• 환경생물
• /
• 제19권3호
• /
• pp.211-217
• /
• 2001

식물의 저항성과 방어관련물질 유도에 관련된 salicylate가 담배 미분화세포로부터 분리된 isoperoxidase $A_3$의 활성에 미치는 영향을 살펴보고, $Fe^{2+}$ 의 첨가에 의하여 salicylate에 의한 효소활성 억제가 보호되는 양상을 조사하였다. 다양한 농도의 salicylate가 isoperoxidase $A_3$의 활성에 미치는 영향을 조사한 결과 0.48mM salicylate에 의하여 isoperoxidase $A_3$의 활성이 약 20% 감소되었고, 0.6mM salicylate에 의하여 효소활성이 85% 이상 감소되었다. 이러한 결과는 salicylate에 의하여 isoperoxiase $A_3$가 억제됨을 보여준다. Salicylate에 의한 isoperoxidase $A_3$의 억제반응은 pH 의존적으로 일어났을 뿐만 아니라, noncompetitive inhibition 양상을 나타냈다. 뿐만 아니라 salicylate에 의한 isoperoxidase $A_3$의 활성억제는 $Fe^{2+}$ 첨가에 의하여 거의 완벽하게 보호되었다. Isoeroxidase A3로부터 heme부분을 제거하여 apoperoxidase를 제조한 후 여러가지 금속이온이 apoperoxidase의 활성회복에 미치는 효과를 조사하였다. 그 결과 hemin과 $Fe^{2+}$ 첨가에 의하여 apoperoxidase의 활성이 80% 이상 회복되었으나 $Cu^{2+},\;Zn^{2+},\;Co^{2+},\;Mn^{2+}$ 등은 apoperoxidase의 활성을 재구성시키지 못하였다.

• 한국잡초학회지
• /
• 제14권1호
• /
• pp.56-61
• /
• 1994

귀리의 근단(根端) 조직(組織)에 alachlor $1{\times}10^{-4}$ M 처리후(處理後) 음(陽)이온의 과산화(過酸化) 효소(酵素)를 유출(抽出)하여 에탄올과 이온 교환 수지인 DEAE-celluose 및 CM-sephadex를 이용하여 정제(精製)한 결과(結果), 약 30배의 정제율(精製率)을 얻었으며, 3개의 음(陽)이온을 띤 동위(同位) 효소(酵素)가 존재(存在)하였다. 귀리 근단(根端)에 존재(存在)하는 주(主)된 과산화(過酸化) 효소(酵素)(B fraction)는 최종(最終) 정제후(精製後) 전체(全體) 동위과산화(同位過酸化) 효소중(酵素中) 65%를 차지하였으며, 37배로 정제(精製)되었다. SDS-PAGE를 이용하여 B부분을 전개(展開)한 결과(結果), 단일(單一) band를 얻었으며, 이 때 분자량(分子量)은 약 42,500으로 추산(推算)되었다. 기내에서 동위(同位) 과산화(過酸化) 효소(酵素)의 활성(活性)은 IAA에 의하여 감소(減少)되었다. 50unit 동위(同位) 과산화(過酸化) 효소(酵素)를 귀리에 처리시(처리處理時) 무처리구(無處理區)에 비하여 근단(根端)의 세포분제(細胞分製)은 70.2%, 초엽의 세포신장(細胞伸長)은 54.2% 억제(抑制)되는 현상을 보였다.

• 한국산림과학회지
• /
• 제51권1호
• /
• pp.36-40
• /
• 1981

소나무속(屬) 23수종(樹種)의 침엽(針葉) Peroxidase 동위효소(同位酵素)를 전분(澱粉)겔 전기영동법으로 분석하였다. 각종(種)마다 특유(特有)의 밴드형(型)을 가지고 있었으며 이들 밴드형(型)은 7개군(個群)으로 나눌 수 있었다. 이가운데 제II군(群)은 어느 수종(樹種)에서나 나타나서 소나무속(屬)의 고유형(固有型)으로 추정(推定)하였다. 이들 7개군(個群)은 고전적(古典的) 형태분류군(形態分類群)과는 확실(確実)한 관계(関係)를 발견(発見)할 수 없었다.

• BMB Reports
• /
• 제29권2호
• /
• pp.137-141
• /
• 1996

A partial cDNA encoding a Korean radish isoperoxidase was obtained from a cDNA library prepared from 9 day old radish root. In order to obtain Korean radish isoperoxidase cDNA, 5' RACE (rapid amplification cDNA end) PCR was performed and a cDNA (prxK1) encoding a complete structural protein was obtained by RT (reverse transcription)-PCR. Sequence analysis revealed that the length of the cDNA was 945 base pairs, and that of the mRNA transcript was ca. 1.6 kb. The deduced amino acid of the protein were composed of 315 amino acid residues and the protein was 92% homologous to turnip peroxidase, and 46% to 50% homologous to other known peroxidases. The 945 bp cDNA encoding Korean radish isoperoxidase was overexpressed in Escherichia coli up to approximately 9% of total cellular protein. The recombinant fusion protein exhibited 43 kDa on SDS-PAGE analysis and the activity level of the recombinant nonglycosylated protein was two fold higher in IPTG induced cell extracts than that of uninduced ones.

• BMB Reports
• /
• 제33권4호
• /
• pp.312-316
• /
• 2000

Effects of various nitrogenous compounds on the peroxidative activity of Korean radish (Rophanus sativus L.) isoperoxidase $A_1$ were examined by using anilino substrates, such as dianisidine and phenylenediamine. We also used phenolic substrates such as guaiacol, chlorogenic acid, caffeic acid, ferulic acid and esculetin. The peroxidation of dianisidine was stimulated by adenine and imidazole as much as 5 fold and 11 fold, respectively at pH 8. Moreover, about 4.8 fold and 8 fold stimulation of phenylenediamine peroxidation occurred by adenine and imidazole, respectively at pH 8. The stimulation by adenine and imidazole did not occur at the acidic pH range. The peroxidations of phenolic substrates, such as guaiacol, chlorogenic acid, caffeic acid, ferulic acid and esculetin, were not boosted greatly by any of the nitrogenous compounds tested. Notably, ammonium salt, which has been known for the excellent booster of horseradish peroxidase, did not affect the peroxidation of the Korean radish isoperoxidase $A_1$. The kinetic studies of dianisidine peroxidation with imidazole, as a model of boosting reaction, showed that neither the affinity of imidazole against dianisidine, nor the activation energy of dianisidine peroxidation changed during the activity boosting of isoperoxidase $A_1$.

• BMB Reports
• /
• 제30권6호
• /
• pp.379-384
• /
• 1997

The effects of several ions on the specific activity and isozyme patterns of cellular and secretory isoperoxidases were studied in suspension-cultured cells of rice (Oryza sativa L.). Peroxidase release into the culture medium occurred in the absence of added calcium. The addition of calcium ion greatly stimulated the secretion of cationic isoperoxidases such as C2 and C3 into the medium: a maximum 11 fold increase of secretions occurred in the presence of 5 mM $CaCl_2$, and the secretion was accomplished within 1 hour after the addition of $CaCl_2$. About a 10 fold increase of the peroxidase secretion into the medium did occur with 0. 5% NaCl, whereas cellular isoperoxidase levels were reduced notably. About a 6 fold increase of the specific activity of cellular isoperoxidase was found in 5 mM $NiCl_2$-treated cell, while $NiCl_2$ had no effect on the secretion of peroxidase into the medium. Various concentrations of KCl did not change peroxidase secretion, but 5 mM $ZnCl_2$ reduced peroxidase secretion greatly. The major secretory isoperoxidases stimulated by $CaCl_2$, NaCl and cellulase were composed of cationic isoperoxidases C2 and C3, which were found to be localized in the cell wall of rice by examination of the enzyme in the protoplast. Furthermore, the secretion rates of secretory isoperoxidases were increased rapidly when cellulase was treated in the absence of the osmotic stabilizer of 0.4 M mannitol. These results suggest that the stimulations of secretory isoperoxidase levels seem to be due to the stimulation of secretion into the culture medium of rice.

• 한국산림과학회지
• /
• 제36권1호
• /
• pp.1-4
• /
• 1977

본연구(本硏究)는 생장(生長)이 우수(優秀)하여 선발(選拔)한 ${\times}$P. albaglandulosa 15 clone의 엽(葉)에 대(對)하여 과산화동위효소변이(過酸化同位酵素變異)를 전기영동법(電氣泳動法)에 의(依)거 조사(調査)하여 다음과 같은 결과(結果)를 얻었다. 15 clone의 총(總) band수(數)는 6~11본(本)이다. 그중(中) 활성(活性) band수(數)는 4~7본(本)이고 흔적(痕迹) band는 1~4본(本)으로서 어느 clone에서나 활성(活性) band가 다수(多數)히 출현(出現)하였다. 그리고 cathode측(側)은 anode보다 band의 출현(出現)이 어느 clone에서도 단조(單調)로웠다. 한편(便) 효소형(酵素型)이 각(各) clone마다 특이(特異)하여 clone시별(識別)을 가능(可能)케 하였으며 g와 1 band는 ${\times}$P. albaglandulosa의 고정(固定) band이다. 또한 ${\times}$P. albaglandulosa가 $F_1$인 까닭에 효소형(酵素型)의 유전적(遺傳的) 변이(變異)가 인정(認定)되었다.

• 한국식물학회:학술대회논문집
• /
• 한국식물학회 1987년도 식물생명공학 심포지움 논문집 Proceedings of Symposia on Plant Biotechnology
• /
• pp.357-389
• /
• 1987

In an attempt to clarify the physiological functions of individual isoperoxidases, we have studied enzymatic and immunological properties as well as cellular distribution of isoperoxidases from tobacco callus and Korean radish. The gene expression patterns of isoperoxidases in shoot and non-shoot-forming tobbaco callus were also examined by rabbit reticulocyte lysatein vitro translation system. These results indicate that fraction of translatable poly(A)-isoperoxidase mRNA was increased considerably in shoots. At the present time, at least 6-7 isoperoxidases could be detected from the translation mixture of total cellular RNA, among which only one cell wall localized anodic isoperoxidase (named A3) mRNA was bimorphic mRNA. These data suggest the possible regulation of peroxidase activity during shoot formation by altering the polyadenylation state of mRNA. In case of Korean radish seedlings, poly(A)- peroxidase mRNA were also increased depending upon aging.

• Applied Biological Chemistry
• /
• 제31권2호
• /
• pp.205-210
• /
• 1988

식물은 생장조절제에 의한 녹두의 부위별 peroxidase, catalase활성과 전기영동상 peroxidase 동위효소의 변화를 조사하였다. 녹두의 생육이 진행됨에 따라 하배축을 제외하고는 peroxidase 활성도는 증가하였으나 catalase 활성도는 감소하여 서로 상반된 결과를 나타내었다. 암발아시킨 녹두에 $GA_3$와 ABA를 각각 처리하면 peroxidase 활성도의 증가에 대하여 자엽에서만 $GA_3$가 ABA 보다 더 큰 영향 을 끼쳤으나 catalase 활성도 변화는 ABA가 $GA_3$ 보다 더 큰 영향을 끼쳐 모든 부위에서 활성도를 증가시켰다. $GA_3$와 ABA를 혼합하여 처리하면 효소활성도의 변화 경향은 $GA_3$보다 ABA에 더 큰 영향을 받았다. Peroxidase 동위효소의 수는 발아, 생육이 진행됨에 따라 모든 부위에서 계속 증가하여 활성도와는 무관하게 발아 후 6일째에 가장 많이 나타났으며, 호르몬의 처리에 따른 동위효소의 변화는 동위효소의 수에 대해서 보다는 intensity에 대하여 더 큰 영향을 받은 것으로 나타났다.

• 한국산림과학회지
• /
• 제30권1호
• /
• pp.42-49
• /
• 1976

참싸리 부위별 과산화동위효소형의 변이를 알고저 전기영동법에 의하여 효소형을 조사한 바, 동일 개체에서 동시에 채취한 동일부위의 과산화동위효소형의 변이는 없었으며 공동출현 "밴드"는 부위별로 차이가 있어 잎, 인피, 세근에서는 7번"밴드"자방에서는 35번"밴드"가 나타났으며 부위별 개체별 과산화동위효소형의 변이가 있었고 성숙된 잎을 제외하고는 개체간 과산화동위효소형의 색정농도에 차이가 있었다.