To develop universal primers for phylogenetic analysis and species-specific marker for breeding program of kiwifruit, eighteens primers were designed from kiwifruit genome-specific repeat sequences. Seven species including twenty two varieties collected from native eastern Asia were examined using 18 to 22 mer kiwifruit target(KT) primers. among eighteen primers, we selected seven primers for phylogenetic relationship. The genus Actinidia was divided into two large groups; group I,A. arguta, A. melanandra, A. kolomikta, and A. marcrosperma, characterized by the non-hair in fruits and loaves or a few pubescences only in young stage, which belongs to the section Leiocarpae, and group II, A. chinensis, A. deliciosa, and A. eriantha, characterized by a lot of hairs only in young fruit stage and with a lot of hairs or fuzzes in leaves and branches, which belongs to the section Stellatae. Group II especially belongs to the series Perfectae of the section Stellatae and was divided into two subgroups; subgroup I containing A. chinensis and A. deliciosa, and subgroup II containing A. eriantha. In contrast, the two species, A. chinensis and A. deliciosa, which are known to have common parents, were divided into two independent subgroups with 80% of a similarity value. On the other hand, we selected KT6F for variety specific bands, KT12E primers for 'Hayward' and 'Tomuri'. KT7F or KT12F primers were useful for analysis of inheritance pattern in kiwifruit cross-breeding. We suggest that these primers will be a powerful tool for elucidating phylogenetic relationship and selection of novelty kiwifruit in a breeding program.
AFLP(Amplified Fragment Length Polymorphism) analysis was conducted to cultivars of tobacco, Nicotiana tabacum in order to select the cultivar-specific markers. AFLP results using 12 primer sets revealed genetic diversity among 12 field grown tobacco cultivars. Polymorphic fragments amplified by PCR was purified and cloned to identify their nucleotide sequences. From the sequences of them, 40 primer sets were designed to select cultivar-specific markers. When genomic DNA isolated from tobacco were used as PCR template, a set of primers, BrSF/BrSR showed Burley-specific band patterns. The results indicate that AFLP technique used in this experiments is useful for identifying tobacco cultivars in a rapid manner.
A large number of individual ginseng plants have been selected in the farmer's fields to develop new ginseng varieties with desirable traits since 1970s. Among them, Hwangsukjong with green stem and yellow berry was selected as a ginseng germplasm. The phenotype of Hwangsukjong is quite different from Jakyungjong that has violet stem and red berry and has been cultivated in most of ginseng fields. Therefore, Hwangsukjong was crossed with Jakyungjong to clarify the inheritance of stem color and then the characteristics of $F_1\;and\;F_2$ hybrids were investigated. $F_1$ hybrid plants were similar to Jakyungjong in most of aerial part characters and showed hybrid vigor in fresh weight of root and weight of 100 seeds. In $F_2$ generation, the stem color was segregated in a ratio of 3 violet to 1 green. From this result, it was elucidated that violet color was controlled by single dominant gene. In another experiment, DNA was extracted from parents (Jakyungjong and Hwangsukjong) and $F_1$ hybrid. For each primer evaluated, multiple band profile was produced comprising from one to five major bands plus a varying number of minor bands and amplified bands were detected among most primers. In case of UBC primer number 13, 17, 30, 31, and 43, band patterns of parents and $F_1$ hybrid were very similar, but the others were not. Especially, in {\sharp}1$, {\sharp}4$, and {\sharp}33$, specific band was produced in Hwangsukjong and $F_1$ hybrid while in {\sharp}6$, another specific band was produced in Jakyungjong and $F_1$ hybrid. Therefore, $F_1$ hybrid had all specific bands at these primers. So, these selective markers could be used for identification of characteristics of $F_2$ hybrids
Kim, Nam-Hoon;Choi, Hong-Il;Jung, Ju-Yeon;Choi, Beom-Soon;Ahn, In-Ok;Lee, Joon-Soo;Yang, Tae-Jin
Proceedings of the Plant Resources Society of Korea Conference
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2010.10a
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pp.11-11
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2010
The Korean ginseng, Panax ginseng C. A. Meyer is a popular medicinal herb in Araliaceae. Genetic map in crops provides valuable information for breeding, genetic and genomic researches. However, little information is available for construction of genetic map in ginseng. Up to now, we have produced large amounts of expressed sequence tags (ESTs) from four ginseng cultivars (37Mb, 49Mb, 39Mb, 47Mb from Gopoong, Gumpoong, Chunpoong and Yunpoong respectively using pyrosequencing technique and 5Mb from normalized full-length cDNA library of Chunpoong) to obtain comprehensive information of gene expression, and constructed EST database including ESTs from public database. Till now, we designed 261 SSR primer sets using EST sequences and identified 106 intergenic polymorphic markers. And 44 of the 106 showed polymorphisms among panax ginseng cultivars. Among 44 markers, 27 SSR polymorphic markers were inspected to 51 $F_2$ population from Yunpoong x Chunpoong, which showed good at the fitness of Mendellian segregation ratio 1:2:1. To enrich the number of markers, and thus construct high resolution genetic map which can be used as frame map for further genome sequencing. we are planning to develop large scale EST-derived SNP markers which are available in the F2 population. This study provides genetic information as well as foundation for ginseng researches such as genetics, genomics, breeding, and the final goal for whole genome sequencing. This study was supported by Technology Development Program for Agriculture and Forestry, Ministry for Food, Agriculture, Forestry and Fisheries, Republic of Korea (Grant No. 609001-051SB210).
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[게시일 2004년 10월 1일]
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