상에서 2종 이상의 band가 검출되어 불균일함을 알 수 있었다 이온 교환 칼럼으로 분획한 주fraction을 다시 알콜 분별 침전법으로 재분획한 결과 다시마와 미역포자엽은 에탄올농도 $60-70\%$에서 침전된 fraction이 cellulose acetate 전기 영동 및 gel filteration chromatography상에서 균일성을 나타내었다. 균일하게 정제된 fucoidan의 fucose : galactose : 황산기의 mole 조성비는 다시마, 미역포자엽이 각각 1 : 0.31 : 2.43,1 : 0.87 : 1.99였다. 분자량은 다시마가 31,000, 미역포자엽이 38,000으로 비교적 적었다.
팽나무버섯을 수확한 후의 톱t웹사체에서 항암효과가 뛰어난 것으로 알려진 단백다당류를 열수추출, 분 , 정제하였으며 그 특성을 조사하였다. F. velutipes 룹밥균사체로부터 추출한 조단백다당류(Fr.CA)의 수율은 ethanol의 농도가 95%일때 1.464g으로서 원재료인 톱밥균사체를 기준으로 0.366 % 였다 Fr. CA의 당 및 단백질조성은 총당 19.8%, 총단백질 2 23.8% 이었다. Fr.CA를 박막여과하여 분획한 결과 분자량 30만 이상의 Fr.A분획이 44.6%를 차지하여 고분자 단백다당류가 주성분임을 알 수 있었다. Fr.A를 DEAE-sephadex column chromatogra phy로 분리한 결과 세개의 분획이 Fr.A를 기준으로 5 5.8% (Fr.A-l), 8.5% (Fr.A-2), 13.2% (Fr.A-3)의 수율로 얻어졌다. 이들 분획을 sepharose 28 gel fil tra tion으로 정제한 결과 순수한 단일 단백다당류의 peak를 얻을 수 있었는데 이들 중 Fr.A-l-a의 수율 은 Fr.A -1을 기준으로 20.9%이었으며 분자량은 8 800kDa정도였다. 단백다당류의 단당류 조성은 모든 분획에서 glucose, galactose, mannose, xylose및 fucose의 5종류가 검출되었으며 특히 neutral poly saccharide분획인 Fr.A-1-${\alpha}$에서는 glucose와 gal lactose의 함량이 상대적으로 높게 나타났다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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