• 대한임상검사과학회지
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• 제37권2호
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• pp.78-83
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• 2005

The optimum conditions of Cordyceps militaris mycelial growth, purification and characteristics of branched-chain amino acid aminotransferase [BCAT(EC 2.6.1.42)] in this mycelium were studied. Optimum pH, temperature and medium of culture of mycelia were 5.5, $22.5^{\circ}C$ and Hamada medium (HM), respectively. BCAT in homogenate of this mycelia was precipitated by 20-40% saturated solution of ammonium sulfate and then purified by DEAE (diethylaminoethyl)-Sephadex A-50 column chromatography with linear concentration gradient and Sephadex G-200 gel filtration. A single band of purified enzyme was detected on SDS-PAGE (sodium dodecylsulfate-polyacrylamide gel electrophoresis). Optimum pH and temperature of BCAT were found to be 7.8 and $29^{\circ}C$, respectively. It showed activity toward L-leucine, L-isoleucine and L-valine as a substrate. The Km values of this enzyme for L-leucine were determined to be 5.88 mM for L-leucine.

• BMB Reports
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• 제31권3호
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• pp.287-295
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• 1998

Acetolactate synthase (ALS) is the first common enzyme in the biosynthesis of L-Ieucine, L-isoleucine, and L-valine. The sulfonylurea-resistant ALS gene from Nicotiana tabacum was cloned into the bacterial expression vector pGEX-2T. The resulting recombinant plasmid pGEX-ALS3 was used to transform Escherichia coli strain XL1-Blue, and the mutant tobacco ALS (mALS) was expressed in the bacteria as a protein fused with glutathione S-transferase (GST). The fusion product GST-mALS was purified in a single step on a glutathione-Sepharose column. ALS activities of 0.9-2.5 ${\mu}mol/min/mg$ protein were observed in the GST-mALS, and the Km values for pyruvate, FAD, and TPP were 10.8-24.1, $(1.9-8.9){\times}10^{-3}$, and 0.14-0.38 mM, respectively. The purified GST-mALS was resistant to both the sulfonylurea and the triazolopyrimidine herbicides, and lost its sensitivity to end products, L-valine and L-leucine. For comparision, the tobacco wild-type recombinant ALS fused with GST, GST-wALS, was also characterized with respect to its pyruvate and cofactor bindings. These results suggest that the purified mutant recombinant tobacco ALS was functionally active, that the mutations resulting in herbicide resistance has affected pyruvate and cofactor bindings," and that the two classes of herbicides interact at a common site on the plant ALS.

• 미생물학회지
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• 제12권2호
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• pp.53-58
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• 1974

A number of antibiotics and organic compounds were tested for their effect on the multoplication of tobacco mosaic virus(TMV) in floating leaf discs. 1)Among six antibiotics tested, kanamycin sulfate showed 24% or more inhibition to TMV multiplication under these experimental conditions. Aureomycin hydrochloride and chloramphenicol showed 19% and 14% inhibition respectively. 2)For screening of organic compounds two environments were used, a diffuse day- light environment (25 foot-candles and laboratory temperature) and an artificial light environment for 12 hours per day(300 foot-candles at 4 to $5^{\circ}C above laboratory temperature). A wide range of organic compounds increased virus multoplication in the diffuse daylight environment but had less effect, or ingibited virus multiplication, in the artificial light environment. 3)The following compounds were among the most effective in increasing TMV multiplication: glucose-1-phosphate, L-aspartic acid, glucose, and 5-bromouracil. The following compoumds were most effective in inhibiting TMT multiplication: thiouracil, uracil, DL-isoleucine, L-leucine, and zinc chloride.

• 생명과학회지
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• 제29권12호
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• pp.1358-1363
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• 2019

본 연구에서는 우엉의 뿌리를 차의 원료로 가공하는 과정에서 필요한 적정한 가열 처리 조건 설정에 대한 자료를 얻고자 열처리 단계의 가열 온도와 시간에 따른 유리아미노산의 함량 변화와 항산화 활성수준 등을 비교하였다. 항산화 활성을 비교하기 위해 실시한 DPPH와 ABTS 라디칼 소거능 측정 결과에서 180℃-4분 가열 처리 조건과 200℃-3분 가열 처리 조건이 비교적 높은 활성을 가지는 것으로 나타났다. 이는 폴리페놀 함량 측정에서 200℃-3분 가열 처리 조건과 180℃-4분 가열 처리 조건에서 각각 62.74 mg/l와 60.09 mg/l로 다른 가열 조건보다 상대적으로 높은 결과를 보인 것과 관련된 것으로 판단되었다. 가열 조건별 우엉차의 유리 아미노산 분석 결과에서 가열온도와 시간이 증가됨에 따라 초기의 아미노산 함량보다 감소되는 경향을 확인할 수 있었다. 특히 phenylalanine, histidine, leucine과 isoleucine 등의 함량 변화가 높은 비율로 나타났으며, aspartic acid, proline 등은 비교적 감소 비율이 낮았다. 전반적으로 180℃에서 3분~4분 가열 조건과 200℃의 2분 가열 조건을 넘어서는 온도와 시간 조건에서는 아미노산 함량이 급격히 감소되었다. 이상의 결과에서 실험이 실시된 항산화 활성과 유리 아미노산 함량을 기준으로 180℃-4분 수준의 가열 처리 조건이 가장 우수한 것으로 판단되었다.

• 한국버섯학회지
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• 제19권3호
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• pp.184-190
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• 2021

표고버섯은 톱밥배지 재배기술의 발달로 세계적으로 가장 많이 생산되고 식용되는 버섯이며, 톱밥배지를 이용하여 재배된 표고버섯의 생산량이 늘고 있다. 본 연구에서는 톱밥재배 표고버섯의 품종별 식품학적 차이를 비교하고자 동일 조건에서 재배된 산조701호, 산조707호, 산조 715호, 참아람, L808 총 5품종 표고버섯의 일반성분, 영양성분 및 항산화 활성을 분석하였다. 동결건조된 표고버섯의 일반성분 함량은 회분 4.06~5.92 g/100 g, 조지방 0.75~1.02 g/100 g으로 품종별 차이가 크지 않았으나 조단백질은 21.24~29.15 g/100 g으로 품종간의 유의적 차이를 보였다. Trehalose는 산조701호에서 9.60±0.08 g/100 g으로 가장 높은 함량으로 확인되었다. 총 아미노산 조성은 glutamic acid>aspartic acid>leucine 순으로 높은 분포를 보였으며, 유의적 차이를 보인 아미노산은 glycine, alanine, valine, isoleucine, leucine, phenylalanine이었으며 산조707호, 산조715호, 산조701호, 참아람, L808 순으로 높은 함량을 보였다. 물 추출물의 총 폴리페놀 함량과 총 플라보노이드 함량은 산조715호가 3.49±0.04 mg GAE/g, 1.33±0.03 mg QE/g으로 가장 높게 나타났으며 다른 품종들과 유의적 차이를 나타내었다. 같은 톱밥배지와 환경에서 재배된 표고버섯 5 품종간의 유의적 차이가 확인된 성분은 조단백질, trehalose, 6종의 아미노산이었다. 하지만 한 곳의 임가에서 재배된 표고버섯 품종간의 비교 결과로, 품종별 시료 수를 확대한 추가실험을 통하여 품종간의 구별 가능성을 더욱 세부적으로 검토할 필요가 있다.

• 약학회지
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• 제33권2호
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• pp.129-139
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• 1989

New diamide chiral stationary phases of four systematically substituted optically active N-(N-benzoyl-L-amino acid)-anilide synthesized from L-valine, L-leucine, L-isoleucine, and L-phenylalanine were described. The behaviors of these diamides as optically active stationary phases for the separation of N-trifluoroacetyl-D,L-amino acids were examined with respect to separation factors(${\alpha}$) and thermodynamic properties of interaction. The separation of twelve N-trifluoroacetyl-D,L-amino acid isopropyl esters were improved by the order of N-(N-benzoyl-L-leucyl)-anilide>N-(N-benzoyl-L-isoleucyl)-anilide>N-(N-benzoyl-L-valyl)-anilide>N-(N-benzoyl-L-phenylalanyl)-anilide. Eight amino acid derivatives with non-polar R-group and threonine, serine, aspartic acid, and glutamic acid enantiomers were separated on N-(N-benzoyl-L-leucyl)-anilide as chiral stationary phase with good separation factor between 1.07-1.25. The separation factors decreased with respect to increasing column temperature. Possible working temperature of diamide phase was between $130-190^{\circ}C$ for N-(N-benzoyl-L-phenylalanyl)-anilide and $130-180^{\circ}C$ for other three diamide phases. The differential Gibb's free energy (${\Delta}{\Delta}G$) of enantiomers was in the range of -100--180 cal/mol for ten amino acids and -40--60 cal/mol for alanine and aspartic acid.

• 한국식품영양과학회지
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• 제46권1호
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• pp.108-114
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• 2017

Bacillus subtilis 균주를 이용하여 뽕잎을 발효하고, 발효과정 중 성분 변화와 단백질의 변화, 항산화 활성을 측정하였다. 뽕잎의 조단백 함량은 21.40%, 구성아미노산은 105.06 mg/g으로 측정되었으며, 그중 주된 아미노산은 aspartic acid와 glutamic acid였다. 뽕잎 발효 36시간 후 B. subtilis의 생균수는 9.49 log CFU/mL였으며, protease의 활성은 발효가 진행될수록 증가하여 발효 120시간에는 97.45 units/mL로, 뽕잎의 환경에서 B. subtilis의 생육이 우수하였다. 2DE 실험 결과 발효 전 관찰되던 단백질 spot이 발효 후 분해된 것을 확인하였다. 총 유리아미노산은 발효 전($486.91{\mu}g/g$)보다 발효 후($644.35{\mu}g/g$) 증가하였으며, 특히 alanine, isoleucine, leucine, valine의 함량이 3배 이상 증가한 것으로 나타났다. DPPH radical scavenging activity는 발효 전 25.93%에서 발효 후 73.22%로 증가하였다.

• 식품과학과 산업
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• 제40권2호
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• pp.83-89
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• 2007

저온발효와 고온발효에 의하여 만들어진 민속주를 증류하여 알콜돗를 45%로 같이 맞추어 성분함량을 비교하였다. 발효온도에 따른 환원당의 함량을 나타내고 있으며 저온발효 민속주는 15 mg/100 mL, 고온발효 민속주는 5 mg/100 mL로 나타났다. 즉 저온 발효에서 환원당의 양이 많았으며, 그러나 시중에 판매되고 있는 소주보다는 낮은 경향을 보였다. 향기 성분에 생성과정에 영향을 주는 Fusel alcohol을 볼 때 반적으로는 발효액에 아미노산이 없는 것보다는 많을 수록 많은 양의 fusel alcohol을 생성되기는 하지만, fusel alcohol을 생성하기위한 조건은 효모의 종류, 발효조건, 발효온도, 발효액의 조성 등의 복잡한 인자가 관련된다. 본 연구에 제조한 발효주를 소주의 아미노산과 비교할 때 아미노산 함량이 전반적으로 20-100도 낮은 함량치로 나타났다. 한약재 첨가로 인하여 면역증강, 살세포 반응 억제효과, 기능성 전통주로 좋은 발효주로 인정되지만 한약재특유의 강한 향기를 약화시키는 연구가 금후에 보완되어야 한다고 본다. 발효온도에 따른 아미노산의 함량은 저온발효 조미주에서 cysteine, valine, mrthionine, isoleucine, phenylalanine이 많았으며, 고온발효 조미주에서는 serine, glycine, leucine이 많았다. 한 alanine, tyrisine, lysine은 고온발효주에는 있으나, 저온발효주에서는 나타나지 않았다. 그러나 저온발효주와 고온 발효주 모두 시중에 판매되고 있는 소주보다는 아주 낮은 경향을 보였다. 저온발효와 고온발효에 의하여 만들어진 민속주를 증류하여 알콜 도수를 45%로 같이 맞추어 성분함량을 비교하였다. 발효온도에 따른 환원당의 함량을 나타내고 있으며 저온발효 민속주는 15 mg/100 mL, 고온발효 민속주는 5 mg/100 mL로 나타났다. 즉 저온 발효에서 환원당의 양이 많았으며, 그러나 시중에 판매되고 있는 소주보다는 낮은 경향을 보였다. 아미노산 실험에서는 소주와 45% 고온 발효주를 비교 할 때 serine, glycine, cysteine, methionine, phenylalanine 등은 100배, alanine, valine, isoleucine 80배, ammonia 20배 낮은 수치를 나타냈다. OD 측정의 실험결과 또한 control과 비교시 40% 발효주에서는 10배, 45% 고은 발효주에서는 100배 낮은 측정치가 나타났으므로 한약재의 색소성분을 휘발시키는 기술이 요구된다고 본다. 항균성실험에서 항균성 측정은 06 cm paper disk agar diffusion법을 이용하였으며, 43%의 발효주와, 45% 고온 발효주가 항균력이 가장 강력한 0.95 cm의 영향을 나타냈다. 사용한 사용한 Gram 양성, Gram 음성 균주는 Escherichia coli KCCM 11591를 제외하고는 0.8 - 0.95 cm로 항균력이 강했으며, Gram negitive의 Pseudomonas aeruginosa KCTC 1750 에서는 43% 발효주에는 0.95 cm, 45% 고은 발효주에는 0.95 cm의 항균성을 나타냈으며 관능평가에서도 가장 높게 났다. 관능평가에서는 45% 고온 발효주가 가장 높게 나타났으며, 항산화성 실험에 나타난 저온 45%의 갈색도의 측정과는 항산화성에서는 좀 다른 결과를 나타낸다. 그러나 항균성이 가장 높게 나타난 43-45%와 관능평가에서 가장 높게 나타난 45% 고온 발효주를 볼 때 본 연구에서는 고온 발효주 45%가 가장 우수한 전통주로 조사되었다. 발효주를 소주의 아미노산과 비교할 때 아미노산 함량이 전반적으로 100배 정도 낮은 함량치로 나타났으므로, 한약재 첨가로 인하여 면역증강, 살세포반응 억제효과, 기능성전통주로 좋은 발효주로 인정되지만 한약재특유의 강한 향기를 약화시켜서 부드럽고 은은한 전통발효주의 연구가 금후에 보완되어야 한다고 본다.

• BMB Reports
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• 제32권4호
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• pp.393-398
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• 1999

Acetolactate synthase (ALS) catalyzes the first reaction common to the biosynthesis of L-valine, L-leucine, and L-isoleucine. ALS is the target site of several classes of herbicides, including the sulfonylureas, the imidazolinones, and the triazolopyrimidines. Two forms of ALS (ALS I and ALS II) which have different affinity for Heparin have been separated from etiolated pea seedlings. The substrate saturation curves of both ALS I and ALS II were hyperbolic in contrast to previous reports. The two forms of ALS showed significant differences in their physical and kinetic properties. The values of $K_m$ for ALS I and ALS II were 9.0 mM and 4.8 mM, respectively. The pI values for ALS I and ALS II were determined to be 5.3 and 5.75 by isoelectric focusing, respectively. The native molecular weights for ALS I and ALS II obtained by nondenaturing gel electrophoresis and activity staining were 124 and 244 kDa, respectively. They also exhibited different sensitivity to feedback inhibition by end-product amino acids and inhibition by Cadre, an imidazolinone herbicide.

• Preventive Nutrition and Food Science
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• 제7권1호
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• pp.105-107
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• 2002

To get basic data for the utilization of S. herbacea L. as a raw material in food and Chinese herbs, chemical compositions of its leaves, stem and root were investigated. Leaves had the highest level of moisture and the lowest bevel of total sugar. The crude protein and crude lipid contents of the stem were similar to those of the root. Crude ash and salt contents (dry basis) in leaves were considerably higher than those of the stem and root. Total amino acid contents of leaves, stem and root were 1,270 mg/100 g, 1,525 mg/100 g, and 1,569 mg/100 g, respectively. Although the amino acid compositions of loaves, stein, and root were different, their major amino acids were glutamic acid, leuicine, isoleucine and aspartic acid. The rich minerals in leaves, stem and root were Na, K and Ca.