Thiostrepton 내성 유전자(tsr)를 포함하는 multi-copy 재조합 플라스미드 pJY7J2의 제한효소 절단지도를 작성하였다. pJY, 712는 Streptomyces에서 넓은 host range를 나타내었으며 cloning 목적에 사용할 수 있는 단일 BgtIl 제한효소 인식부위를 갖고 있었다. 플라스미드 pJY 712는 lethal zygosis(Ltz+) 현상을 보였다. pJY 712의 혁질전환빈도는 S. lividans에서 $5.0\times 10^{4}$ TFU였다. pJY 712의 Bell 제한효소 인식부위에 tyrosmase 유전자(mel)를 삽입하여 플라스미드 PJY713을 제조하였다. met 유전자를 포함한 재조합 플라스미드 pJY 714는 pJY 713의 일부분(1.9kb BgllI-BelI 단편)을 제거하여 제고하였다.
Thiostrepton 내성 유전자(tsr)를 포함하는 multicopy 재조합 플라스미드 pJY502(5.5kb)의 제한효소 지도를 비교해본 결과 pJY502는 새로운 플라스미드로 확인되었다. pJY502는 Streptomyces에서 넓은 host range를 나타내었으며 cloning에 사용할 수 있는 단일 BglII 제한효소 인식부위를 갖고 있었다. pJY502의 형질전환 빈도는 S.lividans에서 $2.2 \times 10^5$이었다. 또한 E.coli-Streptomyces bifunctional 플라스미드 pJY504을 제조하였다.
Kim, Ju-Young;Sathiyaraj, Srinivasan;Subramani, Gayathri;Lee, JinWoo;Maeng, Soo hyun;Jang, Jun Hwee;Lee, Ki-Eun;Lee, Eun-young;Kim, Myung Kyum
Journal of Species Research
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제7권3호
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pp.202-209
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2018
Eight bacterial strains, 18JY8-13, 18JY13-16, 18JY43-7, 18JY12-7, 18JY1-1, 18JY1-7, 18JY15-3, and 18JY7-2 assigned to the phylum Firmicutes were isolated from a variety of soil samples collected in the Jeju Island, Korea. Cells of the eight strains were Gram-positive, aerobic and showed resistant to UV-radiation. Phylogenetic analysis based on 16S rRNA gene sequence revealed that strains 18JY8-13, 18JY13-16, 18JY43-7, 18JY12-7, 18JY1-1, 18JY1-7, 18JY15-3, and 18JY7-2 were most closely related to Bacillus paranthracis(99.9%), Bacillus paramycoides(99.6%), Bacillus australimaris(99.9%), Bacillus wiedmannii (100%), Bacillus halosaccharovorans(99.6%), Bacillus deserti(98.7%), Bacillus cereus (99.8%), and Bacillus albus(100%), respectively. This is the first report of these eight species in Korea.
We previously reported that Streptococcus pneumoniae capsule attached to the surface protein (JY-Pol) was protective to systemic pneumococcal infection. The JY -Pol antigen induced IgM, IgG, and IgA in mice and provoked cell-mediated immunity. In this current study, we investigated the effect of anti JY-Pol antiserun and monoclonal antibody C2 (Mab C2) specific for the JY-Pol antigen against the pneumococcal disease. Mice that were given the antiserum survived longer than mice that received antiserum pre-absorbed with S.pneumoniae cells or DPBS as a negative control. Heat-treated anti JY-Pol antiserum resulted in survival rates similar to intact fresh JY-Pol antiserum. Mab C2 isolated from JY-Pol-immunized mice also enhanced resistance of naive mice against the pneumococcal diseaser. This protection by Mab C2 appeared to be mediated by opsonization as determined in a RAW 264.7 monocyte/macrophage cell line. Epitope analysis showed that Mab C2 epitope consisted of glucuronic acid and glucose that blocked the interaction of JY-Pol to the C2. Taken together, these data indicate that the antiserum induced by the JY-Pol, a naturally pneumococcal conjugate formula, mediated the protection by passive transfer, which was confirmed by protective effect of Mab C2.
Six bacterial strains 18JY42-3, 18SH, 18JY76-11, 17J11-11, 18JY14-14, and 18JY15-11 assigned to the phylum Proteobacteria, Firmicutes, and Actinobacteria were isolated from soil samples in Korea. The Cohnella species, strain 18JY42-3 was Gram-stain-positive, short rod-shaped and beige-colored. The Methylobacterium species, strains 18SH and 18JY76-11 were Gram-stain-negative, short rod-shaped and pink-colored. The Microterricola species, strain 17J11-11 was Gram-stain-positive, short rod-shaped and yellow-colored. The Paenarthrobacter species, strains 18JY14-14 and 18JY15-11 were Gram-stain-positive, short rod-shaped and white-colored. Phylogenetic analysis based on 16S rRNA gene sequence showed that strains 18JY42-3, 18SH, 18JY76-11, 17J11-11, 18JY14-14, and 18JY15-11 were most closely related Cohnella rhizosphaerae (MH497628; 98.8%), Methylobacterium goesingense (MH497632; 99.1%), Methylobacterium populi (MH497635; 99.9%), Microterricolagilva (MH504108; 98.4%), Paenarthrobacter nicotinovorans (MH497641; 100%), and Paenarthrobacter nitroguajacolicus (MH497646; 99.2%), respectively. All the six unrecorded strains showed resistance to UV radiation. This is the first report of these six species in Korea.
This study investigates the effects of cooking utensils and jujube(Zizyphus jujuba Mill. cv. Dongzao) paste on the quality characteristics of yakbab. Yakbab samples prepared with jujube paste were divided into a control(yakbab with 0% of jujube paste) and the groups with jujube paste added. The samples prepared with jujube paste were divided into JY1(yakbab with 2.60% of jujube paste), JY2(yakbab with 4.27% of jujube paste), JY3(yakbab with 5.88% of jujube paste), JY4(yakbab with 7.43% of jujube paste) and JY5(yakbab with 8.94% of jujube paste). The moisture content and the color score of pressure cooker treatment have higher than those of the pot. The moisture contents of JY2 and JY5 samples increased as compared to the other samples. The L(lightness) value scores of all samples with jujube paste added were higher than those of the others. Hardness, springiness and cohesiveness of JY4 sample showed higher than those of the control. Higher scores for color, moistness, mouth feel, sweet taste and overall taste were found in JY4 products as compared to the other samples.
Optimal medium for growth and glycosidases production of Bacteroides JY-6, an human intestinal bacterium, was general anaerobic medium or tryptic soy broth containing sod ium thioglycolate and ascorbic acid. By cocultivation of Staphylococcus R-48, Bacteroides JY-6 could be cultured in LB broth unable to culture JY-6. Heated Staphylococcus R-48 was also the inducer of the production of Bacteroides JY-6 glycosidases. These glycosidases were induced well by natural flavonoid glycosides, such as poncirin, naringin and rutin, but were not by synthetic substrates, p-nitrophenyl ${\beta$-D-glucopyranoside and p-nitrophenyl ${\alpha}$-L-rhanmopyranoside.
ln the present work to determine effect of a Streptococcus pneumoniae conjugate vaccine, S.pneumoniae capsule attached to the surface protein (JY-Pol) was ex amined. This JY-Pol contained approximately 92% and 6% carbohydrate and protein, respectively. Gel electrophoresis revealed the presence of the surface protein in the JY-Pol. By the double immunodiffusion and isotyping ELISA analyses, administration of JY-Pol that was adsorbed to alum adjuvant (JY-Pol/Alum) into mice induced IgM, IgG, and IgA specific for the S.pneumoniae capsule. The ATCC capsular polysaccharide adsorbed to alum (ATCC-Pol/Alum) provoked only IgM in mice. In survival tests, mice that were immunized with the JY-Pol/Alum before intravenous challenge with live S.pneumoniae survived entire period of 46 day-observation, whereas all mice that received ATCC-Pol/Alum or only diluent instead of the vaccination died within 5 and 12 days, respectively. Results from footpad-edema test showed that JY-Pol/Alum formula provoked the cellular immunity as determined by swelling of the mouse footpad. These data indicate that the naturally conjugated JY- Pol enhances resistance of mice against disseminated pneumococcal disease due to S.pneumoniae by both humoral and cellular immune responses.
The inhibition of osteoblast by glucocorticoid is recognized as its action mechanism of decreased bone formation. In this study, the effect of JY, Jahyulyangkeuntang, on the differentiation and mineralization of osteoblastic cells was investigated in the presence of dexamethasone. The cell counting, enzyme activity assay, MTT assay, collagen content assay were done to determine the cell proliferation, alkaline phosphatase(ALP) activity, bone martrix production, and cell apoptosis. JY enhanced the cell proliferation after the culture for 10 days. ALP activity and total protein synthesis, and intracellular collagen synthesis were increased when the cells were treated with JY. And JY restored calvarial cell function decreased by dexamethasone.
Park, Ji Yeong;Jeong, Seon-Ju;Kim, Jeong A;Kim, Jeong Hwan
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제27권9호
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pp.1586-1592
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2017
Some promoters were isolated and characterized from the genome of Leuconostoc mesenteroides SY2, an isolate from kimchi, a Korean traditional fermented vegetable. Chromosomal DNA of L. mesenteroides SY2 was digested with Sau3AI and ligated with BamHI-cut pBV5030, a promoter screening vector containing a promoterless cat-86. Among E. coli transformants (TFs) resistant against Cm (chloramphenicol), 17 were able to grow in the presence of $1,000{\mu}g/ml$ Cm and their inserts were sequenced. Transcription start sites were examined for three putative promoters (P04C, P25C, and P33C) by primer extension. Four putative promoters were inserted upstream of a promoterless ${\alpha}$-amylase reporter gene in $pJY15{\alpha}$. ${\alpha}$-Amylase activities of E. coli TFs containing $pJY15{\alpha}$ (control, no promoter), $pJY03{\alpha}$ ($pJY15{\alpha}$ with P03C), $pJY04{\alpha}$ (with P04C), $pJY25{\alpha}$ (with P25C), and $pJY33{\alpha}$ (with P33C) were 66.9, 78.7, 122.1, 70.8, and 99.3 U, respectively. Cells harboring $pJY04{\alpha}$ showed 1.8 times higher activity than the control. Some promoters characterized in this study might be useful for construction of food-grade expression vectors for Leuconostoc sp. and related lactic acid bacteria.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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