In this study, it was investigated whether immortalized proximal tubule cells transformed with pRSVT could survive through the numerous passages. Results were as follows: 1. The cells transfected with pRSVT formed rapidly growing, multilayered colonies within 2 weeks in a hormone defined medium. Domes were also observed in some of the cultures. 2. r-glutamyl transpeptidase activity was equivalent to that observed in primary renal proximal tubule cell cultures. 3. Transformed cells with pRSVT form tubules in matrigel following 20 passages. 4. Genomic DNA of transformants was digested with either the restriction enzyme Xba or BamH1. A band of approximately 7.5kb was detected with Xba. Three BamH1 bands were detected at approximately 15 kb, 6.5 kb, and 3 kb.
From S. lactis $KB_{21}$, stabilized strain by intergration of the lactose plasmid into the host chromosome, several lactose constitutive mutants were obtained by UV irradiation and spontaneous mutation. The rapid growth of the mutants in the medium containing lactobionate confirmed their constitutive nature. The mutants synthesized $phospho-{\beta}-galactosidase$ with an activity of 1.7 to 3.4 times that of the parent.
In this study, we investigated the cytotoxicity of ethyl acetate subfraction of Sophora flavescens Ait.(EASS) on cancer cells using MTT quantitative analysis. The EASS was cytotoxicity from the concentration of 6.25 g/ml to KB, B16, HeLa, and MCF-7 cancer cells and the cytotoxicity was significant, (p < 005) increased as the concentrations of EASS were increased, (12.5, 25, 50, 100 g/ml). The IC for KB, B16, HeLa, and MCF-7 were 56.58, 65.43, 83.95, and 106.65 g/ml, respectively. Conclusively, the EASS inhabited the growth of cancer cells and the order of potency of cytotoxicity was KB > B16 > HeLa > MCF-7.
Total genomic DNA library of Serratia marcescens was prepared by inserting Sau3AI partial digesting fragments(above 5 kb) into the dephosphorylated BamHl site of pUC19. In primary screening, two colonies were selected by observing the halo around E. coli transformants grown on the swollen colloidal chitin media. Secondary screening was performed by soaking two colonies with a few drops of 4-methylumbelleliferryl N-acetyl-$\beta$-D-glucocosaminide(4-MuNGlcNAc). As 4-MuNGlcNAc is a specific, fluorogenic substrate for chitinase, the positive clones produce light fluorescence by the exposure under the long wave U.V. light(360 nm). From genomic DNA library derived from pUC19, we have isolated two different chitinase clones, pCH1(11.0Kb) and pCH2(7.5Kb), which show completely different restriction map to each other. The cross-hybridization of pCH1EA and pCH2 have not revealed any hybridization signals to each other.
We have cloned the cdd gene from E. coli C600 using (cdd-) as a host. From the sequenced promoter region of E=, coli cdd gene which has been determined by Valentin-Hansen P. (1985), we synthesized the 23 mer oligonucleotides corresponding to the transcription initiation region and used as a probe for cloning of the cdd gene by Southern blotting. The isolated fragments in the blotting were introduced to the colony hybridization after transforming it into the E. coli JF611 (cdd-, pyr double mutant), and we identified the hybridized band at 27 kb long. From the original insert of 27 kb fragment in theBamHI site of pBR322, the 5.3 kb fragment containing the cdd gene was isolated by subsequent deletion and subeloning. From the derived plasmid pTK509, further deletion and subcloning were performed and clarified that the cdd gene was located in the 2.1 kb of SaZI/DraI segment in the insert of pTK605. The polypeptide encoded by the cloned DNA was appeared to be a molecular mass of 33,000.
Kim, Yong-Ho;Park, Heon;Park, Mu-Hun;Ha, Pan-Bong;Kim, Young-Hee
Journal of the Korea Institute of Information and Communication Engineering
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v.19
no.3
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pp.567-574
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2015
In this paper, a 50ns 256-kb EEPROM IP for MCU (micro controller unit) ICs is designed. The speed of data sensing is increased in the read mode by using a proposed DB sensing circuit of differential amplifier type which uses the reference voltage, and the switching speed is also increased by reducing the total DB parasitic capacitance as a distributed DB structure is separated into eight. Also, the access time is reduced reducing a precharging time of BL in the read mode removing a 5V NMOS transistor in the conventional RD switch, and the reliability of output data can be secured by obtaining the differential voltage (${\Delta}V$) between the DB and the reference voltages as 0.2*VDD. The access time of the designed 256-kb EEPROM IP is 45.8ns and the layout size is $1571.625{\mu}m{\times}798.540{\mu}m$ based on MagnaChip's $0.18{\mu}m$ EEPROM process.
Journal of the Korean Society of Fisheries and Ocean Technology
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v.20
no.2
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pp.91-95
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1984
This paper describes to analyze regression relation between the ratio mean draft to freeboard and KM/dm, KB/dm and GM/B, respectively with the 43 Korean fishing vessels (7 Danish seiners; 1l Stowers; 14 Poler and liners; 6 Trawlers; 5 Purse seiners) and the 1 Cargo boat in order to obtain the stability factors of the Korean fishing vessels conveniently. The obtained results are as follows; 1. The stability factors by fishing vessels have a tendency to the larger f/dm, the larger KM/dm and KG/dm, and KB/dm and GM/B are constant. 2. It is found out that M and G differ from the kinds of the fishing vessels because KM/dm is the largest in poler and liners and KG/dm in Danish seiner, respectively. 3. It is confirmed that the stability factors of the fishing vessels which the inclining experiment carry out the wholly in the light and the full loaded condition are the same as the inclining experiment uniformly.
The relationship between second messenger cGMP and human cytomegalovirus (HCMV) replication was investigated. First, the intracellular level of cGMP ([cGMP]i) in HCMV-infected cells was measured. The [cGMP]i increased at early times after HCMV infection, reached maximum level at 12 hr and returned to basal level at 24 hr after virus infection, while [cGMP]i in mock-infected cells remained relatively unchanged. Increasing [cGMP]i resulted in enhanced transcription of HCMV major immediate early gene. For early gene expression, cGMP had varying effect. Expression of 1.2 kb RNA decreased and 2.2 kb RNA increased with increasing cGMP, while 2.7 kb RNA gene expression was not affected. HCMV early genes are regulated by immediate early gene, and the effect of cGMP on the regulatory effect of major immediate early gene on early genes was investigated. In the absence of cGMP, major immediate early gene repressed 2.7 kb RNA gene expression, while 1.2 kb RNA and 2.2 kb RNA early genes were not significantly affected. In the presence of $1\;{\mu}M$ cGMP, however, major immediate early gene stimulated the expression of three early genes.
Discriminant analysis using near infrared spectra derived from Korean Flue-cured(KF) and American Flue-cured(AF), and also Korean Burley(KB) and American Burley(AB) tobacco was done to classify flue-cured and burley tobacco as either grown in Korea or grown in the USA. Samples were scanned in the wavelength of 400 ~ 2500 nm by near infrared analyzer(NIRSystem Co., model 6500). The discrimination equations for flue-cured and burley tobacco were developed using partial least square 2 method in Infrasoft International NIRS 3 software package. KF samples used for the development of the discrimination equations were higher contents of total sugar, crude ash and chlorine, and higher value of leaf density and brightness, but lower contents of nicotine, total nitrogen and ether extracts, and higher value of redness than those of AF samples. KB samples were higher contents of nicotine, crude ash and chlorine, but lower contents of ether extracts and value of brightness than those of AB samples. On 3 dimensional graph drawn with 3 principal component scores calculated with 3 principal component from KF and KB sample spectra, KF sample spectra were significantly different from AF, and also KB sample spectra were significantly different from AB. The discrimination equations of flue-cured and burley were developed with 3 principal component, respectively. The discrimination equations for flue-cured and burley had a standard error of 0.03 and 0.04, and a R2 of 0.88 and 0.84, respectively. The tobacco samples used for the development of discrimination equation were perfectly classified as KF and AF by flue-cured discrimination equation, and also perfectly classified KB and AB by burley discrimination equation, respectively. The correct classification rates of KF and AF samples not used for the development of discrimination equations were 9S % (828 out of 869 samples) and 98 % (98 out of 100 samples) by flue-cured discrimination equations, and KB and AB samples were 94%(345 out of 368 samples) and 100%(42 out of 42 samples) by burley discrimination equations, respectively.
It is generally known that mutations in any of several genes encoding photoreceptor-specific proteins have resulted in retinitis pigmentosa (RP), a disease characterized by losing photoreceptor function with progressive degeneration of photoreceptor cells and eventually leading to blindness. To study the procure and cure of photoreceptor degeneration, we produced transgenic mice. Transgene consisted of a 12.5kb genomic DNA fragment that contains mutated pig rhodopsin gene (Pro-347-Ser) including both the 5'-franking (4.0 kb) and the 3'-franking (2.9 kb) sequences. This gene was used for the production of transgenic mouse. The mutated rhodopsin DNA was microinjected into male pronuclei of fertilized mouse (C57BL /6]) embryos. We detected transgenic animals harboring mutated rhodopsin gene by PCR and Southern blot analysis. These transgenic mice showed stable transmission of microinjected rhodopsin gene into their offspring. Therefore these animals will provide a novel approach to study the mechanism of the photoreceptor degeneration and be provided as a disease model for the treatment of the blind in human.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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