세포내소기관과 단백질 복합체의 운반은 kinesin superfamily proteins (KIFs)에 의해 매개된다. 처음으로 밝혀진 kinesin인 kinesin 1은 motor단백질로서 세포 내에서 미세소관을 따라 이동하며, 다양한 세포내 소기관이나 단백질복합체를 운반한다. Kinesin 1은 장쇄(KHC, 또한 KIF5s로도 통칭) 2분자와 단쇄(KLCs) 2분자로 구성된 4합체(tetramer) 구조를 가진다. KIF5s의 운반체 결합영역을 포함하는 말단영역은 다수의 운반체와 결합하지만, 결합운반체에 관하여 아직 충분히 밝혀지지 않았다. 본 연구에서 KIF5A의 결합 단백질을 동정하기 위하여 효모 two-hybrid screening을 수행하였고 철 저장 및 해독 기능을 하는 단백질인 ferritin heavy chain (Frt-h)을 찾아내었다. Frt-h은 KIF5A의 아미노산 800번과 940번 사이의 부위와 결합하며, 다른 KIF5s와도 결합함을 효모 two-hybrid assay로 확인하였다. 또한 Frt-h의 coiled-coil 도메인이 KIF5A와의 결합에 필수영역임을 밝혔다. 한편, ferritin light chain (Frt-l) 또한 KIF5s와 결합함을 효모 two-hybrid assay로 확인하였다. 이러한 단백질간의 결합을 glutathione S-transferase (GST) pull-down assay를 통하여 검증하였다. 추가적으로 생쥐의 뇌 파쇄액을 항 KHC 항체로 면역침강을 행한 결과, KLC1뿐만 아니라 Frt-h와 Frt-l도 같이 침강하였다. 이러한 결과들은 세포 내에서 kinesin 1이 ferritin 복합체를 운반함을 시사한다.
Kim, Hyoung-Won;An, Eun-Kyoung;Shin, Mi-Young;Kim, In-Ho
한국생물공학회:학술대회논문집
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한국생물공학회 2003년도 생물공학의 동향(XIII)
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pp.544-547
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2003
Fusion $ferritin(F_H+F_L),$ an iron-binding protein, was purified from recombinant E. coli by gel filtration chromatography after two-step sonications. Unfolded ferritin was refolded by GFC with various refolding enhancing additives. 50 mM Tris-HCI(pH 7.4) buffers containing 2 M urea and additive was used in GFC. Objective was to characterize the structure change at various conditions. Molecular weight was determined using GF-HPLC and RP-HPLC was used to quantify the unfolded and refolded proteins. Activity was confirmed by iron-uptake reaction.
세포 전처리 과정으로 융합 ferritin을 2단계 세포파쇄하여 주입시료로 이용하였으며, 변성된 단백질용액을 젤 여과 크로마토그래피를 통하여 urea의 농도를 희석시켜 재접힘 시켰다. 여기서 분취한 시료를 역상 크로마토그래피에 적용한 결과 FPLC 크로마토그램에서 뒤에 분취한 시료일수록 재접힘 정도가 높은 것으로 나타났다.
Choi, Jung Eun;Kwak, Yujin;Huh, Jung Won;Yoo, Eun-Sun;Ryu, Kyung-Ha;Sohn, Sejung;Hong, Young Mi
Clinical and Experimental Pediatrics
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제61권5호
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pp.167-173
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2018
Purpose: Hemophagocytic lymphohistiocytosis (HLH) is a hyperinflammatory syndrome with many causes, including Kawasaki disease (KD). The purpose of this study was to identify the laboratory tests needed to easily differentiate KD with HLH from incomplete KD alone. Methods: We performed a retrospective study on patients diagnosed with incomplete KD and incomplete KD with HLH (HLH-KD) between January 2012 and March 2015. We compared 8 secondary HLH patients who were first diagnosed with incomplete KD with all 247 incomplete KD diagnosed patients during the study period. The complete blood count, erythrocyte sedimentation rate, platelet count, and serum total protein, albumin, triglyceride, C-reactive protein, N-terminal pro-brain natriuretic peptide (NT-proBNP), and ferritin levels were compared. Clinical characteristics and echocardiography findings were also compared between the 2 groups. Results: The total duration of fever was longer in the HLH-KD group than in the KD group. White blood cell and platelet counts were higher in the KD group. Alanine aminotransferase, ferritin, and coronary artery diameter were increased in the HLH-KD group compared with those in the KD group. The median of NT-proBNP was significantly higher in the HLH-KD group than in the KD group at 889.0 (interquartile range [IQR], 384.5-1792.0) pg/mL vs. 233.0 (IQR, 107.0-544.0) pg/mL. Conclusion: The NT-proBNP level may be helpful in distinguishing incomplete KD from KD with HLH. The NT-proBNP level should be determined in KD patients with prolonged fever, in addition to the white blood cell count, platelet count, and ferritin level, to evaluate secondary HLH.
Background Iron overload is a risk factor affecting all patients with thalassemia intermedia (TI). We aimed to determine whether there is a relationship of serum ferritin (SF) and alanine aminotransferase (ALT) with liver iron concentration (LIC) determined by R2 magnetic resonance imaging (R2-MRI), to estimate the most relevant degree of iron overload and best time to chelate in patients with TI. Methods In this cross-sectional study, 119 patients with TI (mean age years) were randomly selected and compared with 120 patients who had a diagnosis of thalassemia major (TM). Correlations of LIC, as determined by R2-MRI, with SF and ALT levels, were assessed in all participants. A P-value <0.05 was considered statistically significant. Results SF and LIC levels were lower in patients with TI than in those with TM; only ferritin values were significant. We found a statistically significant relationship between SF and LIC, with cut-off estimates of SF in patients with TI who had splenectomy and those who entered puberty spontaneously (916 and 940 ng/mL, respectively) with LIC >5 mg Fe/g dry weight (P<0.0001). A significant relationship was also found for patients with TI who had elevated ALT level (63.5 U/L), of 3.15 times the upper normal laboratory limit, using a cut-off for LIC ${\geq}5mg\;Fe/g\;dry\;weight$. Conclusion We determined the cut-off values for ALT and SF indicating the best time to start iron chelation therapy in patients with TI, and found significant correlations among iron overload, SF, and ALT.
배경: 만성 적혈구 수혈 환자에서 철과잉 여부를 알아보기 위해 페리틴 검사를 시행하는데, 페리틴은 체내 저장철의 양을 반영하지만, 염증, 감염 등에서도 비특이적으로 증가할 수 있다. 본 연구에서는 고페리틴혈증을 보이는 환자에서 페리틴이 증가한 원인을 분석하고 적혈구제제 수혈과의 연관성을 알아보고자 하였다. 방법: 2017년 1월부터 12월까지 본 의료기관에 내원하여 페리틴 검사를 시행한 환자들의 의무기록을 후향적으로 검토하였다. 시행한 페리틴 검사에서 1,000 ng/mL이상의 결과를 보인 경우를 고페리틴혈증으로 정의하고 연구대상으로 정하였다. 페리틴 검사와 함께 시행된 혈청 철, TIBC (Total iron bind capacity), CRP (C-reactive protein) 검사결과와 진단명 등 의무기록을 조사하여 고페리틴혈증의 원인을 분석하였다. 결과: 해당 기간 동안 고페리틴혈증 결과를 보인 건은 238명 환자에서 417건이었다. 질환별로는 혈액종양질환이 31명에서 125건(30.0%)으로 가장 많았으며, 감염질환이 두번째로 많았다. 철과잉이 의심되는 경우는 33명 환자에서 119건이었으며, 이 중 검사 시행 전 1년 동안 적혈구제제수혈이 8단위를 초과한 경우는 12명(76건)이었다. 결론: 고페리틴혈증을 보이는 환자에서 실제 철과잉으로 판단되는 경우, 기저질환의 영향이 있었고 만성 적혈구제제 수혈과도 연관이 있었다. 체내 철 저장 상태를 정확히 파악하기 위해서 페리틴 외에 CRP, 철 포화도를 함께 측정하는 것이 도움이 된다. 습관적인 철분제제 처방, 잦은 수혈 처방시에 철과잉 발생 여부에 주의를 기울여야 한다.
This study reports a direct growth of carbon nanotubes (CNTs) on the surface of LiCoO2 (LCO) powders to apply as highly efficient cathode materials in lithium-ion batteries (LIB). The CNT synthesis was performed using a thermal chemical vapor deposition apparatus with temperatures from 575 to 625 ℃. Ferritin molecules as growth catalyst of CNTs were mixed in deionized (DI) water with various concentrations from 0.05 to 1.0 mg/mL. Then, the LCO powders was dissolved in the ferritin solution at a ratio of 1g/mL. To obtain catalytic iron nanoparticles on the LCO surface, the LCO-ferritin suspension was dropped in silicon dioxide substrates and calcined under air at 550℃. Subsequently, the direct growth of CNTs on LCO powders was performed using a mixture of acetylene (10 sccm) and hydrogen (100 sccm) for 10 min. The growth behavior was characterized by scanning and transmission electron microscopy, Raman scattering spectroscopy, X-ray diffraction, and thermogravimetric analysis. The optimized condition yielding high structural quality and amount of CNTs was 600 ℃ and 0.5 mg/mL. The obtained materials will be developed as cathode materials in LIB.
This study investigated the effects of vitamin C supplementation on the nutritional iron status of 31 adolescent girls, aged 12-15 years, with low hemoglobin levels. They were randomly divided into four groups, and for two groups daily150mg or 900mg of L-ascorbic acid(AsA) was given in three equal doses at three meals during 9 weeks. To another group daily 60mg iron as ferrous sulfate was given in the same way as AsA. The control group was given sugar placebo. Body iron status was monitored through the determination of Hb, Hct, MCHC, and serum ferritin concentrations. Dietary AsA and iron intakes were measured from food consumption surveys performed by 3-day 24-hour recalls. The amount of absorbed iron was estimated from the model of Monsen et al. The average amounts of food iron for four groups were 12.3- 15.0mg and 11.1 - 18.9mg at initial and at final period of the supplementation trial, respectively. The tentatively estimated amount of absorbed iron was significantly increased in the 900mg AsA and iron supplementing groups, but not in the 150mg AsA and placebo groups. Both Hb and MCHC were improved to above normal levels in all groups except the placebo group. Hct was elevated only in the AsA 900mg group whose Hct was relatively lower than the other groups. Serum ferritin concentrations of the four groups, which were as low as 8.50 - 14.39ng/mL on average at the intial periods, augmented significantly to 20.18ng/mL and 26.63ng/mL in the 900mg AsA and iron groups, respectively. Serum ferritin was not elevated in either the AsA 300mg group or the placebo group. The above data indicated that the daily supplementaion of 150mg AsA to the meals containing 12-15mg iron per day promoted Hb levels of adolescent girls with low Hb, and the 900mg AsA supplementing improved not only Hb level but also body iron store. A supplementation of 60mg iron per day appeared to be slightly more effective in improving the iron status in comparison to the 900mg AsA supplement. (Korean J Community Nutrition 2(5) : 687-694, 1997)
목 적 : 본 연구에서는 철결핍성 빈혈의 주된 호발 연령인 영유아를 대상으로 HP 감염 유무와 철결핍성 빈혈과의 상관관계를 연구하고자 하였다. 이전의 연구에서는 페리틴을 주 지표로 철결핍성 빈혈과 HP 감염과의 상관관계를 연구하였다. 철결핍성 빈혈 영유아의 대부분은 급성 상기도 감염 및 요로감염 등으로 내원하므로 급성 감염 시에 영향을 받는 페리틴 외에 철 대사의 이용이나 저장에 관련된 다른 인자들을 동시에 비교해보고자 하였다. 방 법 : 2000년부터 2006년까지 경상대학교병원에 내원한 6-24개월 영유아 135명을 대상으로 하였다. 혈청 HP CagA 항원(120kD)에 대한 western blot 을 시행하여 감염 유무를 분류하고 (Fig.1) 이들의 혈색소(g/dL), 혈청 페리틴(ug/L), sTfR, (mg/L), Interleuken (IL)-6 (pg/mL), prohepcidin (ng/mL)과 C-reactive protein (CRP) (mg/L)(이하 6인자)를 측정하였다. 또한 이들을 혈색소와 페리틴 수치에 따라 철결핍성빈혈군(IDA), 염증성빈혈군(AI), 미분류빈혈군(UCA) 그리고 정상군(Nor)으로 분류하였다. 통계량 분석은 Mann Whitney U test를 사용하였고 SPSS 14.0 버전을 사용하여 P값이 0.05미만인 경우에 통계적으로 유의한 것으로 평가하였다. 결 과 : IDA, AI, UCA 그리고 Nor 군에서 HP 감염률 비교는 통계적으로 유의한 차이가 없었다. IDA (N=20)에서 HP 감염이 있는 환아는 7명, 감염이 없는 환아는 13명이었다. 이들 두 그룹의 혈색소 평균은 각각 7.1과 8.2 g/dL로 HP 감염이 있는 환자에서 유의하게 낮았으며 페리틴은 각각 3.2, 6.8 ug/L로 HP감염이 있는 그룹에서 유의하게 낮았다. 또한 IDA외에 다른 군에서는 HP 감염 유무에 따라 6가지 인자를 각각 비교하였으나 유의한 차이는 없었다. 또한 전체 대상 환아에서 HP 감염 유무에 따라 6인자를 각각 비교하였으나 통계적으로 유의한 차이는 없었다. 결 론 : 철결핍성 빈혈이 있는 영유아(6-24개월)의 HP 감염 유병률은 대조군들과 유의한 차이가 없었다. 본 연구에서는 HP 감염이 있는 철결핍성 빈혈 군에서 sTfR 농도가 유의한 차이를 보인 청소년기 환아 에서의 연구와는 달리 sTfR은 유의한 차이를 보이지 않고 오히려 혈청 페리틴 농도와 혈색소가 의미 있게 낮게 측정되었다. 본 연구에서는 대상 환자인 철결핍성 빈혈군 환자수가 적고 환자들의 식이 등이 고려되지 않았으므로 더 많은 환자를 대상으로 연구가 시행되어야 하겠다.
본 연구에서는 사람 ferritin H- 및 L-chain 유전자가 재조합된 효모 S. cerevisiae에 있어서 철의 생체 흡수 반응을 수행하였다. 재조합 효모는 $2\%$ galactose가 첨가된 YEP 배지에서 3일간 batch culture한 후, 20 mM MOPS buffer (pH 6.5) 에서 반응 균체 농도, 철 화합물 종류, 철 농도, 및 반응 시간 등을 고려하여 반응을 진행하였다. 이 실험 결과, ferritin H-chain 유전자를 발현하는 균주 YGH2에 있어서 균체 농도 100 mg/ml에서 균체 농도 200 mg/ml보다 높은 철 농도를 보였다. 그리고, 철 흡수 반응에 있어서 Fe(II)의 산화 상태가Fe(III)보다 훨씬 유리하였다. 철 농도의 증가에 따라 철 흡수량도 증가하였으며, 14.3 mM Fe(II)과 반응시 YGH2의 세포내 철 농도는 $16.7{\pm}0.7\;{\mu}mol/g$ cell wet wt.로 분석되었다. 철 흡수는 반응 시작 후 약 120분 경에 거의 최대치에 이르렀다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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