Toxoplasma gondii tachyzoites were isolated from the blood of an ocular patient, and have been successfully passaged in the laboratory, for over a year, by peritoneal inoculation in mice. The isolated parasite was designated the Korean Isolate-1 (KI-1) and its characteristics were compared with those of the RH strain, a well-known virulent strain originating from a child who suffered from encephalitis. The morphology, pathogenicity, infectivity and cell culture characteristics of the KI-1 were similar to those of the RH strain. Both RH and KI-1 antigens were detected by an anti-T gondii monoclonal antibody (mAb), Tg563, against the major surface protein SAG1 (30 kDa), whereas no reaction was observed against an anti-Neospora caninum mAb, 12B4. The KI-1 was confirmed as an isolate of T. gondii. A long-term laboratory maintenance and characterization of a local T gondii isolate is reported for the first time in the Republic of Korea.
Although the Korean isolate KI-1 of Toxoplasma gondii has been considered to be a virulent type I lineage because of its virulent clinical manifestations, its genotype is unclear. In the present study, genotyping of the KI-1 was performed by multilocus PCR-RFLP and microsatellite sequencing. For 9 genetic markers (c22-8, c29-2, L358, PK1, SAG2, SAG3, GRA6, BTUB, and Apico), the KI-1 and RH strains exhibited typical PCR-RFLP patterns identical to the type I strains. DNA sequencing of tandem repeats in 5 microsatellite markers (B17, B18, TUB2, W35, and TgM-A) of the KI-1 also revealed patterns characteristic of the type I. These results provide strong genetic evidence that KI-1 is a type I lineage of T. gondii.
To evaluate the usefulness of the Korean Isolate-1 (KI-1) antigen for serodiagnosis of toxoplasmosis, antigen profiles of KI-1 tachyzoites were analyzed in comparison with RH tachyzoites by SOS-PAGE and immunoblotting. ELISA was performed on latex agglutination (LA)-positive and negative serum samples using KI-1 and RH antigens. Immunoblotting of the KI-1 antigen showed multiple antigen bands with molecular sizes of 22-105 kDa. Among them, 1 and 6 common bands were noted against a KI-1-infected and a RH-infected human serum, respectively, which represented differences in antigenic profiles between KI-1 and RH tachyzoites. However, all 9 LA-positive human sera were found positive by ELISA, and all 12 LA-negative sera were negative by ELISA; the correlation between the ELISA titers and LA titers was high (r = 0.749). Our results suggest that tachyzoites of KI-1 may be useful for serodiagnosis of human toxoplasmosis.
We have previously obtained a representative isolate KU101 of the predominant Penicillium species from rice under indoor storage conditions. In this study we attempted to characterize isolate KU101 using its morphological and molecular characteristics. When the micro- and macroscopic characteristics of isolate KU101 were compared with the P. islandicum reference isolate KCCM 34763, isolate KU101 was generally identical to those of isolate KCCM 34763, however, isolate KU101 grew faster and produced more orange to red pigments than isolate KCCM 34763. In a molecular-based identification, the nuclear sequence of the ITS1-5.8S-ITS2 region of isolate KU101 was most closely related to that of P. islandicum. Therefore, these results indicated that isolate KU101 from stored rice could be identified as P. islandicum, some isolates of which are known to produce mycotoxins.
We isolated the Cucumber green mottle mosaic virus(CGMMV) particles from watermelon leaves and designated as CGMMV-HY1 as a watermelon isolate and attempted to characterize the pathogenic isolate responsible for such an epidemic in watermelon and also to monitor dominant viral isolates in greenhouse. The watermelon plants infected with CGMMV generally showed mottle mosaic, mosaic, growth stunting, necrosis and deformed fruit. The reactions of indicator plants to CGMMV-HY1 were the local lesions on Nicotiana tabacum cv. White Burley, Nicotiana tabacum cv. Samsun, and Chenopodium amaranticola, and the mosaic symptoms only on Cucumis sativus, but the CGMMV-HY1 did not infect Nicotiana sylvesytis, Datura stramonium, Chenopodium quinoa, and Petunia hybrida. Purified virus particles were rod-shaped and about 300 nm long. The coat protein (CP) of purified CGMMV-HY1 was single band with molecular weight of about 16.5 kDa which was confirmed by western blot analysis probed with monoclonal antibody of CGMMV-HY1. The genomic and subgenomic RNAs of 6.4 kb and 0.75 kb were revealed by the electrophoresis on 1.2% formaldehydedenatured agarose gel. Viral and complementary CGMMV-specific primer sets were designed for spanning the genome using previously reported CGMMV sequences. A 464bp of CP gene of CGMMV-HY1 was amplified by RT-PCR and cloned into PGEM-T easy vector. The nucleotide sequence of CP gene of CGMMV-HY1 shared 98%, 99%, and 100% identities with that of CGMMV strains W, KOM, and KW respectively. Based on these results, we identified CGMMV-HY1 as a CGMMV isolate of watermelon, a member of Tobamovirus.
Wakabayashi, Chizuha;Lim, Hyunju;Shin, Min Jun;Choi, Myoung Gwang;Kim, Min Sun;Kim, Ki Hong
Journal of fish pathology
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v.31
no.1
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pp.15-21
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2018
Differences in in vivo virulence and in sensitivity to drugs among different isolates of Miamiensis avidus were analyzed. The isolate III showed the highest resistance against the scuticocidal activity of olive flounder (Paralichthys olivaceus) serum, and induced the highest mortalities of olive flounder fingerlings. The isolate II showed significantly higher serum resistance than the isolate I, but in vivo virulence of isolate II was not significantly different from that of isolate I. The secreted proteinases activity of isolate III was significantly higher than that of isolate I and II, and the activity was significantly reduced by the addition of E-64, a cysteine proteinases inhibitor. There were no differences among isolates in the sensitivity to doxycycline, however, there were significant differences in sensitivities to mebendazole and bithionol. These results suggest that the different characteristics of different M. avidus isolates should be taken into consideration for the development of control measures against scuticociliatosis.
LIN Aifen;SHIN Eun-Hee;KIM Tae-Yun;PARK Jae-Hwan;GUK Sang-Mee;CHAI Jong-Yil
Parasites, Hosts and Diseases
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v.43
no.1
s.133
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pp.27-32
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2005
Toxoplasma gondii tachyzoites were isolated from an ocular patient in the Republic of Korea and maintained in the laboratory (designated KI-1). In the present study, its genotype was determined by analyzing dense granule antigen 6 (GRA6) gene and surface antigen 2 (SAG2) gene as typing markers. Digestion of the amplification products of GRA6 and of the 5' and 3' ends of SAG2, respectively, with Mse I, Sau3A I, and Hha I, revealed that KI-1 is included in the genotype I, which includes the worldwide virulent RH strain. In addition, when the whole sequences of the coding regions of SAG1, rhoptry antigen 1 (ROP1), and GRA8 genes of KI-1 were compared with those of RH, minor nucleotide polymorphisms and amino acid substitutions were identified. These results show that KI-1 is a new geographical strain of T. gondii that can be included in the genotype I.
A representative isolate KU53 of the predominant Penicillium species was obtained from rice samples from rice processing complexes of National Agricultural Cooperative Federation in Korea. In this study, isolate KU53 was identified by its morphological and molecular characteristics. The macro- and microscopic characteristics of isolate KU53 were compared with the P. fellutanum reference isolate KCTC16913 on different media; isolate KU53 was generally identical to those of the reference isolate KCTC16913. In a molecular-based identification, the ${\beta}$-tubulin and translation elongation factor 1-alpha sequences of isolate KU53 was most closely related to those of P. fellutanum. Thus, isolate KU53 from stored rice could be identified as P. fellutanum, some isolates of which are known to produce mycotoxin-related metabolites. To our knowledge, this is the first detection of P. fellutanum from stored rice in Korea.
Park, Kyoung-Joo;Cho, Kyoung-Sook;Kim, Jeong-Bo;Lee, Min-Gyu;Lee, Byung-Hun;Hong, Young-Ki;Kim, Joong-Kyun
한국생물공학회:학술대회논문집
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2005.10a
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pp.450-455
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2005
To treat wastewater efficiently by a one-step process of nitrogen removal, a new strain of $N_2-producing$ bacteria from $NH{_4}{^+}$ under an aerobic condition was isolated and identified. By 16S-rDNA analysis, the isolate was identified as Enterobacter asburiae with 96% similarity. The isolate shows that the capacity of $N_2$ production under an oxic condition was approximately three times higher than that under an anoxic condition. The optimal conditions (pH, temperature and C/N ratio) of the immobilized isolate for $N_2$ production were found to be 7.0, $30^{\circ}C$ and 5, respectively. Under all the optimum reaction conditions, the removal efficiency of $COD_{Cr}$ and TN reached 56.1 and 60.9%, respectively. The removal rates of $COD_{Cr}$ and TN were highest for the first 2.5 hrs (with the removal $COD_{Cr}$ ratios of 32.1), and afterwards the rates decreased as reaction proceeded. For application of the immobilized isolate to a practical process of ammonium removal, a continuous bioreactor system exhibited a satisfactory performance at HRT of 12.1 hr, in which the effluent concentrations of $NH{_4}{^+}-N$ was measured to be 15.4 mg/L with its removal efficiency of 56.0%. The maximum removal rate of $NH{_4}{^+}-N$ reached 1.6 mg $NH{_4}{^+}-N/L/hr$ at HRT of 12.1 hr (with N loading rate of 0.08 $Kg-N/m^3-carrier/d)$. As a result, the application of the immobilized isolate appears a viable alternative to the nitrification-denitrification processes.
Kim, Ki-Myong;Hanna, Milford A.;Weller, Curtis L.;Cho, Sung-Hwan;Choi, Sung-Gil
Food Science and Biotechnology
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v.15
no.4
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pp.631-634
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2006
Soy protein isolate (SPI) films were supplemented with cinnamaldehyde (CA) at concentrations of 0.1-0.5 mL/5 g SPI. The effects of CA on film color, tensile strength (TS), percent elongation at break (E, %) and water vapor permeability (WVP) of SPI films were investigated. Generally, total color difference (${\Delta}E$), WVP, and TS of SPI films increased gradually, while E and TSM decreased significantly (p<0.05) as the amount of cinnamaldehyde in the SPI films increased. Cinnamaldehyde can be used as a potential cross-linking agent for preparing SPI films by improving mechanical strength and water resistant properties.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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