본 연구에서는 홍화자 추출물이 항염증에 대한 실험연구가 이루어져 있지 않은 것에 착안하여 LPS에 의해 활성화된 대식세포로부터 유도되는 염증반응에 대한 억제효과를 조사하였다. 홍화자 추출물을 이용하여 피부 염증에 대하여 연구를 하였다. 산화질소와 cytokine의 생산은 면역세포의 대표적인 염증인자이다. 세포는 LPS 처리 후 한 시간 뒤에 홍화자 추출물을 처리를 하였다. 세포 독성이 나타나지 않는 농도인 5, 10, 25 및 50 ${\mu}g/ml$를 사용하였다. 홍화자의 에틸아세테이트 분획물은 NO, $PGE_2$, TNF-${\alpha}$, IL-$1{\beta}$, IL-6, iNOS, COX-2의 생성을 저해 시켰다. $PGE_2$는 50 ${\mu}g/ml$의 농도에서 60%에 가까운 저해율을 나타내었다. iNOS와 COX-2 역시 ${\mu}g/ml$의 농도에서 각각 54%, 65%가 저해가 되었다. 게다가 홍화자 에틸아세테이트 분획물은 염증성 사이토카인인 TNF-${\alpha}$, IL-$1{\beta}$, IL-6의 생성을 감소 시켰다. 이러한 결과로 홍화자 추출물은 염증 예방과 치료에 효과적임을 확인 할 수 있었다.
A large number of edible seaweeds are consumed by the coastal peoples of Asia. Some of them are used in traditional remedies in many parts of the world. In this study we investigated effects of supplementation with ethyl acetate extracts of the brown alga Eisenia bicyclis (EBE) on rat macrophage to evaluate the possibilities as immune-modulators. Twelve male SD rats were divided into two groups and the treatments were as follows: A, no Eisenia bicyclis extract (EBE) intake and distilled water ; B, oral supplemented with EBE 200 mg/kg. After 5 weeks of supplementation, rats were sacrificed to assess the effect on peritoneal macrophage functions. We showed no increasing effects on tumoricidal activity, phagocytic activity and NO production in macrophages in EBE supplementation group. However, EBE supplementation suppressed NO-iNOS production and p65 translocation into the nucleus in LPS-stimulated macrophages. Overall, these results suggest that the supplementation of EBE might have an anti-inflammatory effects on NO-iNOS production in macrophages throughout the inhibition of NF-${\kappa}B$ activation.
Chung-Sang (CS) is an experimental herbal remedy that is formulated to treat respiratory diseases implicated by inflammation. The herbs comprised of CS are frequently prescribed for treating various inflammatory symptoms: Menthae haplocalycis Herba, Magnoliae Flosis, Xanthii Fructus, Herba Asari, and Caryphylli Flos. Here, we prepared the extract of CS with boiling water (wCS) or with 50 % ethanol (eCS) and examined whether the two different extracts of CS exhibit a toxicity to cultured cells and mice. RAW 264.7 cells were treated with wCS or eCS, and the cytotoxicity of these extracts to RAW 264.7 cells was determined by an MTT assay. Although the production of intracellular reactive oxygen species that are detrimental to the cells was not increased by the extracts, the cytotoxicity to the cells was evident from 10 mg/ml of wCS and 100 mg/ml of eCS, suggesting that eCS is less cytotoxic. When mice (n = 10/group) received a single intratracheal wCS or eCS daily for 14 days, wCS yielded 40 % mortality, whereas eCS showed none. Both wCS and eCS did not significantly affect the weight of the body and of vital organs, except the lung. Biochemical analyses of mice blood indicated no damage to liver or kidney. However, unlike eCS, wCS significantly increased the level of IgE in serum. Collectively, our results show that eCS was less toxic than wCS, suggesting that CS prepared with 50 % ethanol is preferential over the conventional way of preparing CS.
Oxidative stress and inflammation are important events in the development of chronic inflammatory diseases including arthritis, atherosclerosis, diabetes, hypertension. Cynomorium songaricum (CS) has been used as a traditional Korean herbal medicine, and it is currently used in traditional clinics to treat frequent urination, spermatorrhea, weakness of the sinews and constipation in the folk medicine. The aim of this study was to determine whether fractionated extracts of CS inhibit free radical generation such as DPPH radical, superoxide radical, nitric oxide and peroxynitrite, production of nitrite an index of NO, $PGE_2$, iNOS, COX-2 and pro-inflammatory cytokines in lipopolysaccharide (LPS)-treated RAW 264.7 macrophages. Cytotoxic activity of extracts on RAW 264.7 cells was measured using 5-(3-caroboxymeth-oxyphenyl)-2H-tetra-zolium inner salt (MTS) assay. Our results indicated that the most superior extract which scavenged DPPH radical, reactive oxygen species (ROS) and RNS was CS ethyl acetate extract (CSEA). Moreover, CSEA significantly inhibited the LPS-induced NO, $PGE_2$ production and iNOS, COX-2 expression accompanied by an attenuation of TNF-$\alpha$, IL-$1{\beta}$ and IL-6 formation in macrophages. Furthermore, CSEA treatment also blocked LPS-induced intracellular ROS production and the activation of NF-${\kappa}B$. These findings indicate that CSEA inhibits the production of pro-inflammatory mediators and cytokines via the suppression of ROS production and NF-${\kappa}B$ activation. Take together, these results indicate that CSEA has the potential for use as an natural anti-oxidant and an agent of anti-chronic inflammatory diseases.
Lonicerae Flos (LF) has been used as an anticancer, anti-viral, and anti-inflammatory agent in traditional herbal medicine. In this study, induction of rat growth hormone (rGH) by addition of methanol (MeOH) extract of LF of Lonicerae (L.) Folium or several constituents of L. Folium were carried out in the pituitary cell culture system. Induced rGH level by addition of 70% MeOH extract of LF was increased to $732.65{\pm}105.64%$ of control (n=18, p<0.01), however, the other sequential fractions were not significantly different from the control. Ochnaflavone, a constituent of L. Folium, induced rGH level in the cell culture to $329.73{\pm}160.00%$ of control (n=6, p<0.01). An I..v. injection of the MeOH extract of LF did not increase plasma rGH level in anesthetized rats. Unfortunately, the MeOH extract of LF induced prolactin and LH release about 7 and 5 fold of the control, respectively (p<0.05, each). In conclusions, 70% MeOH extract of LF exerted induction of rGH release in rat pituitary cell culture. Further studies to investigate mechanisms of the inducded rGH by LF are in progress.
Objectives : Recently there have been encouraging results, from a western perspective, in the cancer research field regarding the anticancer effects of herbal medicine. This paper was aimed to review herbal medicine playing its anticancer role in terms of apoptosis, inflammation control, differentiation and telomerase. Methods : New studies for tang, medicinal herb itself or effective ingradients of medicinal herb showing anti-cancer effectiveness were reviewed and summarized in terms of pharmacological action. Results : Ethanol extracts of $Spatholobus$$suberectus$ greatly inhibited cancer cell growth inducing cell apoptosis and cytotoxic effects. $Scutellaria$$baicalensis$ may be responsible for its anticancer activity showing inhibition of $PGE_2$ synthesis via suppression of COX-2 expression. Saikosaponins isolated from $Bupleurum$ induced the differentiation of C6 glioma cells, cancer cells, into astrocytes, normal cells. Acetone extract of $Bupleurum$$scorzonerifolium$ inhibited proliferation of human lung cancer cells via inducing apoptosis and suppressing telomerase activity. Conclusions : Herbal medicine inhibited cancer cell growth inducing cell apoptosis and cytotoxic effects. Inflammation persisting for a decade eventually elevates the risk of cancer sufficiently that it is discernible in case control epidemiological studies. Differentiation therapy is defined as a therapy to treat cancers by inducing differentiation of the stem cells. Telomerase expression is a hallmark of cancer. Nearly the complete spectrum of human tumors has been shown to be telomerase positive.
Purpose : The purpose of this study was to examine the anti-inflammatory effects of Sparassis crispa (SC). SC is a well-known traditional herbal remedy and its mushroom is used for treatment of inflammation. Many diseases that are increasing recently have characteristics of inflammatory diseases. Researchers are finding bioactive substances from natural products that can promote treatment and prevention of inflammation. We investigated the effect of water extracted from SC on the expression of effector genes involved in the function of RAW 264.7 cells. Methods : Effects of RAW 264.7 cells on cell viability, antioxidation, and mRNA expression were examined using water extracts from SC. A 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium (MTS) assay was performed to determine the effect of water extracts from SC on cell viability in RAW 264.7 cells. Inflammation of RAW 264.7 cells induced by lipopolysaccharide (LPS) treatment and expression levels of inflammatory cytokine TNF-α, iNOS and IL-1β gene were analyzed using quantitative reverse transcription PCR (qRT-PCR) analysis. Results : The MTS assay was performed on RAW 264.7 cells after treatment with various concentrations of water extracts of SC. Treatment of RAW 264.7 cells with water extracts from SC and LPS at a concentration of 0.125, 0.5 mg/㎖ for twenty four hours promoted mRNA expression of TNF-α, iNOS and IL-1β. Conclusion : MTS assay was applied to RAW 264.7 cells after various concentrations of water extracts of SC. Through experimental demonstration of anti-oxidant and anti-inflammatory effects of water extracts from SC, we suggest that SC is a valuable material for the prevention and treatment of various inflammatory diseases.
Objectives : Ojeok-san, a traditional herbal formula, has been used for the treatment of cold illness and its related symptoms such as headache, nausea and indigestion. This study was performed to compare effects of water (OJSW) and 70% ethanol extracts (OJSE) of Ojeok-san on inflammation and its related diseases atopy, asthma and obesity in vitro. Methods : We performed HPLC to investigate contents of index components of OJSW and OJSE. We investigated the effects of OJSW and OJSE with an in vitro model, using 5 cell lines, specifically RAW 264. 7, HaCaT, MC/9, BEAS-2B and 3T3-L1. Results : HPLC analysis displayed that the contents of index components were higher in OJSE than OJSW. In lipopolysaccharide (LPS)-treated RAW 264.7 macrophages, OJSE significantly inhibited productions of interleukin (IL)-6, nitrite and prostaglandin $E_2$ ($PEG_2$). In TNF-${\alpha}$/IFN-${\gamma}$-treated HaCaT keratinocytes, OJSE significantly lowered levels of macrophage-derived chemokine (MDC) as well as regulated and normal T cell expressed and secreted (RANTES). OJSE also had a protective effect on inflammatory response by decreasing RANTES secretion in TNF-${\alpha}$-stimulated BEAS-2B cells. Conclusions : We conclude that OJSE could be more appropriate to enhance the biological activities against inflammation and its related diseases, and could be applied as a bioactive material for developing the potent anti-inflammatory agents.
Objective : Herbal processing is one of the traditional techniques used in Korean medicine to increase the effectiveness of herbs or reduce their toxicity. In this study, Gardeniae Fructus processed with ginger juice and alcohol was prepared to evaluate the anti-inflammatory effect on lipopolysaccharide (LPS)-induced macrophages. Methods : The processing of Gardeniae Fructus was performed by adding 40 % ginger juice or 10% alcohol to the total weight of Gardeniae Fructus and then roasting at 150℃ for 5 minutes. Cell viability was determined by 3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay. To detect nitric oxide (NO) production, culture media were mixed with Griess reagent and measured the absorbance at 540 nm. Prostaglandin E2 (PGE2) and pro-inflammatory cytokines were detected by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Western blot was applied to monitor protein expression levels. Results : LPS-induced NO, PGE2 and inflammatory cytokines were decreased by the treatment of normal or processed Gardeniae Fructus ethanol extracts (GFE). Compared to normal GFE, the processed GFE showed a stronger inhibitory effect on the production of NO and PGE2. These inhibitory effect of GFE was due to the suppression of inducible nitric oxide synthase (iNOS) and cyclooxygenase-2 (COX-2) mediated from the inhibition of nuclear factor kappa B (NF-κB). Furthermore, processed GFE showed more suppressive effects on the expression of iNOS, COX-2 and IκBα proteins than normal GFE. Conclusion : From these results, it was concluded that GFE had an improved anti-inflammatory effect compared to normal GFE. These results provide an objective evidences for the use of herbal processing in Korean medicine.
Polygoni Multiflori Radix (PMR), a dried root tuber of Polygonum multiflorum Thunberg with bioactivities in bone metabolism is one of the most famous tonic traditional medicines. To observe in vivo anti-osteoporotic efficacy of PMR extracts, we orally administered once a day for 28 days (Qd ${\times}$ 28) to bilateral ovariectomized (OVX)-induced osteoporosis ddY mice after 1 week of recovery periods at 125, 250 and 500 mg/kg (of body weight). A positive control drug, Alendronate (FOSA) 10 mg/kg-dosing group was added. As results of OVX-induced osteoporotic process, estrogen-deficient osteoporotic changes were also dramatically decreased in all PMR extracts-dosing groups. Especially middle dosage of PMR extracts, 250 mg/kg constantly and significantly (p < 0.01 or p < 0.05) inhibited the loss of bone strength and bone quality. Based on the results, it was concluded that PMR extracts (125, 250 or 500 mg/kg; orally dosing) has relatively good favorable effect to prevention and/or treatment of OVX-induced osteoporosis. Therefore, although the efficacy was slighter than that of Alendronate on the inhibition of bone loss, it is expected that PMR extracts will be promising as a new anti-osteoporotic agents for prevent the fracture induced in osteoporotic patients because natural herbal medicine origin PMR extracts will be dose not show serious side effects especially the problem in upper alimentary irritation by bisphosphonate and hypercalcaemia of parathyroid hormone analogs.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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