• 자연과학논문집
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• 제6권1호
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• pp.41-48
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• 1993

위치지정 변이기법을 이용하여 Bacillus thuringiensis var. kurstaki NRD 6의 내독소 유전자의 N말단 독성부위를 변이시켜 Bacillus thuringiensis var. kurstaki NRD 6-Stu 1을 육종하였다. 내독소에 대한 염기서열 조사결과, 변이주의 내독소 유전자부위에 Stu 1 인식부위가 생성되었고 특히, 이부위의 177번 염기 A가 C로 치환된 silent mutation이 일어났음을 확인하였다. 변이주의 내독소 유전자의 항원성질은 친주와 차이가 없었고 Choristoneura femiferana-1에 대한 독성도는 0.015~0.030ng으로 친주의 0.01~0.024ng과 유사하였으나 다른 친주계열인 B.t.kurstaki NRD 5의 500~1000ng과 B.t.kurstaki NRD 4(무독성)보다 강하였다.

• 한국잠사곤충학회지
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• 제33권2호
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• pp.75-81
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• 1991

해충의 미생물적 방제를 위하여 Bacillus thuringiensis 살충제 개발에 관한 기초자료를 얻고자 3종의 B. thuringiensis var. Kurstaki, dendrolimus, aizawai와 2종의 공시충으로 누에와 흰불나방에 대한 독성을 검정하여 아래와 같은 연구결과를 얻었다. 1. B. thuringiensis의 누에에 대한 독성검정에서는 kurstaki를 제외하고 3령에 비해 4령의 경우 LD50이 5배의 증가량을 보였고, 변종간 독성의 세기는 dendrolimus, kurstaki, aizawai 순이었다. 2. Bacillus thuringiensis의 흰불나방에 대한 독성검정에서는 kurstaki를 제외하고 4령에 비해 6령의 경우 LD50이 3배의 증가량을 보였고, 변종간 독성의 세기는 dendrolimus, kurstaki, aizawai 순이었다. 3. 령기에 관계없이 사망시간이 큰 차이를 나타내지 않았는데 그 이유는 충체가 증가됨에 따라 단위시간당 섭식량도 증가하므로 치사에 필요한 철대량을 섭식한 것으로 추정된다. 4. B. thuringiensis 변종 중에서 kutstaki는 독성의 세기가 령기에 관계없이 가장 안정된 것으로 나타났다.

• 한국응용곤충학회지
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• 제33권3호
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• pp.178-183
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• 1994

Bacillus thuringiensis kurstaki와 aizawai의 내독소단백질을 알카리용액 또는 트립신, 곤충소화액 드응ㄹ 처리하여 전기영동한 후 단백질팬턴을 비교하였다. 두 균주의 주요 결정단백질은 130kd와 64kd의 단백질이었으며, 소화액이나 효소로 처리한 경우 공통적으로 62kd의 활성독소가 생성되었다. 그러나, aizawai는 kurstaki에 비해 현저히 적은 양의 62kd 단백질을 생성하였다. 흰불나방의 유충이 Bacillus thuringiensis 독소를 섭식하였을 때 지방체를 비롯한 몇 가지 조직에서 45kd의 스트레스 단백질이 유발되었는데 이 단백질은 열충격이나 저온 충격시에도 마찬가지로 생성되었다.

• International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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• 제3권1호
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• pp.19-23
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• 2001

Two B. thuringiensis strains, which possess mosquitocidal activities, were isolated from Korean soil samples and named K-1205-1 and K-1381-1. Serological studies indicated that K-1205-1 and K-1381-1 belonged to B. thuringiensis subsp. kurstaki (H3a3b3c) and subsp. aizawai (H7), respectively. K-1205-1 produced typical bipyramidal parasporal inclusions, but K-1381-1 produced irregular bipyramidal shape. Total plasmid DNA patterns analysis shewed that K-1205-1 and K- 1381-1 were different from their reference strains, subsp. kurstaki and subsp. aizawai, respectively, in high molecules, whereas their crystal protein patterns showed no difference. The cry gene contents of K-1205-1 and K-1381-1 were identical with those of the reference strains. Mosquitocidal activities of crystal proteins produced by K-1205-1 and K-1381-1 were significantly high by about 40-50 folds at $LC_50$ when compared to those of subsp. kurstaki and subsp. aizawai. Finally, in southern blot analysis using cry1A-type specific probe, K-1205-1 and K-1381-1 had different bands from subsp. kurstaki and subsp. aizawai, respectively. In conclusion, our results suggest that K-1205-1 and K-1381-1 appear to be new moquitocidal B. thuringiensis strains isolated from Korean soil.

• 한국잠사곤충학회지
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• 제37권1호
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• pp.62-67
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• 1995

Bacillus thuringiensis(Bt) var, kurstaki의 내독소 단백질을 섭취한 미국천불나방(Hyphantria cunea)의 유충에서 중장과 지방체조직의 세포 미세구조변화를 투과전자현미경으로 조사하였다. Bt 내독소 단백질은 중장 원주상피세포에 있어서 미세융모의 파괴, 소포체 구형화, 기저층 소실, 리보솜 탈락, 세포내 소기관의 파괴 등을 초래하였다. 또한, 지방체 세포에서도 역시 소포체의 구형화와 미토콘드리아의 변형 등 세포미세구조의 변화를 유발시켰다.

• 한국잠사곤충학회지
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• 제37권1호
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• pp.68-73
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• 1995

미국흰불나방(Hyphantria cunea)의 유충에서 중장, 지방체, 말피기씨관에 Bacillus thuringiensis(Bt) var. kurstaki의 내독소 단백질의 독성효과로 인한 생리적 변화를 autoradiography와 Western blot으로 확인하였다. 단백질 합성과 번역연장민자-2에 미치는 영향을 조사한 결과, 앞의 모든 조직에서 단백질 합성이 급격히 저하되었으며, 번역연자인자-2의 활성도 병행하여 저하되었다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제17권1호
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• pp.81-83
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• 1989

The flagella antigenic variation of nine Bacillus thuringiensis serovar kurstaki temperature-sensitive mutants grown at the permissive temperature (3$0^{\circ}C$) was detected by a serological agglutination between H-antigen and antiserum. The flagella antigens were injected to rabbits to prepared their antisera, and then their homologous and heterologous titers of the antisera were measured. The homologous titers were ranged from 1:6,400 to 1:12,800, but the heterologous titers were very low. The H-antigen of the wild type strain was not agglutinated to 4 heterologous antisera, ts-U23 not to 7, ts-U3l not 5, ts-U32 not to 4, ts-U33 not to 7, ts-U7l not to 4, ts-U73 not to 6, ts-U74 not to 6, ts-U91 not to 4 and ts-U603 not to 4 antisera.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제14권3호
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• pp.259-264
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• 1986

The compositions of the four madia and their pHs for delta endotoxin production by B. thuringiensis serovar kurstaki 3a3b were examined. In the M-4 media out of the 4 media at pH8, the production of the endotoxin and spore formation were maximal. The mean generation times of the bacterium were 53.4 minutes in the M-1 media, 98 in the M-2, 132 in the M-3, and 127.5 in the M-4. The proper pHs of the media for the endotoxin production appeared to be pH 7 to 8. In the M-4 media, the lag time lasted about 5 hours.

• 농약과학회지
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• 제13권4호
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• pp.315-324
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• 2009

배추좀나방(Plutella xylostella L.)의 효과적인 방제를 위해서 현재 상용화되고 있는 친환경 농자재인 Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki($30{\times}10^8\;cfu/mg$)와 Neem oil(0.5% azadirachtin)을 사용하였다. 두 약제를 추천농도로 처리했을 때 배추좀나방 1. 2령 유충에서 B. thuringiensis는 2일만에 100%의 사충률을 보였으며, Azadirachtin은 7일까지 지효적 효과를 보였다. 배추좀나방 1, 2, 3, 4령 유충에 대한 B. thuringiensis의 $LC_{50}$ 값은 각각 $2.8{\times}10^4$, $3.1{\times}10^4$, $3.4{\times}10^4$, $1.5{\times}10^5\;cfu/ml$이였으며, Azadirachtin은 2.7, 3.9, 4.7, 7.1 ppm이였다. B. thuringiensis와 Azadirachtin를 배추좀나방 성충에 처리하였을 경우에 산란수는 무처리와 비교하여 Azadirachtin 25 ppm에서 57.5개의 감소를 보였다. 또한 알의 부화율은 무처리와 비교하여 B. thuringiensis는 큰 차이가 없었고, Azadirachtin 50 ppm에서 45.4%의 부화율 감소를 나타냈다. 배추좀나방은 B. thuringiensis와 Azadirachtin을 혼합처리할 경우, 각각의 처리구에서 각각을 단독으로 처리하였을 때보다 높은 방제효과를 나타내었다. 포트시험의 경우에서도 B. thuringiensis와 Neem oil의 혼합처리 사용은 배추좀나방 알, 유충, 번데기, 성충의 친환경적인 방제에 효과를 나타냈다.

• 한국응용곤충학회지
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• 제47권2호
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• pp.175-184
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• 2008

국내의 난방제 해충에 선택적으로 생물활성을 나타내는 균주를 선발하기 위하여 작물재배 지역의 토양으로부터 채취한 115개의 토양샘플 중 46개의 Bacillus thuringiensis 균주를 분리하였다. 이러한 B. thuringiensis균주를 사용하여 난방제 농업해충에 생물활성을 검정한 결과 배추좀나방(Plutella xylostella)에 CAB119을 포함한 35균주, 파밤나방(Spodoptera litura)에는 CAB128, CAB141균주가, 담배거세미나방(Spodoptera exigua)은 CAB133과 CAB159균주가 효과를 나타냈으며 CAB162균주는 3종류의 모든 해충에 높은 활성을 보였다. 분리된 B. thuringiensis CAB133 균주는 H serotype에 의한 혈청학적 동정과 SDS-PAGE를 통한 독소 단백질 패턴에서 B. thuringiensis subsp. kurstaki (3abc)로 동정되었다. 담배거세미나방 2령 유충에 대한 활성검정의 결과 B. thuringiensis subsp. kurstaki (3abc) CAB133, CAB162의 두 균주에 대한 $LD_{50}$ 값은 각각 0.089, $3.144{\mu}g/ml$로 높은 활성을 나타났다. 담배거세미나방의 령기에 따른 생물실험에서 CAB133 균주 $1.5{\times}10^6(cfu/ml)$에서 1령의 경우 3일, 2령은 5일에 100%의 사충율을 보였다. 담배거세미나방의 경우 B. thuringiensis를 섭식 후 먹기를 중단하여 성장이 멈추면서 $5{\times}7$일 후에 사망하였다. 그러므로 B. thuringiensis의 결정성독소단백질$(1.267{\mu}g/ml)$를 섭식하고 성장하지 못하는 담배거세미나방 유충의 무게는 대조군보다 5일후 약 30배정도 차이로 나타나서 사망하였다.