Recent development in the immunochemical technique has resulted in a new ultrasensitive analytical method known as liposome immunoassay (LIA). Liposome is a key element in performing liposome immunoassays, specifically designed to participate in immune reactions. A variety of markers can be encapsulated in liposomes and used as quantitative indicators of reactions. Liposome immunoassay based on agglutination, complement-mediated Iysis, cytolysin-mediated Iysis, detergent-mediated Iysis or destabilization of the liposomal membrane have been reviewed. The quantity of markers released from liposomes should be proportional to the concentration of the analytes. Therefore, liposomal agglutination and Iysis which are essential to liposomal Iysis are critically reviewed to provide a better understanding of liposome immunoassay. Based on the literature review of recent advances in liposome immunoassay for bioactive substances, this assay method may provide a convenient, specific and highly sensitive method for detecting and measuring trace amount of clinically relevant substances in the future.
$1,000\;{\mu}g/ml$의 카드늄이 함유된 배지에서 배양된 고도 카드늄 내성 Hansenula anomala B-7의 intact cell은 카드늄이 함유되지 않은 배지에 재배양하면 쉽게 용균된다. 그러나 이 intact cell을 $1,000\;{\mu}g/ml$의 카드늄이 함유된 배지에 배양하면 용균이 일어나지 않을 뿐 아니라 왕성하게 재증식 한다. 더욱이 재배양할시 $Na^+$를 포함한 다른 금속을 배지에 첨가하더라도, 이 intact cell의 용균은 방지 되었다.
멸치액젓으로부터 분리한 혈전용해효소를 rat에 경구투여하여 혈액내에서 효소활성을 확인 하였다. 경구투여 후 0, 1, 2, 3, 4시간 후에 혈액을 채취하여 fibrin분해활성을 본 결과 1시간부터 활성이 나타나기시작하여 3시간째에 가장 높았다. Euglobulin Iysis time(ELT)도 경구투여 2, 3시간후에 활성을 보였다. 또한, euglobulin에 의한 amidolysis acti-vity도 1시간부터 활성이 보이기 시작하여 3시간후에 최고활성에 달했다. 이상의 결과로 동물실험을 통한 혈전용해효소의 경구투여에 의한 활성을 혈액내에서 확인할 수 있었다.
Although there are several methods for the preparation of mitochondrial DNA (mtDNA) from mammalian tissues, most are relatively long ultracentrifugation or manipulations by a small-scale method. We escribed a rapid method for large-scale extraction of mtDNA from human placental and horse liver tissues. The method is based on the preparation and homogenization of tissues, urification of crude mitochondria by differential centrifugations and isolation of mtDNA by alkaline Iysis. It was improved from Pre-existing methods by replacing some steps with simpler ones and discarding many others. This method gives a high yield of pure mtDNA(approximately 1-5mg from one placenta; ca. 400-600 g wet weight), depending on its sources (fresh tissue gave better results than frozen one). The resulting mtDNA indicated that this method can yield mtDNA in sufficient purity and quantity to identify the direct restriction analysis on agarose gel, random-primed labeling as a probe, and end labeling. Therefore, the method is ideal for obtaining good mtDNA samples to conduct routine restriction fragment length polymorphism (RFLP) analyses of natural populations for genetic studies.
This paper describes that study which construct a theoretic and experimental algorithm in order to make the automatic correction system od detent spring, and when load for correction pressed at spring, it can be found elastic and plastic deformation quantities by Finite Element Analysis. As a result, it has been found that the simulation datas are in good agreement with experimental results.
In order to examine if arsenic, one of environmental stresses, contributes to hypertension as one of cardiovas cular pathological factors, this study was perfarmed in vivo and in vitro, using intacted or pithed rats and aorta ring preparation, respectively. And also the relationship between expression of heat shock protein (HSP) 90 and vasoactives-induced contractile response was elucidated. To measure blood pressure, the carotid arterial pressure was recorded on physiograph(Grass Co. 79E) connected to strain gauge. On the other hand, contractile response of vascular ring preparation isolated from rat was determined in organ bath and was recorded on physiograph connected to isometric transducer. And HSP was detacted by Western blotting whole cell Iysis. Preganglionic nerve stimulation was increased by 26.0% in arterial pressure of rat treated with arsenic. Vascular contractile response was monitored and HSP were measured by Western blotting of whole Iysis prepared from samples exposed with 0, 0.5, 1, 2 and 4 mM of arsenic for 8 hours. The dose-vascular responses of potassium chloride were augmented by increasing dose of arsenic in the strips exposed to arsenic for 8 hours, and were not augmented for 1, 3, 5 hours. And the response of relaxation of rat aorta induced by histamine was not influenced by arsenic stress. The increase of HSP 90 expression in rat aorta was pronounced at 8 hours after 4 mM of arsenic treatment, but HSP 60 expression was not. Arsenic stress not only increased the expression of HSP 90 in the rat aorta, but also augmented contractions to potassium chloride. These results indicated that arsenic stress was sufficient to induce heat shock protein 90, resulting in increased vascular contractility in rat aorta.
Lactobacillus sp. GM7311이 생산하는 박테리오신의 작용 특성을 알아보기 위하여, 배양이 진행 중인 세 가지 시험균주의 TSB 배양액에 일정한 시간 간격별로 최종 농도 100 BU/ml가 되도록 박테리오신을 첨가한 후 그 균수 변화와 작용 특성을 살펴보았다. 시험 균주의 증식 시기별로 박테리오신을 첨가한 경우 Proteus mirabilis의 경우는 대수증식기 중기 이전까지의 지시균에 대해서 강한 억제작용을 보이는 반면, Vibrio parahaernolricus와 Escherichia coli는 첨가 시기 모두에서 급격한 균수 감소를 보였으며 다만 정지기에 있어서는 저해 효과가 적었다. 또한 박테리오신을 처리한 세 가지 시험 균주를 전자현미경으로 관찰했을 때, Lactobacillus sp. GM7311이 생산하는 박테리오신은 시험 균주의 세포벽 파괴와 함께 세포 내용물을 유출시키는 bacteriolytic action 형태를 보였다. 증식 시기별로 박테리오신을 첨가하여 각 균주별로 가장 큰 영향을 받은 증식시기를 선택해서 박테리오신을 처리한 후, 아미노산 및 지방산 조성을 분석하여 박테리오신을 처리하지 않은 대조구와 비교하였다. 이 실험에서 아미노산의 경우는 세 균주 모두에서 대부분의 성분이 크게 감소하는 경향을 보였으며, 지방산은 크게 감소하는 성분은 없었지만 각 성분들의 함량이 대체적으로 증가하거나 감소하는 변화를 나타내었다.
The study was attempted to scrutinize the normal osmotic fragility of erythrocytes in domestic poultry such as chicken, quail and duck making a comparison with that in domestic mammalia such as dog and pig. Osmotic fragility of erythrocytes was determined on blood samples from 10 healthy adult animal in each species. Optical initial hemolysis of erytyrocytes occurred at $0.395{\pm}0.03%$ Nacl for chicken, $0.410{\pm}0.03%$ for duck, $0.440{\pm}0.02%$ for quail, $0.470{\pm}0.05%$ for dog and $0.560{\pm}0.03%$ for pig. Optical complete hemolysis of erytyrocytes occurred at $0.270{\pm}0.02%$ Nacl for chicken, $305{\pm0}.03%$ for duck, $0.360{\pm}0.02%$ for quail, $0.370{\pm}0.03%$ for dog and $0.455{\pm}0.03%$ for p. In other words, erythrocytes of poultry have stronger resistance to osmotic Iysis than that of mammalia, showing the strongest resistance In chicken among the tested poultry.
Lactobacillus sp. GM7311이 생산하는 박테리오신의 Gram 양성균에 대한 작용 형태를 알아보기 위하여, 세가지 시험균주의 TSB 배양액에 일정한 시간 간격별로 $100\;Bu/m{\ell}$ 되도록 박테리오신을 첨가한 후 그 균수 변화와 작용 특성을 살펴보았다. 우선, 시험 균주의 증식 시기별로 박테리오신을 첨가한 경우 Listeria monocytogenes는 대수증식기 후기 이후에 억제작용을 나타낸 반면, Bacillus subtilis의 경우는 대수증식기 중기 이전까지의 시험균에 대해서 강한 억제작용을 보였으며, Staphylococcus aureus는 정지기 이전의 시험균에 대해 큰 항균 효과를 나타냈다 또한 박테리오신을 처리한 세 가지 시험 균주를 전자 현미경으로 관찰했을 때, L. monocpogenes와 B. subtilis는 세포벽 파괴에 의한 세포내 물질의 유출이 관찰되었으나, S. aureus는 다른 두 균주와 달리 박테리오신에 의한 세포벽의 파괴 현상은 없었으며 다만 세포벽이 대조구에 비해 엷어진 것이 관찰되었다. 아미노산 및 지방산 조성의 변화를 조사하여 박테리오신을 처리하지 않은 대조구와 비교하였을 때, 아미노산의 경우는 세 균주 모두에서 대부분의 성분이 감소하는 경향을 보였고 지방산은 큰 조성상의 변화나 공통된 특정지방산 성분의 감소 등은 나타나지 않았으며 각 성분들의 함량이 증감하는 경향을 보였다.
Tissues from woody plant contain higher amount of phenolic compounds and polysaccharides, which give inhibitory effects on reverse transcriptase and/or Taq ploymerase. The common multiple-step protocols using several additives to inhibit polyphenoic compounds during nucleic acid extraction are time consuming and laborious. Sodium sulfite (Na$_2$SO$_3$) was used as inhibitor of polyphenolic oxidases in extraction buffer and compare it's effect between commercial RNA extraction kit and small-scale double-stranded RNA (dsRNA) extraction by RT-PCR. During nucleic acid extraction procedure, addition of 0.5%-1.5% (w/v) sodium sulfite to Iysis buffer or STE buffer resulted in lighter color change than extracts without sodium sulfite and improve the RT-PCR detection. When commercial RNA extraction kit used, optimal concentration of sodium sulfite were variable according to the host plant. However, using dsRNA as RT-PCR template, 1.5% sodium sulfite in STE buffer improves the detection of both viruses and unspecific amplifications were reduced significantly, Furthermore, when viruses existed at low titers in host plant, small-scale dsRNA extractions were very reliable.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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