The tissue blot immunobinding assay (TBIA) is widely used for the detection and localization of plant viruses in various plant tissues. The basic experimental procedures of TBIA sampling and blotting were simplified using commercially available micropipette tips. This method was termed the ring-blot immunobinding assay (R-BIA), as the blot on the membrane forms a ring shape. The detection efficacy of R-BIA was tested for two chili pepper viruses, pepper mild mottle tobamovirus (PMMoV) and pepper mottle potyvirus (PepMoV), following the optimized serological procedures of TBIA (length of the incubation period and BSA concentration, and primary and secondary antibodies). Sensitivity of the R-BIA was about 1 ng/ml of purified PMMoV in pepper leaf sap from a healthy pepper plant. R-BIA also showed high specificity in the detection of PMMoV and PepMoV. Moreover, the modified sampling and blotting procedures were simpler and more reliable than other TBIA methods (such as whole-leaf blotting and crushed-leaf blotting), suggesting that the R-BIA may be used for medium- to large-scale detection of plant viruses in laboratories with minimal facilities.
Microscopic study of chili pepper (Capsicum annuum L.) infected with Phytophthora capsici, causing Phytophthora blight of chili pepper, was conducted to compare histological and cytological characteristics in the root and stem of susceptible (C. annuum cv. Bugang) and resistant (C. annuum cv. CM334) pepper cultivars. The susceptible pepper roots and stems were extensively penetrated and invaded by the pathogen initially into epidermal cells and later cortical and vascular cells. Host cell walls adjacent to and invaded by the infecting hyphae were partially dissolved and structurally loosened with fine fibrillar materials probably by cell wall-degrading enzymes of the pathogen. In the resistant pepper, the pathogen remained on root epidermal surface at one day after inoculation, embedded and captured in root exudation materials composed of proteins and polysaccharides. Also the pathogen appeared to be blocked in its progression at the early infection stages by thickened middle lamellae. At 3 days after inoculation, the oomycete hyphae were still confined to epidermal cells of the root and at most outer peripheral cortical cells of the stem, resulting from their invasion blocked by wound periderms formed underneath the infection sites and/or cell wall appositions bounding the hyphal protrusions. All of these aspects suggest that limitation of disease development in the resistant pepper may be due to the inhibition of the pathogen penetration, infection, invasion, and colonization by the defense structures such as root exudation materials, thickened middle lamellae, wound peridems and cell wall appositions.
Kim, Byung-Soo;Kim, Young-Chun;Shin, Kwang-Sik;Kim, Jeong-Hoon
The Plant Pathology Journal
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v.23
no.3
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pp.155-160
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2007
In order to develop chili pepper bacterial spot resistant cultivars and near-isogenic lines (NILs) to prompt the molecular mapping of the resistance gene, we have run backcross breeding program since 1994. Two resistance genes against Xanthomonas axonopodis pv. vesicatoria Bs2 from Fla. XVR 3-25 and Bs3 from our breeding line 25-11-3-2, were introduced into a land race, Chilseongcho (abbreviated to Chilseong hereafter) with good fruit guality. We report here the testing of $BC_4F_3\;to\;BC_4F_5$. We found that $BC_4F_5$ lines of the crosses were homozygous with respect to the respective genes of introduction. The lines, in which Bs2 gene was introduced, were hypersensitively resistant to both race 1 and race 3 of X. axonopodis pv. vesicatoria, whereas, those in which Bs3 was introduced were resistant to race 1.
An infection risk model for Phytophthora blight on chili pepper was developed to estimate the first date of disease occurrence in the field. The model consisted of three parts including estimation of zoosporangium formation, soil water content, and amount of active inoculum in soil. Daily weather data on air temperature, relative humidity and rainfall, and the soil texture data of local areas were used to estimate infection risk level that was quantified as the accumulated amount of active inoculum during the prior three days. Based on the analysis on 190 sets of weather and disease data, it was found that the threshold infection risk of 224 could be an appropriate criterion for determining the primary infection date. The 95% confidence interval for the difference between the estimated date of primary infection and the observed date of first disease occurrence was $8{\pm}3$ days. In the model validation tests, the observed dates of first disease occurrence were within the 95% confidence intervals of the estimated dates in the five out of six cases. The sensitivity analyses suggested that the model was more responsive to temperature and soil texture than relative humidity, rainfall, and transplanting date. The infection risk model could be implemented in practice to control Phytophthora blight in chili pepper fields.
Oo, May Moe;Lim, GiTaek;Jang, Hyun A;Oh, Sang-Keun
Mycobiology
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v.45
no.3
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pp.184-191
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2017
The anthracnose disease caused by Colletotrichum species is well-known as a major plant pathogen that primarily causes fruit rot in pepper and reduces its marketability. Thirty-five isolates representing species of Colletotrichum were obtained from chili fruits showing anthracnose disease symptoms in Chungcheongnam-do and Chungcheongbuk-do, South Korea. These 35 isolates were characterized according to morphological characteristics and nucleotide sequence data of internal transcribed spacer, glyceraldehyde-3-phosphate-dehydrogenase, and ${\beta}$-tubulin. The combined dataset shows that all of these 35 isolates were identified as C. scovillei and morphological characteristics were directly correlated with the nucleotide sequence data. Notably, these isolates were recorded for the first time as the causes of anthracnose caused by C. scovillei on pepper in Korea. Forty cultivars were used to investigate the pathogenicity and to identify the possible source of resistance. The result reveals that all of chili cultivars used in this study are susceptible to C. scovillei.
Trichoderma strains were evaluated under field conditions to assay their efficacy in suppressing Alternaria fruit rot disease and promoting chili plant growth. The experiment was conducted at the Botanical Garden, Rajshahi University, Bangladesh from July 2006 to March 2007. Application of Trichoderma harzianum IMI 392432 significantly (p = 0.05) suppressed the disease compared to Alternaria tenuis (T2) treatment and improved both growth and yield. The treatment T4 (T. harzianum IMI-392432 + A. tenuis) was most effective in reducing disease percentage (72.27%) compared to A. tenuis (T1) treatment. The highest seed germination rate (85.56%) and the highest growth and yield (12.5 g/plant) was also recorded in the same treatment (T4), followed by T5 (T. harzianum IMI-392433 + A. tenuis), T6 (T. harzianum IMI-392434 + A. tenuis), T2 (T. virens IMI-392430 + A. tenuis), and T3 (T. pseudokoningii IMI-392431 + A. tenuis) treatment, while single treatment with A. tenuis significantly decreased these values.
The loci of the 5S and 45S rRNA genes were localized on chromosomes in five species of Capsicum, namely, annuum, chacoense, frutescens, baccatum, and chinense by FISH. The 5S rDNA was localized to the distal region of one chromosome in all species observed. The number of 45S rDNA loci varied among species; one in annuum, two in chacoense and frutescens, and chinense, and four in baccatum, with the exceptions that 'CM334' of annuum had three loci and 'tabasco' of frutescens gad one locus. 'CM334'-derived BAC clones, 384B09 and 365P05, were screened with 5S rDNA as a probe, and BACs 278M03 and 262A23 were screened with 25S rDNA as a probe. Both ends of these BAC clones were sequenced. FISH with these BAC probes on pachytenes from 'CM334' plant showed one 5S rDNA locus and three 45S rDNA loci, consistent with the patterns on the somatic chromosomes. The 5S rDNA probe was also applied on extended DNA fibers to reveal that its coverage measured as long as 0.439 Mb in the pepper genome. FISH techniques applied on somatic and meiotic chromosomes and fibers have been established for chili to provide valuable information about the copy number variation of 45S rDNA and the actual physical size of the 5S rDNA in chili.
Jo, Eun Ju;Kang, Bum Gwan;Jang, Kyoung Soo;Choi, Yong Ho;Kim, Jin-Cheol;Choi, Gyung Ja
Research in Plant Disease
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v.20
no.3
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pp.201-205
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2014
Damping-off, caused by Rhizoctonia solani and Pythium ultimum, is a very important plant disease and affects seeds and seedlings of many plant species worldwide. To investigate control efficacy of Serenade formulation (1.34%, SC) against Rhizoctonia and Pythium damping-off diseases, seeds of chili pepper and cucumber were sown in soils inoculated with R. solani and P. ultimum and Serenade formulation was applied by soil-drenching with 9-, 19-, and 39-fold dilutions. Control values of Serenade formulation on Rhizoctonia damping-off of chili pepper was 58% and 29% for 9- and 19-fold dilutions, respectively. In the case of cucumber Rhizoctonia damping-off, Serenade treatments showed similar control efficacy with damping-off of chili pepper. On the other hand, control efficacy of Serenade formulation on Pythium damping-off of cucumber was less than control effects on Rhizoctonia damping-off. Only Pythium damping-off of chili pepper treated with 9-fold dilution Serenade was statistically different with untreated control. This result suggest that Serenade formulation could be effectively used for controlling Rhizoctonia and Pythium damping-off diseases.
This study was conducted to assess the environmental risks of anthracnose resistant transgenic chili peppers with the PepEST gene on non-target organisms in the agroecosystem environments during the chili pepper growing seasons in 2006. We quantitatively collected arthropods assemblages living on leaves and flowers of chili peppers on June 20, July 25, and August 25 by using an insect vacuum collector to compare the patterns of arthropod community structures between non-transgenic chili peppers (nTR, WT512) and anthracnose resistant transgenic chili peppers (TR, line 68). We found the seasonal difference with the highest species richness and Shannon's diversity in July's sampling among the growing seasons (P<0.05) and each sampling season showed the different arthropod community composition. We also found there was no statistical difference between the two types of crops, nTR and TR, at each sampling time (P>0.05). The significance level of arthropod community showed that there were lots of seasonal difference of functional groups as well as taxa but only the herbivore group in the functional groups was significantly different for the types of plants (P<0.05). So, we further examined the herbivore groups to find any potential damage and identified the possibility of herbivorous damage from some herbivores, grasshoppers, aphids and thrips. Although we couldn't find any adverse effects from the environmental risk assessment between the arthropod community structures on two types of plants from our results, we should keep working for the environmental risk assessment because of the herbivorous potential risk possibility.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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