Park, Wan-Soo;Koo, Young-Jo;Shin, Dong-Hwa;Min, Byong-Yong
Korean Journal of Food Science and Technology
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v.15
no.2
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pp.177-182
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1983
Direct conversion of starchy materials to single cell protein of Sporobolomyces holsaticus FRI Y-5 was investigated. Effect of yeast extract concentration on its cell growth showed that it could utilize more of starch in the medium containing 2.5 g/l of yeast extract. In case of jar fermentor culture, the specific growth rate and cell yield of Sp. holsaticus on soluble starch were calculated to be $0.14\;hr^{-1}$ and 0.425, respectively and its maximum cell concentration was 13.4 g/l. After 80 hr of incubation time, 45.96% of starch was consumed and 45.1% of relative blue value was decreased. Reducing sugars in the starch medium seemed to increase from 4.06 g/l to 6.08 g/l and then to decrease. During fermentor culture, pH of medium was almost not changed in the range of $pH\;7.0{\pm}0.5$. The optimal temperature and pH of Sp. holsaticus amylase activity were $40^{\circ}C$ and pH 7.5, respectively. It was shown from the effect of Tapioca starch concentration on the cell growth that the optimal concentration of Tapioca starch for Sp. holsaticus was lower than that of soluble starch. FRI Y-5 cells settled much slower than Sp. holsaticus IFO 1032 cells and the viscosity vs cell concentration relationship was related to be linear.
To obtain higher yield of 2,3-dihydroxybiphenyl(2,3-DHBP) dioxygenase by recombinant E. coli CK1092 carrying pcbC gene of Pseudomonas sp. P20, the environmental and physiological factors were investigated and the cultural conditions using jar fermentor were studied. E. coli CKl092 was grown in LB medium supplemented with 2% sucrose, as a basal medium. The effect of various metal ions on the enzyme production was investigated. In particular, the enzyme production increased in the presence of $Fe^{3+}$ and $Fe^{2+}$, and showed the maxium at the concentration of $10^{-5}M$. The enzyme production was increased by 55% in the medium containing $Fe^{3+}$ ($10^{-5}M$) ion. The optimal temperature and initial pH for cell growth were $37^{\circ}C$ and 7.0, respectively. In the culture using a fermentor at $37^{\circ}C$, the optimal conditions for the enzyme production were obtained at the initial pH 7.0, 1 v/v/m of aeration rate, 200 rpm of agitation speed. It was found that enzyme activity was higher when cultivated without pH control than with pH control.
Acetobacter xylinum KJ1 efficiently producing bacterial cellulose(BC) In shaking culture was isolated from a rotten grape. The strain was used to investigate optimum operating conditions for increasing BC production and factorial design model was employed for the optimization. The results of experiments were statistically analyzed by SAS program. Reciprocal effects of each factors(carbon source concentration, shaking speeds(rpm), oxygen pressure, and CSL concentration) and culture condition of BC production were examined by getting regression equation of the dependent variable. Comparisons between experimental results and predicted results about BC concentration were done in total 24 experiments by combination of each factors using SAS program, and the correlation coefficients of BC concentration and BC yield were 0.91 and 0.81, respectively. The agitated cultures were peformed in various operation conditions of factors which affected considerably to BC production in jar fermentor. The results showed that BC concentration was 11.67 g/L in 80 hours cultivation under the condition of carbon source concentration : shaking speeds(rpm) : oxygen pressure : CSL concentration : 4% : 460 rpm : 0.28 : 6%. On the other hand BC yield was 0.42 g/g in 80 hours cultivation under the condition of carbon source concentration : shaking speeds(rpm) : oxygen pressure : CSL concentration : 4% : 564 rpm : 0.21 : 2%. The BC production could be enhanced up to more than 2.4 times by factorial design. The result of a verifying experiment under the optimal conditions determined by the factorial design to the BC production showed that the model was appropriate by obtaining BC concentration of 11.47 g/L in the optimum condition.
Cultural conditions for the production of extracellar $\beta$-galactosidase by Loctobacillus sporogenes, a spore forming lactic acid bacterium, were investigated with shaken flask and jar fermenter cultures. The fermentation medium giving maximum $\beta$-galactosidase yield was found to consist of 1 % lactose as a carbon source, 1.5% peptone as an organic nitrogen source. 0.2% ammonium sulfate as an inorganic nitrogen source, 0.8% ammonium phosphate dibasic as a phosphorus source, and 0.05% potassium chloride and 0.001% ferric chloride as mineral source. Optimal initial pH of the medium was 7.0 and the highest enzyme excretion was observed after 40 hours of cultivation at 37$^{\circ}C$. In this experiment, the 500$m\ell$ conical flask containing 50-200$m\ell$ of medium was shaken at 140 strokes per minute with 7cm amplitude in a reciprocating shaker. The maximum enzyme value attained was 38 U/$m\ell$ of the culture broth which was found to be slightly higher than the highest intermolecular enzyme activity (30 U/$m\ell$) observed after 24 hours of incubation. In the fermentor culture, the fermentation profile was shown to be similar to that observed in the shaken flask experiment. But the maximum extracellular enzyme activity was 45 U/$m\ell$ to be even higher than the value obtained with the shaken flask culture.
Recombinant Escherichia coli BLR(DE3) harboring the hemA gene from Rhodobacter capsulatus under the control of a constitutive promoter, which we constructed previously, was used for the extracellular production of 5-aminolevulinic acid (ALA). The effects of several factors on ALA production were investigated in flask culture. ALA production by the recombinant E. coli was more efficient at $30^{\circ}C$ than $37^{\circ}C$. The glycine concentration had an important effect on cell growth. Glycine and succinic acid concentration of 5-10 and 10-20 g/L, respectively, resulted in high ALA production. In addition, the partial replacement of succinic acid by sodium glutamate increased the ALA production. The ALA production was inhibited by the presence of glucose in the medium. Using the optimal conditions, an ALA concentration of 8.2 g/L was achieved in jar fermentation without an added inducer or ALA dehydratase inhibitor; this is the highest reported concentration.
The optimization of culture conditions for the bacterium Pseudomonas aeruginosa BYK-2 KCTC 18012P, was performed to increase its rhamnolipid production. The optimum level for carbon, nitrogen sources, temperature and pH, for rhamnolipid production in a flask, were identified as 25 g/L fish oil, 0.01% (w/v) urea, 25 and pH 7.0, respectively. Optimum conditions for batch culture, using a 7-L jar fermentor, were 200 rpm of agitation speed and a 2.0 L/min aeration rate. Under the optimum conditions, on fish oil for 216 h, the final cell and rhamnolipid concentrations were 5.3 g/L and 17.0 g/L respectively. Fed-batch fermentation, with different feeding conditions, was carried out in order to increase, cell growth and rhamnolipid production by the Pseudomonas aeruginosa, BYK-2 KCTC 18012P. When 2.5 g of fish oil and 100 mL basal salts medium, containing 0.01 % (w/v) urea, were fed intermittently during the fermentation, the final cell and rhamnolipid concentrations at 264 h, were 6.1 and 22.7 g/L respectively. The fed-batch culture resulted in a 1.2-fold increase in the dry cell mass and a 1.3-fold increase in rhamnolipid production, compared to the production of the batch culture. The rhamnolipid production-substrate conversion factor (0.75 g/g) was higher than that of the batch culture (0.68 g/g).
High-level expression of the lipase B26 gene from Bacillus pumilus was achieved using Bacillus subtilis Chungkookjang isolated from the Korean traditional fermented bean paste, Chungkookjang. For the secretory production of recombinant lipase B26 in a Bacillus host system, pLipB26 was constructed by ligating the lipase B26 gene into the recently designed Escherichia coli-Bacillus shuttle vector, pLipSM, and that was then transformed into B. subtilis Chungkookjang. Among the various vector, medium, and host combinations, B. subtilis Chungkookjang harboring the pLipB26 exhibited the highest lipase activity in PY medium, and B. subtilis Chungkookjang secreted two times more enzymes than B. subtilis DB 104 under the same condition. When B. subtilis Chungkookjang harboring the pLipB26 was cultured in a 5-1 jar-fermentor containing 21 of a PY medium, the maximum lipase activity (140 U/ml) and production yield (0.68 g/l) were obtained during the late exponential phase from a cell-free culture broth. Although B. subtilis Chungkookjang also secreted extracellular proteases at the late exponential phase, these results suggested the potential of B. subtilis Chungkookjang as a host for the secretory production of foreign proteins.
Aldehyde production by cells of a methanol utilizing yeast, Hansenula nonfermentans KYP-1 was improved when they were grown in a methanol-limited continuous culture, in comparison with cells grown in a batch culture. A higher cell yield was also obtained in continuous culture than in batch culture. This could be due to the fact that a lower methanol concentration was maintained in the jar fermentor to minimize growth inhibition by methanol. A maximum cell productivity of 0.219 g.$liter^{-1}.hr^{-l}$ and a cell yield of 47% were obtained at dilution rates of 0.1 $hr{-1}$ and 0.06 hr{-1}, respectively. The greatest amount of aldehyde was measured at a dilution rate of 0.08 $hr{-1}$. Under optimum reaction conditions, 915.7 mM of acetaldehyde was produced from 1.5 M ethanol after 21 hours reaction, with a conversion rate of 61%. Propionaldehyde and acrolein were produced with conversion rates of 32.7% and 44%, respectively.
Streptomyces themocyaneovio-laceus producing the thermostable xylanase was used for the production of xylooligosaccharides from xylan. The optimal conditions for the xylanase production were investigated in jar fermentor, which operated at 2 vvm aera-tion and 400 rpm agitation speed at $50^{\circ}C$ for 24 h. The optimal reaction condtion for the production of xylooli-gosaccharides with xylanases which were prepared by the percipitation with ammonium sulfate were obtained by the reaction at $60^{\circ}C$ for 12 h in the mixture composed of 10% birchwood xylan in 50 mM sodium phosphate buffer (pH 6.0)and 10 unit/ml of xylanase. In this optimal condition for the xylooligosaccharides production the mixture of xylooligosaccharides (58.8 g/I) which were composed of 20.1 g/I of xyobiose, 8.9 g/I of xylotriose 4.5 g/I of xylotetraose 16.2g/I of xylopentaose and 9.1 g/I xylohexaose and 5.0 g/I of xylose was produced from 100 g/I of birchwood xylan by the xylanases of S thermocyaneoviolaceus .
YUN, HYE SUN;DO YOUNG KIM;CHUNG WOOK CHUNG;HYUNG WOO KIM;YOUNG KI YANG;YOUNG HA RHEE
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.13
no.1
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pp.64-69
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2003
Pseudomonas chlororaphis HS21 was isolated from a soil sample and found to produce medium-chain-length polyhydroxyalkanoates (MCL-PHAs) using palm kernel oil (PKO) as the sole carbon source. Up to 3.3 g/1 dry cell weight containing $45\%$ MCL-PHA was produced, when the strain was grown for 21 h in a jar fermentor culture containing 5 g/1 PKO. The polymer produced from PKO consisted of unsaturated monomers of $7.3\%$ 3-hydroxy-5-cis-tetradecenoate and $2.3\%$ 3-hydroxy-5,8,-cis, cis-tetradecadienoate as well as saturated even-carbon number monomers ranging from $C_6\;to\;C_14$, as determined by GC and El GC/MS The PHA was a transparent, sticky material at room temperature. A differential scanning calorimetric analysis revealed that the polymer was amorphous with a $-44^{\circ}C$ glass transition temperature. The number average molecular weight and polydispersity index of the PHA were 83,000 and 1.53, respectively. Although the PHA was practically biodegradable, its degradability was lower than that of poly(3-hydroxyoctanoate) based on a comp:trison of the clear zones formed by growing PHA depolymerase-producing bacteria on an agar plate containing the respective polymers.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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