A genetic transfer system for introducing foreign genes to biomining microorganisms is urgently needed. Thus, a conjugative gene transfer system was investigated for a moderately thermophilic, extremely acidophilic biomining bacterium, Acidithiobacillus caldus MTH-04. The broad-hostrange IncP plasmids RP4 and R68.45 were transferred directly into A. caldus MTH-04 from Escherichia coli by conjugation at relatively high frequencies. Additionally the broad-hostrange IncQ plasmids pJRD215, pVLT33, and pVLT35 were also transferred into A. caldus MTH-04 with the help of plasmid RP4 or strains with plasmid RP4 integrated into their chromosome, such as E. coli SM10. The $Km^r\;and\;Sm^r$ selectable markers from these plasmids were successfully expressed in A. caldus MTH-04. Futhermore, the IncP and IncQ plasmids were transferred back into E. coli cells from A. caldus MTH-04, thereby confirming the initial transfer of these plasmids from E. coli to A. caldus MTH-04. All the IncP and IncQ plasmids studied were stable in A. caldus MTH-04. Consequently, this development of a conjugational system for A. caldus MTH-04 will greatly facilitate its genetic study.
The stochastic response surface method (SRSM) and the response surface method (RSM) are often used for structural reliability analysis, especially for reliability problems with implicit performance functions. This paper aims to compare these two methods in terms of fitting the performance function, accuracy and efficiency in estimating probability of failure as well as statistical moments of system output response. The computational procedures of two response surface methods are briefly introduced first. Then their capabilities are demonstrated and compared in detail through two examples. The results indicate that the probability of failure mainly reflects the accuracy of the response surface function (RSF) fitting the performance function in the vicinity of the design point, while the statistical moments of system output response reflect the accuracy of the RSF fitting the performance function in the entire space. In addition, the performance function can be well fitted by the SRSM with an optimal order polynomial chaos expansion both in the entire physical and in the independent standard normal spaces. However, it can be only well fitted by the RSM in the vicinity of the design point. For reliability problems involving random variables with approximate normal distributions, such as normal, lognormal, and Gumbel Max distributions, both the probability of failure and statistical moments of system output response can be accurately estimated by the SRSM, whereas the RSM can only produce the probability of failure with a reasonable accuracy.
There is an inherent randomness for concrete microstructure even with the same manufacturing process. Meanwhile, the concrete material under the aqueous environment is usually not fully saturated by water. This study aimed to develop a stochastic micromechanical framework to investigate the probabilistic behavior of the unsaturated concrete from microscale level. The material is represented as a multiphase composite composed of the water, the pores and the intrinsic concrete (made up by the mortar, the coarse aggregates and their interfaces). The differential scheme based two-level micromechanical homogenization scheme is presented to quantitatively predict the concrete's effective properties. By modeling the volume fractions and properties of the constituents as stochastic, we extend the deterministic framework to stochastic to incorporate the material's inherent randomness. Monte Carlo simulations are adopted to reach the different order moments of the effective properties. A distribution-free method is employed to get the unbiased probability density function based on the maximum entropy principle. Numerical examples including limited experimental validations, comparisons with existing micromechanical models, commonly used probability density functions and the direct Monte Carlo simulations indicate that the proposed models provide an accurate and computationally efficient framework in characterizing the material's effective properties. Finally, the effects of the saturation degrees and the pore shapes on the concrete macroscopic probabilistic behaviors are investigated based on our proposed stochastic micromechanical framework.
This study was conducted to investigate the effects of dietary glutamine (Gln) on the productive performance and egg quality of laying hens. A total of four hundred Lingnan Yellow laying hens aged 34 weeks were randomly assigned into four groups (100 laying hens/group), and fed, respectively, with diets supplemented with 0% (control group), 0.2%, 0.4%, and 0.8% Gln during the 6-week feeding period. The results were as follows. First, the productivity of laying hens fed with 0.8% Gln in diet was significantly increased (p<0.05); however, the egg quality (egg weight, yolk weight, shell weight, egg shape index, shell thickness, shell density, shell breaking strength, yolk color, yolk index, and Haugh unit) was not affected compared with that of the control group (p>0.05). Second, luteinizing hormone (LH) (p<0.01), follicle stimulating hormone (FSH) (p<0.01), triiodothyronine ($T_3$), and tetraiodothyronine ($T_4$) contents (p<0.05) in blood of laying hens fed with 0.8% Gln in diets were also significantly improved, and greater improvement in the duodenum and oviduct structure was observed in that treatment group. This study indicated for the first time that diets with 0.8% Gln were able to increase the productive performance of laying hens through stimulating hormone secretion and better development of both the duodenum and oviduct structure in laying hens.
Background: Previous studies have investigated the association between the vitamin D receptor (VDR) BsmI polymorphism and colorectal cancer (CRC) susceptibility, but the results were conflicting. The aim of this study is to quantitatively summarize the relationship between this polymorphism and CRC risk. Materials and Methods: Two investigators independently searched the Medline, Embase, China National Knowledge Infrastructure (CNKI) and Chinese Biomedicine databases for studies published before November 2013. Summary odds ratios (ORs) and 95% confidence intervals (95%CIs) for VDR BsmI polymorphism and CRC were calculated in a fixed-effects model (the Mantel-Haenszel method) and a random-effects model (the DerSimonian and Laird method) when appropriate. Results: This meta-analysis included 14 case-control studies, which included 10,822 CRC cases and 11,779 controls. Overall, the variant genotype (BB) of the BsmI was associated with a lower CRC risk when compared with the wild-type bb homozygote (OR=0.66, 95%CI: 0.49-0.88). Similarly, a decreased CRC risk was also found in the dominant and recessive models. When stratifying for ethnicity, source of controls, and study sample size, associations were observed among Caucasians, population-based studies and studies with large study sample size (>1000 subjects). Limiting the analysis to the studies within Hardy-Weinberg equilibrium, the results were persistent and robust. No publication bias was found in the present study. Conclusions: This updated meta-analysis suggests that the VDR BsmI polymorphism may be associated with a moderate protective effect against CRC.
Objective : The aim of this study was to explore the immunity in rats transplanted with adipose-derived mesenchymal stem cells (ADSCs) and acellular nerve (ACN) for repairing sciatic nerve defects. Methods : ADSCs were isolated from the adipose tissues of Wistar rats. Sprague-Dawley rats were used to establish a sciatic nerve defect model and then divided into four groups, according to the following methods : Group A, allogenic nerve graft; Group B, allograft with ACN; Group C, allograft ADSCs+ACN, and Group D, nerve autograft. Results : At the day before transplantation and 3, 7, 14, and 28 days after transplantation, orbital venous blood of the Sprague-Dawley rats in each group was collected to detect the proportion of $CD3^+$, $CD4^+$, and $CD8^+$ subsets using flow cytometry and to determine the serum concentration of interleukin-2 (IL-2), tumor necrosis $factor-{\alpha}$ ($TNF-{\alpha}$) and $interferon-{\gamma}$ ($IFN-{\gamma}$) using enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). At each postoperative time point, the proportion of $CD3^+$, $CD4^+$, and $CD8^+$ subsets and the serum concentration of IL-2, $TNF-{\alpha}$, and $IFN-{\gamma}$ in group C were all near to those in group B and group D, in which no statistically significant difference was observed. As compared with group A, the proportion of $CD3^+$, $CD4^+$, and $CD8^+$ subsets and the serum concentration of IL-2, $TNF-{\alpha}$, and $IFN-{\gamma}$ were significantly reduced in group C (p<0.05). Conclusion : The artificial nerve established with ADSCs and ACN has no obvious allograft rejection for repairing rat nerve defects.
Cytokines are proteins produced by many different cells of the immune system and play a significant role in initiating and regulating the inflammatory process. In this research, an important cytokine, interleukin-10 (IL-10) gene, has been identified and characterized from zebrafish (Danio rerio) genome database. Zebrafish IL-10 is located within a 2690 bp fragment and contains five exons and four introns, sharing the same organization with mammalian IL-10 genes. An open reading frame of 543 bp was found to encode a putative 180 amino acid protein with a signal peptide of 22 amino acids, which shares 29.7-80.9% homology with amino acid sequences of other known IL-10. The signature motif of IL-10 is also conserved in zebrafish IL-10. The predicted transcript was finally confirmed by sequencing of cDNA clones. Multi-tissue reverse transcriptase PCR (RT-PCR) was performed to examine the tissue distribution and expression regulation of this gene in seven organs of normal and lipopolysaccharide (LPS) stimulation zebrafish. The results demonstrated that this gene was expressed slightly in normal kidney, gill and gut, no expression was detected in other four tissues. The expression was clearly upregulated after LPS stimulation. Using the ideal zebrafish model, further study of IL-10 characterization and function may provide insight on the understanding of the innate immune system.
Curcumin, a natural compound extracted from rhizomes of curcuma Curcuma species, has been shown to possess potent anti-inflammatory, anti-tumor and anti-oxidative properties. However, the mechanism of action of the compound remains poorly understood. In this report, we have analyzed the effects of curcumin on the cell proliferation of Burkitt's lymphoma Raji cells. The results demonstrated that curcumin could effectively inhibit the growth of Raji cells in a dose- and time-dependent manner. Further studies indicated that curcumin treatment resulted in apoptosis of cells. Biochemical analysis showed that the expression of Bax, Bid and cytochrome C were up-regulated, while the expression of oncogene c-Myc was down regulated after curcumin treatment. Furthermore, poly (ADP-ribose) polymerase (PARP) cleavage was induced by the compound. Interestingly, the antiapoptotic Bcl-2 expression was not significantly changed in Raji cells after curcumin treatment. These results suggested that the mechanism of action of curcumin was to induce mitochondrial damage and therefore led to Raji cell apoptosis. We further investigated the in vivo effects of curcumin on the growth of xenograft tumors in nude mice. The results showed that curcumin could effectively inhibit tumor growth in the xenograft mouse model. The overall results showed that curcumin could suppress the growth of Burkitt's lymphoma cells in both in vitro and in vivo systems.
A differential scheme based micromechanical framework is proposed to obtain the effective properties of the saturated concrete repaired by the electrochemical deposition method (EDM) considering the interfacial transition zone (ITZ) effects. The constituents of the repaired concrete are treated as different phases, consisting of (micro-)cracks, (micro-)voids and (micro-)pores (occupied by water), deposition products, intrinsic concrete made up by the three traditional solid phases (i.e., mortar, coarse aggregates and their interfaces) and the ITZs. By incorporating the composite sphere assemblage (CSA) model and the differential approach, a new multilevel homogenization scheme is utilized to quantitatively estimate the mechanical performance of the repaired concrete with the ITZs. The CSA model is modified to obtain the effective properties of the equivalent particle, which is a three-phase composite made up of the water, deposition products and the ITZs. The differential scheme is employed to reach the equivalent composite of the concrete repaired by EDM considering the ITZ effects. Moreover, modification procedures considering the ITZ effects are presented to attain the properties of the repaired concrete in the dry state. Results in this study are compared with those of the existing models and the experimental data. It is found that the predictions herein agree better with the experimental data than the previous models.
The chemokine receptor 4 (CXCR4) has been widely used in diagnosis and prognosis of colorectal cancer (CRC). However, there is no current consensus on the impact of CXCR4 on CRC patients. The purpose of this study was to evaluate the prognostic and clinicopathological importance of CXCR4 in CRC patients. Databases, such as PubMed, Cochrane library, CBM and EMBASE updated to 2014 were searched to include eligible articles. We analysed correlations between CXCR4 expression and clinicopathological features and overall survival (OS). A total of 1, 055 CRC patients from twelve studies were included in the study. The pooled odds ratios (ORs) which indicated CXCR4 expression was likely to be associated with TNM stage (OR=0.43, CI=0.34-0.55, P<0.00001), lymph node status (OR=2.23, CI=1.23-4.05, P=0.008) and vascular invasion (OR=2.21, CI=1.11-4.39, P=0.02). Poor overall survival of CRC cancer was found to be significantly related to CXCR4 overexpression (hazard ratio (HR) 1.36 CI=1.17-1.59, P<0.0001), whereas combined ORs revealed that CXCR4 expression had no correlation with gender or differentiation. Based on the published studies, CXCR4 overexpression in patients w ith CRC indicates poor survival outcome and clinicopathological factors.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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