Objective: This study was conducted to investigate the roles of LIM kinases (LIMK1 and LIMK2) during porcine early embryo development. We checked the mRNA expression patterns and localization of LIMK1/2 to evaluate their characterization. We further explored the function of LIMK1/2 in developmental competence and their relationship between actin assembly and cell junction integrity, specifically during the first cleavage and compaction. Methods: Pig ovaries were transferred from a local slaughterhouse within 1 h and cumulus oocyte complexes (COCs) were collected. COCs were matured in in vitro maturation medium in a CO2 incubator. Metaphase II oocytes were activated using an Electro Cell Manipulator 2001 and microinjected to insert LIMK1/2 dsRNA into the cytoplasm. To confirm the roles of LIMK1/2 during compaction and subsequent blastocyst formation, we employed a LIMK inhibitor (LIMKi3). Results: LIMK1/2 was localized in cytoplasm in embryos and co-localized with actin in cell-to-cell boundaries after the morula stage. LIMK1/2 knockdown using LIMK1/2 dsRNA significantly decreased the cleavage rate, compared to the control group. Protein levels of E-cadherin and β-catenin, present in adherens junctions, were reduced at the cell-to-cell boundaries in the LIMK1/2 knockdown embryos. Embryos treated with LIMKi3 at the morula stage failed to undergo compaction and could not develop into blastocysts. Actin intensity at the cortical region was considerably reduced in LIMKi3-treated embryos. LIMKi3-induced decrease in cortical actin levels was attributed to the disruption of adherens junction and tight junction assembly. Phosphorylation of cofilin was also reduced in LIMKi3-treated embryos. Conclusion: The above results suggest that LIMK1/2 is crucial for cleavage and compaction through regulation of actin organization and cell junction assembly.
교정시력이 1.0 이상인 21세에서 30세 사이인 대학생 90명(남25명, 여65명)을 대상으로 포롭터를 이용하여 양안시 검사를 하였다. 원거리에서 허성상대 폭주력(외전)의 기대치(흐린점/분리점/회복점)내에 포함되는 대상의 비율은 78%/61%/67%로 나타났고, 개산과다는 9%/31%/23%, 개산부족은 13%/8%/9%이었다. 원거리에서 실성상대폭주력(내전)은 20%/46%/39%, 폭주과다는 22%/14%/16%, 폭주부족은 35%/40%/45%를 각각 보였다. AC/A비 측정에서 42명이 정상이었고 38명은 낮음, 나머지는 높음을 보였으며 낮은 AC/A비는 조절관계에서 낮은 이향운동의 결과로 볼 수 있다. 근거리에서 허성상대 폭주력 기대치는 26%/29%/44%로 나타났고, 개산과다는 61%/33%/24%, 개산부족은 3%138%/32%이었으며 실성상대 폭주력의 기대치내에 포함되는 대상의 비율은 33%/40%/31%, 폭주과다는 61%/23%/42%, 폭주부족은 6%/37%/27%로 각각 나타났다. 폭주근점 검사에서 58%는 8cm 이내로 기대치에 포함되었다. 허성상대조절력(NRA)과 실성상대조절력(PRA) 검사 결과 기대지내에 포함되는 대상의 비율은 각각 41%와 33%였다. 그리고 조절부족은 33%와 43% 및 조절과다는 26%와 24%를 각각 나타냈다. 조절과다는 NRA의 낮은값과 관련되었고 초절부족과 폭주과다는 NRA의 높은 값과 관련 있고, 조절과다이면서 폭주과다인 기능 이상은 NRA의 높은 값과 관련 있는 것으로 나타났다.
The present study was aimed to investigate the role of endothelium-derived nitric oxide (NO) in the control of renin release and to examine if NO is implicated in the development of two-kidney, one clip (2K1C) hypertension. Male Sprague-Dawley rats $(150{\sim}200\; g)$ were constricted at the left renal artery. They were then supplemented with $N^{G}-nitro-L-arginine\;methyl\;ester\;(L-NAME,\; 5mg/100\;mL)$ or with L-arginine hydrochloride (400 mg/100 mL) in the drinking water. The control group was supplied with normal tap water. The sham-clipped rats were operated as in 2K1C rats except for that no clip was made. The kidneys were taken to examine in vitro release of renin at days 7 and 14 following clipping the renal artery. Northern blot analysis was also done to assess the expression of renin gene in the kidney. In sham-clipped rats, L-NAME caused a sustained increase of the blood pressure, whereas L-arginine was without effect. Neither L-NAME nor L-arginine-supplementation significantly affected the development of hypertension in 2K1C rats. Plasma renin concentration (PRC) measured on day 28 did not significantly differ among the L-NAME, L-arginine and control groups either in 2K1C or in sham-clipped rats. Renin contents (RRC) in the clipped kidney were increased, while those in the contralateral kidney were decreased. The release of renin in vitro from cortical slices was also enhanced in the clipped kidney, whereas it was attenuated in the contralateral. Comparing the RRC and in vitro release, the latter was more rapidly decreased than the former in the contralateral kidney. The renin mRNA levels in the contralateral kidney were almost at their nadir at days 7 and 14 in 2K1C rats. It is suggested that NO does not affect the development of 2K1C hypertension in which the renin-angiotensin system has been activated. The data also confirm that RRC and renin gene expression are increased in the clipped kidney and suppressed in the contralateral kidney in 2K1C rats.
목적: 본 연구는 양안시 고유수용감각검사(Maindot 검사)를 사용하여 평균 3년 동안의 추적관찰을 통한 간헐성 외사시의 시기능훈련 효과를 평가하는 것이다. 방법: 2005년에서 2009년의 기간동안 35명(남 18명, 여 17명)의 평균 연령 13.48(${\pm}2.45$)세의 교정시력 0.9 이상이고 조절기능이 정상이며, 양안단일시가 가능한 간헐성 외사시안을 대상으로 시기능 훈련 전, 후 그리고 3년간의 변화를 관찰하였다. 결과: 시기능 훈련 후, 변화된 편위량 및 폭주여력(복시점)값과 자각증상은 상관관계가 유의하지 않았다(p>0.05). 그러나 양안시 고유수용감각능력 변화에 따라 자각증상이 감소되는 상관관계를 나타내었다(p<0.001). 결론: 양안시 고유수용감각은 양안시 자각증상 예측 평가, 시기능 훈련 후 양안시 기능 예측 평가, 프리즘 처치와 같은 다양한 목적과 분야에 활용될 수 있을 것이다.
기질 물질로서 일련의3-phenyl-2,5-dihyoisoxazol-5-one(A) 및3-phenylisoxazole(B)유도체는 친핵성 첨가-제거반응($Ad_{N-E}$)으로 (A)가 (B)보다 높은 수율로 합성되었으며 정량적인 구조와 저항성(PRC) 및 감수성(SPC) 고추역병균(Phytophthora capsici)에 대한 살균 활성과의 관계(QSAR)를 검토하였다. 두 균주에 대한 살균활성은 공통적으로 benzoyl고리에 결합된 치환기의 폭인 $B_2$ 상수의 적정값(약$4.0{\AA}$)에 의존적(RPC: $(B_2)_{opt.}=3.74{\AA}$ 및 SPC: $(B_2)_{opt.}=3.99{\AA}$)이었으며 치환기가 RPC에는 전자끌게로 작용한 반면에 SPC에는 전자 끌게로 작용하지 않았다. Free-Wilson 분석결과, RPC 및 SPC, 두 균주에 대한 살균활성은 (A)가 (B)보다 컸으며 할로겐과 acetyl-치환체가 기여하였고, RPC에는 cyano, methoxy 및 methyl-치환체 등이 선택적으로 기여하였다.
Bmi1은 PcG 단백의 일종으로 PRC를 구성하는 성분이다. Bmi1에 관한 초기의 연구는 주로 암세포에서의 역할에 집중되었고, 그 결과 Bmi1은 암세포의 증식과 생존에 중요한 역할을 하는 것으로 받아들여지고 있다. 그러나, 최근의 연구 결과 Bmi1은 퇴행성 신경계 질환이 있는 뇌에서 발현이 감소되어 있고 미토콘드리아의 기능과 활성 산소 수준을 조절하는 것으로 알려져 있다. 본 연구에서는 Bmi1 발현 저하 동물을 이용하여 간질에서 Bmi1의 약물 치료 표적 가능성을 밝히고자 하였다. Bmi1의 발현은 pilocarpine에 의한 경련중첩증 이후 해마의 CA1, CA3 그리고 치상회에서 뚜렷하게 증가하였다. 경련 양상을 볼 때 경련중첩증이 유도되는 비율은 Bmi1+/+와 Bmi1+/- 생쥐에서 각각 43.14%와 53.57%로 나타났다. 그러나, 치사율과 해마의 신경세포 손상에는 두 군 간에 통계적으로 유의한 차이를 보이지 않았다. 경련중첩증 유도 2개월 후에 나타난 간질 경련의 빈도수는 통계적 유의성은 없었으나 Bmi1+/- 생쥐에서 약 50% 낮게 나타났다. 반면, 이끼섬유발아는 Bmi1+/- 생쥐에서 통계적으로 유의하게 증가하였다. 이러한 결과를 종합하면, Bmi1의 발현이 감소할 때 pilocarpine에 의한 경련 유도와 이끼섬유발아가 증가함을 보여준다.
목적: 시각이상을 가진 아동을 대상으로 시기능훈련을 통한 시각기능이상의 개선 전후 시지각점수의 변화를 살펴보고 시지각에 미치는 영향을 알아보고자 한다. 방법: 시각기능이상을 가진 13세 미만($8.75{\pm}1.66$)의 아동 23명을 대상으로 시기능훈련 전후에 시지각기능검사(TVPS_R; test of visual perceptual skills-revised)를 실시하여 시기능훈련에 따른 시각기능의 변화와 시지각 평가점수의 변화를 분석하였다. 결과: 시기능훈련을 통해서 원거리 PRC(positive relative convergence) 분리점은 평균 $3.39{\pm}2.59{\Delta}$(prism)에서 $13.87{\pm}6.04{\Delta}$로 증가되었고, 근거리 P.R.C 분리점은 평균 $5.48{\pm}3.42{\Delta}$에서 $18.44{\pm}7.58{\Delta}$로 증가하였다. NPC(near point of convergence)는 $25.87{\pm}7.33cm$에서 $7.48{\pm}2.83cm$로 개선되었고, NPA(near point of accommodation)는 $19.57{\pm}7.16cm$에서 $7.09{\pm}1.88cm$로 개선되었다. 시지각평가에서 시각기억분야를 제외하고는 대응차가 시각완성에서 $17.74{\pm}16.94$(p=0.000), 시각적순차기억에서 $15.65{\pm}17.11$(p=0.000), 배경식별에서 $13.65{\pm}16.63$(p=0.001), 형태향상성에서 $12.74{\pm}18.41$(p=0.003), 시각구별에서 $6.49{\pm}10.07$(p=0.005), 시각적공간지각에서 $4.17{\pm}9.33$(p=0.043) 순으로 개선되었고, 이를 종합한 시지각점수는 대응차가 $15.22{\pm}8.66$(p=0.000)로서 더욱 더 유의한 결과를 나타내었다. 결론: 시기능훈련을 통해서 시각기능의 개선과 시각기억분야를 제외한 시지각점수의 향상이 시각완성, 시각적순차기억, 배경식별, 형태향상성, 시각구별, 시각적공간지각 순으로 유의하게 나타났다. 따라서 시각기능향상을 위한 시기능훈련은 시각의 기능뿐만 아니라 시지각의 기능까지 영향을 미치는 것을 확인 할 수 있으며 시각훈련의 중요성을 인식 할 수 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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