Recent development in the immunochemical technique has resulted in a new ultrasensitive analytical method known as liposome immunoassay (LIA). Liposome is a key element in performing liposome immunoassays, specifically designed to participate in immune reactions. A variety of markers can be encapsulated in liposomes and used as quantitative indicators of reactions. Liposome immunoassay based on agglutination, complement-mediated Iysis, cytolysin-mediated Iysis, detergent-mediated Iysis or destabilization of the liposomal membrane have been reviewed. The quantity of markers released from liposomes should be proportional to the concentration of the analytes. Therefore, liposomal agglutination and Iysis which are essential to liposomal Iysis are critically reviewed to provide a better understanding of liposome immunoassay. Based on the literature review of recent advances in liposome immunoassay for bioactive substances, this assay method may provide a convenient, specific and highly sensitive method for detecting and measuring trace amount of clinically relevant substances in the future.
The yeast, Hansenula anomala B-7, isolated from the $Cd^{2+}$ rich soils and determined to be tolerant in the high concentration of $Cd^{2+}$ were employed in this work. Its intact cells grown in high concentration of $Cd^{2+}$ were observed to be Iysed at the early stage when transferred to a cadmium deficient broth. Its intact cells found to be not Iysed and grow well under the high concentration of $Cd^{2+}$. The Iysis of the intact cells grown at the high concentration of $Cd^{2+}$ ion was not found when the metal ions were replaced with $Cd^{2+}$ ion in the same concentration. This result indicated that Iysis of yeast cells, at least in this isolate, would be related to cell osmosis with the mineral ions added.
Effect of oral administration with fibrinolytic enzyme isolated from fermented anchovy(the traditional fermented food in Korea called Myulchi Jeot-gal) and its functionally active enzyme to rat, activation of plasma fibrinolysis was observed. The euglobulin fibrinolytic activities and the plasma levels of H-D-Val-Leu-Lys-pNA(S-2251) amidolysis reached a maximum at 3 hours after the administration to rat. And euglobulin Iysis time(ELT) value after oral admi-nistration showed its activity 2∼3 hours later. From the above result, it was confirmed the enzyme activity in blood by oral administration fibrinolytic enzyme through animal experiment.
Although there are several methods for the preparation of mitochondrial DNA (mtDNA) from mammalian tissues, most are relatively long ultracentrifugation or manipulations by a small-scale method. We escribed a rapid method for large-scale extraction of mtDNA from human placental and horse liver tissues. The method is based on the preparation and homogenization of tissues, urification of crude mitochondria by differential centrifugations and isolation of mtDNA by alkaline Iysis. It was improved from Pre-existing methods by replacing some steps with simpler ones and discarding many others. This method gives a high yield of pure mtDNA(approximately 1-5mg from one placenta; ca. 400-600 g wet weight), depending on its sources (fresh tissue gave better results than frozen one). The resulting mtDNA indicated that this method can yield mtDNA in sufficient purity and quantity to identify the direct restriction analysis on agarose gel, random-primed labeling as a probe, and end labeling. Therefore, the method is ideal for obtaining good mtDNA samples to conduct routine restriction fragment length polymorphism (RFLP) analyses of natural populations for genetic studies.
Proceedings of the Korean Society of Precision Engineering Conference
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1995.10a
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pp.1150-1153
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1995
This paper describes that study which construct a theoretic and experimental algorithm in order to make the automatic correction system od detent spring, and when load for correction pressed at spring, it can be found elastic and plastic deformation quantities by Finite Element Analysis. As a result, it has been found that the simulation datas are in good agreement with experimental results.
In order to examine if arsenic, one of environmental stresses, contributes to hypertension as one of cardiovas cular pathological factors, this study was perfarmed in vivo and in vitro, using intacted or pithed rats and aorta ring preparation, respectively. And also the relationship between expression of heat shock protein (HSP) 90 and vasoactives-induced contractile response was elucidated. To measure blood pressure, the carotid arterial pressure was recorded on physiograph(Grass Co. 79E) connected to strain gauge. On the other hand, contractile response of vascular ring preparation isolated from rat was determined in organ bath and was recorded on physiograph connected to isometric transducer. And HSP was detacted by Western blotting whole cell Iysis. Preganglionic nerve stimulation was increased by 26.0% in arterial pressure of rat treated with arsenic. Vascular contractile response was monitored and HSP were measured by Western blotting of whole Iysis prepared from samples exposed with 0, 0.5, 1, 2 and 4 mM of arsenic for 8 hours. The dose-vascular responses of potassium chloride were augmented by increasing dose of arsenic in the strips exposed to arsenic for 8 hours, and were not augmented for 1, 3, 5 hours. And the response of relaxation of rat aorta induced by histamine was not influenced by arsenic stress. The increase of HSP 90 expression in rat aorta was pronounced at 8 hours after 4 mM of arsenic treatment, but HSP 60 expression was not. Arsenic stress not only increased the expression of HSP 90 in the rat aorta, but also augmented contractions to potassium chloride. These results indicated that arsenic stress was sufficient to induce heat shock protein 90, resulting in increased vascular contractility in rat aorta.
The antimicrobial action of bacteriocin produced by lactobacillus sp. GM7311 against three Gram negative bacteria, Proteus mirabilis, Vibrio parahaemolyticus, and Escherichia coli, was investigated, When the bacteriocin was added to the culture at different stages, viable cells of all of the indicator strains tested were decreased, even though the most inhibited indicator cell growth stages were different. Transmission electron microscopic observation of indicator strains treated with bacteriocin revealed cell Iysis, indicating the cell membrane appears to be the primary site of action. The amino acids concentration of indicator strains treated with bacteriocin were diminished and fatty acids compositions were changed as compared with controls.
The study was attempted to scrutinize the normal osmotic fragility of erythrocytes in domestic poultry such as chicken, quail and duck making a comparison with that in domestic mammalia such as dog and pig. Osmotic fragility of erythrocytes was determined on blood samples from 10 healthy adult animal in each species. Optical initial hemolysis of erytyrocytes occurred at $0.395{\pm}0.03%$ Nacl for chicken, $0.410{\pm}0.03%$ for duck, $0.440{\pm}0.02%$ for quail, $0.470{\pm}0.05%$ for dog and $0.560{\pm}0.03%$ for pig. Optical complete hemolysis of erytyrocytes occurred at $0.270{\pm}0.02%$ Nacl for chicken, $305{\pm0}.03%$ for duck, $0.360{\pm}0.02%$ for quail, $0.370{\pm}0.03%$ for dog and $0.455{\pm}0.03%$ for p. In other words, erythrocytes of poultry have stronger resistance to osmotic Iysis than that of mammalia, showing the strongest resistance In chicken among the tested poultry.
The bacteriocin produced by Lactobacillus sp. GM7311 showed strong inhibitory activity against the growth of three Gram positive bacteria, Listeria monocytogenes, Bacillus subtilis, and Staphylococcus aureus. When the bacteriocin was added to the culture at different phases, viable cells of all of the tested strains were decreased, although the most inhibited phase was different. Thereby, when the bacteriocin $(100\;Bu/m{\ell})$ was added to exponential and stationary phase of L. monocytogenes, the rapid reduction of viable cell counts occured. And, in the case of B. subtilis, the highest inhibitory effect occured at lag phase and mid-exponential phase by the addition of the bacteriocin under same condition as mentioned above. Also, we can observe the accelerated reduction of survivors counts for the all of the phase except stationary phase in the S. auresus. Transmission electron microscopic observation of L. monocrogenes and B. subtilis treated with bacteriocin revealed apparent Iysis of the cell wall and excretion of the cell contents, indicating bacteriolysis. Also, the amino acids and fatty acids compositions were different from controls. However, the Iysis of cell wall didn't occur in S. aureus, though the cytoplasmic materials were reduced. This result indicates that the bacteriocin inhibits the synthesis of nuclear materials such as DNA, RNA and proteins.
Proceedings of the Korean Society of Plant Pathology Conference
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2003.10a
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pp.139.1-139
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2003
Tissues from woody plant contain higher amount of phenolic compounds and polysaccharides, which give inhibitory effects on reverse transcriptase and/or Taq ploymerase. The common multiple-step protocols using several additives to inhibit polyphenoic compounds during nucleic acid extraction are time consuming and laborious. Sodium sulfite (Na$_2$SO$_3$) was used as inhibitor of polyphenolic oxidases in extraction buffer and compare it's effect between commercial RNA extraction kit and small-scale double-stranded RNA (dsRNA) extraction by RT-PCR. During nucleic acid extraction procedure, addition of 0.5%-1.5% (w/v) sodium sulfite to Iysis buffer or STE buffer resulted in lighter color change than extracts without sodium sulfite and improve the RT-PCR detection. When commercial RNA extraction kit used, optimal concentration of sodium sulfite were variable according to the host plant. However, using dsRNA as RT-PCR template, 1.5% sodium sulfite in STE buffer improves the detection of both viruses and unspecific amplifications were reduced significantly, Furthermore, when viruses existed at low titers in host plant, small-scale dsRNA extractions were very reliable.
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