From the rhizoplane and rhizosphere of pepper, tomato, lettuce, pasture, and grass, unsoluble inorganic phosphate solubilizing bacterial strains were isolated using plate base assay on Pikovskaya's medium. Two strains, CL-1 and CL-2, which produced largest halo on plates (indicative of phosphate solubilization)were selected for further studies. Based on these biochemical and 16S rRNA analysis strains CL-1, CL-2 were found to be as species of Pseudomonas sp. and Kluyvera sp., respectively. In broth assay Pseudomonas sp. CL-1 and Kluyvera sp. CL-2 solubilized insoluble phosphate by 193.4 mg and $493.6P\;mg\;L^{-1}$, respectively after $3^{rd}$ day inoculation. These effecient phosphate solubilizing bacteria have a potential to be developed as microbial based fertilizer in future.
Protein modification by N-acetyl-${\beta}$-D-glucosamine (O-G1cNAc) on the hydroxyl groups of Ser or Thr ubiq-uitously occurs in eukaryotic cells and is involved in many cellular phenomena. The level of O-G1cNAc-mod-ified protein is regulated by OGT and O-GlcNAcase enzymes. We have tried to produce recombinant O-GlcNAcase in E. coli as an effort to establish in vitro screening system for modulators of O-GlcNAcase. The culture conditions for improvement of O-GlcNAcase productivity, were as follows: induction temperature, $30^{\circ}C$; the concentration of L-arabinose, 0.02% and induction time, 5 hr. Under these culture conditions, E. coli cells containing O-GlcNAcase gene had no enzyme activity until up to 3 hr culture. However, O-GlcNAcase activity dramatically increased from 3 to 5 hr culture. It almost maintained the same level after 5 hr culture. Western blot analysis verified the amount of expressed O-GlcNAcase increased with culture time, being con-sistent with activity data. The optimal reaction condition determined in this study was as follows: protein quan-tity, $5{\mu}g$; reaction time, 30 min; reaction temperature, $45^{\circ}C$; substrate concentration, 2 mM; reaction pH, 6.5. Methanol had little effect on O-GlcNAcase activity and 90% of activity were retained at 10%. Only 15% resid-ual activity were detected at 5% of chloroform.
BACKGROUND: Anthocyanins, potential health-promoting compounds, were major natural pigment in the blueberry (Vaccinium corymbosum L.). The objectives of this study was to investigate anthocyanin glycosides in the blueberry varieties.METHODS AND RESULTS: A total of seventeen anthocyanins were identified from highbush blueberry using HPLC (representatives, 530 nm) and ESI-MS in positive ion mode. The individual anthocyanins are containing cyanidin, delphinidin, malvidin, peonidin, and petunidin moieties which are acylated with aliphatic acid (acetic acid) and conjugated with sugar moieties (arabinose, galactose, and glucose). Among them, delphinidin 3-O-galactoside (D3Ga), peonidin 3-O-glucoside (Pn3G) + malvidin 3-O-galactoside (M3Ga) were major compounds in varieties. Total anthocyanins were found the highest level in 'Elizabeth' (1,406.3 mg/100 g dry weight) which was 3-fold higher than 'Darrow' (465.7). Especially, D3Ga was presented the 32% of total anthocyanins followed by Pn3G + M3Ga (20%) in 'Elizabeth'.CONCLUSION: This result was showed as valuable information regarding nutritional properties of the different varieties of the highbush blueberry.
In this study, a low-salt Lentinula edodes soybean paste (LSLESP) with improved palatability and storability relative to traditional Korean soybean paste was developed by utilizing low quality log cultivation of L. edodes. We also conducted quality characteristic analyses of spread jam made from low-salt L. edodes soybean paste (SJLLESP). The lowest salinity content and the highest L (brightness) value was found in LSLESP. According to proximate compositions analysis, crude protein, crude fat, and ash content were higher in commercial soybean paste than in LSLESP. Glucose, fructose, and maltose were the only free sugars detected in commercial soybean paste, whereas arabinose and fucose were additionally detected in LSLESP. Only two types of organic acid, were detected in common in commercially available soybean paste and LSLESP. Four types of organic acid, were detected in SJLLESP due to its added ingredients. The major free amino acids in commercially available soybean paste and LSLESP are histidine, glutamic acid, and arginine. Total amino acid, content was higher in LSLESP (54.81 mg%) than in commercial soybean paste (49.26 mg%). Total free amino acid, content in SJLLESP was 43.01 mg%. Ergosterol and β-glucan contents were highest in SJLLESP. The elevated ergosterol and β-glucan content in low-salt LSLESP relative to commercial soybean paste was significant. In conclusion, LSLESP and SJLLESP contain useful components from L. edodes, and offer the advantage of low salinity. LSLESP and SJLLESP could thus contribute to the development of health foods using L. edodes.
This study was performed to find out the types of linkage of carbohydrates in wood cell walls. To study the structure of linkage of carbohydrates in wood cell walls, we have attempted to find out the method holocellulose preparation and optimum condition of enzyme hydrolysis in holocellulose, and fractionate oligosaccharide with products that hydrolized partly by acetolysis and deacetylation in holocellulose. We have achieved four results. These results as follow; 1. At first. we reacted in wood meal $NaClO_2$ 1g per lignin lg for one hour and then the same of quantity $NaClO_2$ for four hours. Through these experiments, we have developed new holocellulose preparation method which had low loss of carbohydrates and high effect of the delignification. 2. The optimum condition of enzyme hydrolysis of holocellulose which had lignin was 0.005M sodium acetate buffer (pH 5.0). We have achieved 7.2% reducing sugar through the procedure that reactioned 0.01g holocellulose putting enzyme 0.03g for 72 hours. It may be supposed that 5.5% of lignin contained in holocellulose prevented enzyme contaction from holocellulose and so this lignin has resulted in the low efficiency of enzyme hydrolysis. 3. We did not fractionated from oligosaccharides which were preparated by the method of acetolysis and deacetylation in holocellulose. The reason is that holocellulose having a lot of lignin prevented prefectly partial hydrolysis from the method of acetolysis and deacetylation. 4. We attempted analysis of six standard substances through HPLC apparatus having sugar pak 1 column which we have changed flow rate and the column temperature variably. These six standard substances were D-glucose, D-mannose, D-xylose, D-galactose and L-rhamnose, L-arabinose, But sugar pak 1 column was not fitted analysis of four substances because D-galactose, D-mannose, D-xylose, L-rhamnose were agreement with elution time. And so, we could not analize four standard substances with sugar pak 1 column.
In order to isolate antibiotic producing microorganisms, several actinomycetes were isolated from soil samples. The aerial hyphae of Y-88 strain were gray in color with tree types. Under the microscopic examination, the Y-88 isolate formed a spiral aerial spore mass with a smooth surface and a rectiflexibilis type of spore chain. Y-88 utilized glucose, fructose, arabinose, and sucrose, but not rhamnose, raffinose, mannitol, or inositol. In addition, Y-88 produced melanin on the tyrosine agar and the strain could utilize L-valine, L-phenylalanine, and L-hydroxyproline. Based on these results and the cultural and physiological characteristics described in the Bergey's Manual, the Actinomycetes, Y-88, was identificated as a Streptomyces species. The optimum medium conditions for this antibiotic producing Streptomyces sp. Y-88 was 1.6% soluble starch, 0.6% glucose, 0.6% beef extract, 0.01% $K_2HPO_4$, 0.01% $MgSO_4$$7H_2O$, and 0.01% $ZnSO_4$$7H_2O$ at an initial pH of 4.0, and 25$^{\circ}C$.
To find a new utilization of rice bran, nine higher fungi were examined for the production of exo-biopolymer with macrophage stimulating activity from rice bran. Among the exo-biopolymers produced from submerged cultures, Lentinus edodes showed the highest activity, followed by Grifola frondosa, Schizophyllum commune, and Coriolus versicolor. L. edodes also had the most potent macrophage stimulating activity in a liquid culture rather than in a solid culture. In order to improve rice bran utilization and the yield of exo-biopolymer with macrophage stimulating activity, the treatment of Rapidase effectively increased the macrophage stimulating activity (about 30% increase), whereas the other enzymes (Econase, Viscozyme, Ultraflo, Celluclast, and Thermylase) treatments did not increase the macrophage stimulating activity. Exo-biopolymer with macrophage stimulating activity from L. edodes contained mainly neutral sugars (58.7%) with considerable amounts of uronic acid (32.2%) and a small amount of proteins (9.1%). Component sugars of exo-biopolymer consisted of mainly arabinose, galactose, glucose, mannose, and xylose (0.95:0.81:0.96:1.00:0.39, respectively). When the exo-biopolymer was treated with $NaIO_4, NaClO_2$, and pronase, the $NaClO_2$ treatment and pronase digestion had little effect, whereas $NaIO_4$ oxidation significantly decreased the macrophage stimulating activity (47.6% reduction at $100\mug/ml$). Therefore, the carbohydrate moiety in exo-biopolymer from L. edodes plays an important role in the expression of the macrophage stimulating activity.
Exopolysaccharides (EPSs) are microbial polysaccharides that are released outside of the bacterial cell wall. There have been few studies on EPS-producing lactic acid bacteria that can enhance macrophage activity and the underlying signaling mechanism for cytokine expression. In the current study, EPS-overproducing Lactobacillus (L.) paracasei KB28 was isolated from kimchi and cultivated in conditioned media containing glucose, sucrose, and lactose. The whole bacterial cells were obtained with their EPS being attached, and the cytokine-inducing activities of these cells were investigated. Gas chromatography analysis showed the presence of glucose, galactose, mannose, xylose, arabinose, and rhamnose in EPS composition. EPS-producing L. paracasei KB28 induced the expression of tumor necrosis factor (TNF)-${\alpha}$, interleukin (IL)-6, and IL-12 in mouse macrophages. This strain also caused the degradation of $I{\kappa}B{\alpha}$ and phosphorylation of the major MAPKs: Jun N-terminal kinase (JNK), p38, and extracellular signal-regulated kinase (ERK)1/2. The use of pharmacological inhibitors showed that different signaling pathways were involved in the induction of TNF-${\alpha}$, IL-6 and IL-12 by L. paracasei KB28. Our results provide information for a better understanding of the molecular mechanisms of the immunomodulatory effect of food-derived EPS-producing lactic acid bacteria.
The carbon utilizations of Bacillus species and Pythium species were investigated by using a Biolog$^{(R)}$ microplate assay to determine if there are differences in the carbon utilizations of selected strains of these species. It may be possible to afford a competitive advantage to bacterial biological control agents by providing them with a substrate that they can readily use as a carbon source, for example, in a seed coating formulation. Microplates, identified as SFP, SFN and YT were used to identify spore-forming bacteria, nonspore-forming bacteria, and yeast, respectively. Bacterial and mycelial suspensions were adjusted to turbidities of 0.10 to 0.11 at 600 nm. One hundred microliters of each of the bacterial and mycelial suspension were inoculated into each well of each of the three types of microplates. L-arabinose, D-galactose, D-melezitose and D-melibiose of the 147 carbohydrates tested were found to be utilized only by bacteria, and not by Pythium species, by Biolog$^{(R)}$ microplate assay, and this was confirmed by traditional shake flask culture. Thus, it indicated that the Biolog$^{(R)}$ microplate assay could be readily used to search for specific carbon sources that could be utilized to increase the abilities of bacterial biological control agents to adapt to contrived environments.
Kim, Kil-Nam;Kim, Soo-Hyun;Kim, Won-Suk;Kang, Sung-Myung;Lee, Ki-Wan;Lee, Wook-Jae;Park, Soo-Yeong;Kim, Se-Kwon;Jeon, You-Jin
Food Science and Biotechnology
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v.17
no.5
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pp.976-982
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2008
The 10 species of marine green algae was collected from Jejudo(Island) in Korea. Methanolic and aqueous extracts were prepared and screened for inhibition activities against tumor cell growth. Of the tested samples, the sea staghorn (Codium fragile) aqueous extract (CFAE) showed the highest activity on CT-26 cell growth. Therefore, CFAE was selected for further experiments and the possibility to induce apoptosis by the CFAE was investigated. Flow cytometric analysis revealed that it dose-dependently increased apoptotic cells with hypodiploid DNA contents in CT-26 cell line. These results indicated that CFAE can suppress the growth of CT-26 cells through apoptosis. The CFAE decreased the protein expression of anti-apoptotic Bcl-xL and led to the activation of caspase-3 and -7. A crude polysaccharide was separated from CFAE and it mainly constituted with 61.2% galactose and 30.5% arabinose as analyzed by high performance liquid chromatography (HPLC).
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[게시일 2004년 10월 1일]
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