In order to investigate the meat tenderizing effects of pear, pineapple and kiwifruit, crude protease was prepared from each fruit and treated with actomyosin in a single manner or mixed type in several combination. Actomyosin was incubated with various proteases for 24 hrs under three different pH condition, and its degrading performance was evaluated by the SDS-PAGE. Pear extract showed an active degrading activity for actomyosin at pH 5.3 and 7.0. But, little actomyosin degradation was observed at pH 8.0. Actomyosin was strongly degraded by the treatment of protease from pineapple at all different pHs(5.3, 7.0 and 8.0). Kiwifruit protease extract has shown actomyosin degradation activity 1hr after treatment at pH 5.3 and pH 7.0. Meanwhile, the mixture of pear and pineapple extracts(l:l, w/w) showed much more degradation than the results of singular manner treatment at pH 5.3 and 7.0. When the pear protease was mixed with kiwifruit protease(l:l, w/w), the performance of actomyosin degradation was similar to the results of each single protease treatment. When the mixture was made of pineapple and kiwifruit extracts, actomyosin degradation was almost the same as the result of treatment of pineapple protease only. When those three proteases were mixed together(l:l:l, w/w/w), actomyosin degrading activities was in time dependent manner at pH 5.3. In summary, pear protease can be used potentially as a meat tenderizer when it was mixed with pineapple or kiwifruit rendering proper tenderization of the meat.
This study was conducted for the isolation, purification, and characterization of a protease from Korean pear, to see its proteolytic activity on chicken actomyosin and to find the optimum pH and temperature of activity on chicken actomyosin. The protease was isolated from crude extract of Korean pear by ammonium sulfate precipitation. Further purification was done by DEAE-Sepharose ion-exchange chromatography, Mono-Q and Mini-Q column chromatography. The purified enzyme gave a single protein band on SDS polyacrylamide gel electrophoresis and the molecular weight was found to be 38 kDa. The specific activity of purified enzyme was 34,907 unit/mg with 25 fold purification and the yield was 2%. The purified enzyme incubated with chicken actomyosin showed high activity. The optimum pH and temperature for enzyme activity on chicken actomyosin were 6.5 and $70^{\circ}C$, respectively. A protease was purified from Korean pear for the first time and characterized. It was found to be promising for meat tenderization.
Studies on the tenderizing effect of fruits has been limited even though fig, kiwifruit, pear, and pineapple cultivated in Korea are utilized commonly during cooking for their proteolytic properties. Therefore, the characteristics of these fruits were investigated by treating beef with their crude protease extracts. The protease effects of crude protease extract from the fruits on casein and myofibrilar protein were in the following order : pineapple > kiwifruit > fig > pear. Electrophoretic analysis results found that pineapple, kiwifruit, and fig cleaved myosin heavy chain into smaller fragments. The myofibrilar fragmentation ratio of crude protease extracts was the highest for pineapple whileas the lowest for pear. Ground fruits (5% and 10%) increased amounts of soluble nitrogen and decreased shear force of beef. Pineapple was the most effective while pear was the least effective. Decrease in springiness and gumminess was observed by texture profile analysis of beef treated with fruits, especially pineapple and kiwifruit. Among the 5% treatments, pineapple and kiwifruit produced the highest tenderness. Additionally, 10% treatment was less preferable than the 5% treatment.
Kluyveromyces fragilis KCTC 7260 and Saccharomyces cerevisiae KCTC 7904, which both grew well in pear marc extract, were selected and their growth profiles and physiological functionalities were determined. Both of the selected yeasts established maximal growth by 20 hr of cultivation at $30^{\circ}C$ in pear marc extract. The cell-free extracts showed high antihypertensive angiotensin I-converting enzyme inhibitory activity of 68.9% and 52.1%, respectively. The extracts also displayed 9.2 U/mL and 12.0 U/mL of protease activity, respectively.
Kim, Seung Yeol;Chung, Hai Jung;Kim, Seung Kyeom;Shin, Cheol Seung
Korean Journal of Agricultural Science
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v.16
no.2
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pp.225-238
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1989
These studies were conducted to investigate the extraction, purification and characterization of oriental pear (Niitaka. Pyrus pyrifolia Nak.) protease, and the results obtained were as follows: 1. Oriental pear protease was effectively extracted by the method of homogenizing pear pulp with 0.7 volume of 0.1M-sodium phosphate buffer, pH 6.5 containing 5mM-cysteine, 40mM-2-mercaptoethanol and 2mM-EDTA at 10,000 rpm for 5 min. 2. The protease was purified by ammonium sulfate fractionation, Sephadex G-100 filtration and DEAE-Sephadex A-50 column chromatography, and the purified enzyme gave a single protein band on polyacrylamide gel electrophoresis. 3. The specific activity of purified enzyme was 29.65 unit/mg protein and the yield was 7.22%. 4. The moecular weight of the protease was estimated to be about 51,000 by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis, and the enzyme had Km value of 54.5 mg/ml for casein. 5. The purified enzyme had a maximum activity at pH 6.0 and $50^{\circ}C$, and was stable from pH 5.5-6.5 and at temperatures below $50^{\circ}C$ 6. Casein was a better substrate for this protease compared to hemoglobin. 7. The enzyme activity was markedly inhibited by p-chloromercuribenzoic acid and heavy metal salts such as $HgCl_2$ and $MnSO_4$ also considerably inhibited the enzyme activity.
Journal of the Korean Society of Industry Convergence
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v.25
no.6_2
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pp.1009-1015
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2022
The purpose of this study was to investigate the effects of protease in Letinus edodes, Agaricus bisporus and Pear powder after freeze drying which has the ratio of 3% on the Tenderness of the Beef Eye of Round muscle. It were marinated in distilled water (Control), 3% Letinus edodes powder (L3), 3% Agaricus bisporus powder (A3), and 3% Pear powder (P3). As a result, enzyme activities were highest in Agaricus bisporus (p<0.001). There are significant difference in pH (p<0.001), color of the beef were slightly different between the C (control) group and the sample groups. The cooking loss showed the lowest value in the control and the highest value in the water holding capacity of Agaricus bisporus. In addition, Agaricus bisporus showed the lowest shear force values than the other sample groups(p<0.001).
In order to develop new valuable pear marc nuruk and further, reduce environmental pollution by pear marc from pear juice processing, we prepared pear marc nuruk by incubation of Aspergillus oryzae into pear marc containing 50% of moisture at $30^{\circ}C$ for 7 days. ${\alpha}$-Amylase and glucoamylase activities of the pear marc nuruk were 320.2 IU and 442.8 IU, respectively and its acidic protease activity was showed 142.6 IU. After brewed makgeolli by using the pear marc nuruk, cooked rice and Saccharmyces cerevisiae, its physicochemical characteristics was investigated. Ethanol content of pear marc nuruk-makgeolli was 6.8% after fermentation at $25^{\circ}C$ for 10 days and also pear marc makgeolli showed 45.6% of antihypertensive angiotensin I-converting enzyme (ACE) inhibitory activity. In conclusion, pear marc nuruk had high amylase activity and pear marc-makgeolli had also good fermentation characteristics and antihypertensive ACE inhibitory activity. Therefore, it has the potential to become a new nuruk for brewing makgeolli.
This study was attempted to compare the properties of proteolytic enzymes in fruits(Pear, Kiwifruit, Fig, Pineapple and Papaya) for the application of scientific information to cooking. The results were as follows: 1. The optimum temperature of crude proteolytic enzymes in pear, fig and pineapple is 60$^{\circ}C$ and it was relatively active in 40-70$^{\circ}C$; papaya showed max. activity in 60$^{\circ}C$ and highly stable activity in 40-80$^{\circ}C$, but kiwifruit showed max. activity in 40$^{\circ}C$ and it maintained to 70$^{\circ}C$. 2.. The crude proteolytic enzymes of pear, fig, pineapple and papaya showed opt. pH at pH 7.0 and maintained at pH 5.0-8.0, but max. activity of kiwifruit observed in pH 3.0 and pH 5.0-8.0. 3. As a result of comparison of total activities of fruits per kg unit, the order of activities was pineapple > kiwifruit > papaya > fig > pear.
Domestic pear has been reported that it contained a pretense, which used for tenderizer of meat, however no researches for optimum level of the enzyme with maximum tenderness effect have been studied. Thus, this study was peformed to determine the optimum level of a protease for meat tenderness. Moisture contents (%) of domestic pears was determined. A pretense was homogenized in a mixer and centrifuged at 10,000 G for 1hr. After taken the supernatant, dialysis was conducted to remove salts and sugars, and freeze-dried. Then, various level (0.05, 0.1 and 0.2%) of the purified pretense were added to pork loins (3cm thickness). Then, pork samples were boiled at 80 for 12 min in a water bath to reach the interval temperature of 71 and chilled in an ice. Moisture contents (%) of domestic pears ranged from 87.2 and 87.8%. No differences in cooking loss of pork meats were observed (p>0.05) among various levels of a pretense. After centrifugation, the protein concentrations of a protease showed from 5.96 $\mu\textrm{g}$/fmL to 7.25 $\mu\textrm{g}$/mL. Increased level of a pretense up to 0.1% reduced (p<0.05) the shear value (kg/g), however no further reduction of shear value was observed at the level of higher than 0.1% of the purified pretense. The approximate molecular weight of the pretense analysed by sodium-dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) was 30 kDa. These results suggest that the optimum level of a pretense for the maximum effect of meat tenderness is above 0.1%. Further research will be peformed to determine the effect of various domestic pears and ingredients, such as salt and phosphate, on meat tenderness.
In order to study the tenderizing effect of proteolytic enzymes in fruits, beef(M. semimembranosus) was marinated with meat sauce containing each fruit juices. After cooking, the shear force was measured by Rheometer and evaluated the sensory properties of beef by quantitative descriptive analysis method. The results are as follows: 1. The combination ratio of meat sauce:water was 2:1 with pH 5.0∼5.5 showed the max. tenderness. 2. As a result of shear force test, the decrease of shear force was pineapple>papaya>fig>kiwifruit>pear: especially, pineapple, papaya and fig tendered the beef significantly comparing with pear and kiwifruit at p<0.001. 3. The tendering effect of pineapple and papaya on the meat showed significant difference (p<0.01) comparing with pear in tenderness and overall acceptability by sensory evaluation; and there was a significant difference between pear and papaya in taste (p<0.05). 4. There was highly significant correlation between mechanical tenderness and sensory properties: correlation of fruit and mechanical tenderness was -.877(p<0.01); between mechanical tenderness and overall acceptability, r = .532(p<0.01); between fruit and sensory tenderness, r = .495(p<0.01); between mechanical tenderness and sensory tenderness, r = .490(p<0.01). At p<0.05, between taste and juiciness, r = .208.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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