To study the effect of dietary docosahexaenoic acid (DHA) enrichment on the expression of hepatic genes in pigs, weaned, crossbred pigs (30 d old) were fed diets supplemented with either 2% tallow or DHA oil for 18 d. Hepatic mRNA was extracted. Suppression subtractive hybridization was used to explore the hepatic genes that were specifically regulated by dietary DHA enrichment. After subtraction, we observed 288 cDNA fragments differentially expressed in livers from pigs fed either 2% DHA oil or 2% tallow for 18 d. After differential screening, 7 genes were found to be differentially expressed. Serum amyloid A protein 2 (SAA2) was further investigated because of its role in lipid metabolism. Northern analysis indicated that hepatic SAA2 was upregulated by dietary DHA enrichment (p<0.05). In a second experiment, feeding 10% DHA oil for 2d significantly increased the expression of SAA2 (compared to the 10% tallow group; p<0.05). The porcine SAA2 full length cDNA sequence was cloned and the sequence was compared to the human and mouse sequences. The homology of the SAA2 amino acid sequence between pig and human was 73% and between pig and mouse was 62%. There was a considerable difference in SAA2 sequences among these species. Of particular note was a deletion of 8 amino acids, in the pig compared to the human. This fragment is a specific characteristic for the SAA subtype that involved in acute inflammation reaction. Similar to human and mouse, porcine SAA2 was highly expressed in the liver of pigs. It was not detectable in the skeletal muscle, heart muscle, spleen, kidney, lung, and adipose tissue. These data suggest that SAA2 may be involved in mediation of the function of dietary DHA in the liver of the pig, however, the mechanism is not yet clear.
Insulin-like growth factor-binding protein-5 (IGFBP-5) is one of the six members of IGFBP family, important for cell growth, apoptosis and other IGF-stimulated signaling pathways. In order to explore the significance of IGFBP-5 in cells of the Inner Mongolian Cashmere goat (Capra hircus), IGFBP-5 gene complementary DNA (cDNA) was amplified by reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) from the animal's fetal fibroblasts and tissue-specific expression analysis was performed by semi-quantitative RT-PCR. The gene is 816 base pairs (bp) in length and includes the complete open reading frame, encoding 271 amino acids (GenBank accession number JF720883). The full cDNA nucleotide sequence has a 99% identity with sheep, 98% with cattle and 95% with human. The amino acids sequence shares identity with 99%, 99% and 99%, respectively. The bioinformatics analysis showed that IGFBP-5 has an insulin growth factor-binding protein homologues (IB) domain and a thyroglobulin type-1 (TY) domain, four protein kinase C phosphorylation sites, five casein kinase II phosphorylation sites, three prenyl group binding sites (CaaX box). The IGFBP-5 gene was expressed in all the tested tissues including testis, brain, liver, lung, mammary gland, spleen, and kidney, suggesting that IGFBP-5 plays an important role in goat cells.
Although cerebellar hemangioblastomas are histopathologically benign, they yield a degree of malignant clinical behavior in long-term follow-up. We present two cases of long-term progression of renal cell carcinoma, which had been diagnosed as renal cysts during treatment for cerebellar hemangioblastoma. A 14-year-old male with von Hippel-Lindau disease was admitted for a cerebellar hemangioblastoma with multiple spinal hemangioblastomas and a renal cyst. After primary total resection of the cerebellar hemangioblastoma, the patient required two further surgeries after 111 and 209 months for a recurrent cerebellar hemangioblastoma. Furthermore, he underwent radical nephrectomy as his renal cyst had progressed to renal cell carcinoma 209 months after initial diagnosis. A 26-year-old male presented with multiple cerebellar hemangioblastomas associated with von Hippel-Lindau disease and accompanied by multiple spinal hemangioblastomas and multiple cystic lesions in the liver, kidney, and pancreas. He underwent primary resect'lon of the cerebellar hemangioblastoma in association with craniospinal radiation for multiple intracranial/spinal masses. Unexpectedly, a malignant glioma developed 83 months after discovery of the cerebellar hemangioblastoma. At the same time, renal cell carcinoma, which had developed from an initial renal cyst, was diagnosed, and a radical nephrectomy was performed. In the view of long term clinical course, cerebellar hemangioblastoma associated with von Hipple-Lindau disease may redevelop even after primary total resection. In addition, associated lesions such as renal cysts may also progress to malignancy after the passing of a sufficient length of time.
이사천에서 채집된 칼납자루의 생식과 기관계 구조를 조직학적인 방법에 의하여 조사한 결과는 다음과 같다. 암:수 성비는 1:1로 나타났다. 암컷의 경우 생식소중량지수(GSI)는 12월과 4월에 두 번의 정점을 나타냈으며, 산란관지수(OLI)는 불규칙한 변화 양상을 보였다. 기관계의 조직학적인 관찰 결과, 피부에서는 상피층의 위축과 색소세포의 증가가 확인되었으며, 아가미에서는 새판 상피층의 박리와 새엽의 분지현상이 나타났다. 그리고 간과 신장에서는 울혈 및 간세포의 세포질 변성과 사구체의 팽창, 세뇨관 상피세포의 초자성 변성 및 간질세포의 핵 응축이 관찰되었다.
The infection characteristics with scuticociliates at on-land rearing farms and hatcheries of flounder, Paralithys olivaceus was investigated during the year of 2001 by juvenile infection routes. When culture tanks for living food organisms such as chlorella, rotifer, and Artemia were searched, scuticocilates were detected both in live and dead rotifer, and at the dregs of culture tank bottoms at almost hatcheries. When rotifer infected with scuticocilates fed on fish larvae, lots of scuticocilate were inhabited at the bottom of fry rearing tanks. After feeding on scuticocilates-infected rotifer on fish larvae, first infection was detected at 10 days after bottom dwelling or 40 days old after hatching. By histopathological examination we confirmed the infection route of eyeball or brain contamination was that the ciliate worms digged through mouth and front part of the dosal fin cuticle, transferred into eyeball along the epithelium and muscle tissue, and reached finally into brain by the muscle and nerve tissue. The infection of internal organs was clarified into two routes. The first route was started from the infection at ventral and anal fin rays by the worms, and reached at the anus and rectum through the epithelium and muscle tissue. The second route was initiated from the infection at urinary organ and reached into the rectum epithelium cells, inner wall of intestine, abdominal cavity, pancreas, kidney, and pancreas. At seed production farms where fish larvae fed on scuticocilate-free rotifer, the worms were not detected not only at the food organisms culture tanks and juvenile rearing tanks but also larval flounder less than 7cm in total length.
Guan, H.P.;Fan, B.;Li, K.;Zhu, M.J.;Yerle, M.;Liu, Bang
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제19권7호
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pp.931-937
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2006
The full-length cDNA of the porcine SMPX gene was obtained by the rapid amplification of cDNA ends (RACE). The nucleotide sequences and the predicted protein sequences share high sequence identity with both human and mouse. The promoter of SMPX was sequenced and then analyzed to find the promoter binding sites. The reverse transcriptase-polymerase chain reaction (RT-PCR) revealed that SMPX has a high level of expression in heart and skeletal muscle, a very low expression in lung and spleen and no expression in liver, kidney, fat and brain. Moreover, SMPX has a differential expression level in skeletal muscle, the expression in 65-day embryos being higher than other stages. The porcine SMPX was mapped to SSCXp24 by using a somatic cell hybrid panel (SCHP) and was found closely linked to SW1903 using the radiation hybrid panel IMpRH. An A/G single nucleotide polymorphism (PCR-RFLP) in the 3'-untranslated region (3'-UTR) was detected in eight breeds. The analysis of allele frequency distribution showed that introduced pig breeds (Duroc and Large White) have a higher frequency of allele A while in the Chinese indigenous pig breeds (Qingping pig, Lantang pig, YushanBlack pig, Large Black-White pig, Small Meishan) have a higher frequencies of allele G. The association analysis using an experimental population (188 pigs), which included two cross-bred groups and three pure-blood groups, suggested that the SNP genotype was associated with intramuscular fat content.
In this study, we cloned, sequenced and characterized porcine y+L Amino Acid Transporter-1 (y+LAT1). By screening a translated EST database with the protein sequence of the human $y^{+}$LAT1 and by using rapid amplification of cDNA ends (RACE), the full-length cDNA encoding porcine $y^{+}$LAT1 was isolated from porcine intestine RNA. It was 2,111 bp long, encoding a 511 amino acid trans-membrane glycoprotein composed of 12 transmembrane domains. The predicted amino acid sequence was found to be 91%, 90%, 87% and 87% identical to those of cattle, human, mouse and rat $y^{+}$LAT1 respectively. Real-time RT-PCR results indicated that the small intestine had the highest $y^{+}$LAT1 mRNA abundance and the lung had the lowest $y^{+}$LAT1 mRNA abundance. Baby hamster kidney (BHK) cells transfected with green fluorescent protein (GFP) tagged porcine $y^{+}$LAT1 cDNA indicated that the cellular localization of the gene product in BHK was on the plasma membrane.
Kim, Se Eun;Kim, Ji Woo;Kim, Yeong Ji;Kwon, Deug-Nam;Kim, Jin-Hoi;Kang, Man-Jong
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제29권4호
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pp.564-570
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2016
The Sal-like 1 gene (Sall1) is essential for kidney development, and mutations in this gene result in abnormalities in the kidneys. Mice lacking Sall1 show agenesis or severe dysgenesis of the kidneys. In a recent study, blastocyst complementation was used to develop mice and pigs with exogenic organs. In the present study, transcription activator-like effector nuclease (TALEN)-mediated homologous recombination was used to produce Sall1-knockout porcine fibroblasts for developing knockout pigs. The vector targeting the Sall1 locus included a 5.5-kb 5' arm, 1.8-kb 3' arm, and a neomycin resistance gene as a positive selection marker. The knockout vector and TALEN were introduced into porcine fibroblasts by electroporation. Antibiotic selection was performed over 11 days by using $300{\mu}g/mL$ G418. DNA of cells from G418-resistant colonies was amplified using polymerase chain reaction (PCR) to confirm the presence of fragments corresponding to the 3' and 5' arms of Sall1. Further, mono- and bi-allelic knockout cells were isolated and analyzed using PCR-restriction fragment length polymorphism. The results of our study indicated that TALEN-mediated homologous recombination induced bi-allelic knockout of the endogenous gene.
This study examined the effect of excess calcium (Ca) on the iron (Fe) bioavailability and bone growth of marginally Fe deficient animals. Two groups of weanling female SD rats were fed either normal Fe (35 ppm) or Fe deficient diet (8 ppm) for 3 weeks. Then each group of animals were assigned randomly to one of three groups and were fed one of six experimental diets additionally for 4 weeks, containing normal (35 ppm) or low (15 ppm) Fe and one of three levels of Ca as normal (0.5%), high (1.0%), or excess (1.5%). Feces and urine were collected during the last 3 days of treatment. After sacrifice blood, organs, and femur bone were collected for analysis. Final body weight and average food intake were not affected by either the levels of dietary Ca or Fe. Low Fe diet significantly reduced the level of serum ferritin, however, for Hb, Hct, and TIBC no difference was shown than those in the normal Fe group. TIBC increased slightly by high and excess Ca intake in low Fe groups. For both normal and low Fe groups, high and excess Ca intakes reduced the apparent absorption of Fe and Fe contents of liver significantly (p < 0.05). Calcium contents in kidney and Femur of rats that were fed high and excess levels of Ca were significantly greater than those of normal Ca groups. However, weight, length, and breaking force of the bone were not affected by increased Ca intakes. Both in control and low Fe groups, high and excess intakes of Ca decreased the apparent absorption of Ca. These results indicate that the excess intakes of calcium than the normal needs would be undesirable for Fe bioavailability and that the adverse effects be more serious in marginally iron deficient growing animals. In addition bone growth and strength would not be favorably affected by high Ca intakes, though, the long term effect of increased Ca contents in bone requires further examination.
The pale chub (Zacco platypus) is generally found in Asian countries, such as Korea, Japan, and China. Nevertheless, very little information exists about the genes involved in the metabolism of xenobiotics in this species. This species is useful in monitoring the environmental impact on various pollutants in freshwater as a sentinel fish species. We cloned the full-length cDNA sequence of xenobiotic metabolizing cytochrome P450 1A (CYP1A) gene from Z. platypus and characterized it. Tissue distribution and timedependent induction of CYP1A were studied by real-time RT-PCR. Induction pattern of CYP1A was studied by exposing the fish to an arylhydrocarbon receptor agonist, ${\beta}$-naphthoflavone (BNF). The liver showed the highest level of expression in basal state as well as BNF- treated fish. However, appreciable levels of expression were also recorded in Gill and kidney and the least level of expression was observed in the eye. The results of the time-course study revealed an induction in the liver, brain, and gills after 6 h and 12 h in most of the tissues. This study provides an insight into the xenobiotics metabolizing system of Z. platypus and offers baseline information for further research related to biomarker, stress, and adaptive response of this ecologically important fish species in the freshwater environment.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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