• 한국미생물·생명공학회지
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• 제21권1호
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• pp.18-22
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• 1993

Oligofructo당 생산에 이용될 수있는 endoinulinase 분석방법은 그 균주가 endo- 및 exoinulinase를 함께 내는 경우, 일반적인 환원당 분석법으로는 정량하기가 어려워진다. 이 실험에서는 endoinulinase만을 선택적으로 정량하기 위한 하나의 방법으로써 항체 분석법을 이용하였다. Aspergillus niger ATCC 16882 조효소액을 CM-DEAE ion exchange chromatography, pI 2.5-5에서 preparative isoelectric focusing, HPLC gel filtration을 통해 순수하게 endoinulinase에 대한 항체를 얻었다.DEAE-ion exchange 및 protein A에서 정제된 이항체는 immunoassay 한 결과, exoinulinase 가 아닌 endoinulinase와 만 특이하게 반응하였고, immuno affinity chromatography 결과들은 배양액 중의 다른 단백질과 반응하지 않음이 확인되었다. 이눌린을 유일한 탄소원으로 한 배지에서 자란 1200여개의 야생균주들로부터 배양 특성이 우수한 균주를 1차로 선별하고 이 균주들의 endoinulinase 함량을 rocket immunoassay를 통하여 조사하였다. 이 중 1개의 균주는 Novozyme의 ATCC 1688와 비교할만한 정도의 endoinulinase를 배양액 중에 분비함을 확임할 수 있었다.

• 한국식품저장유통학회지
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• 제19권3호
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• pp.438-442
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• 2012

칼슘보충제로 칼슘 결합 펩타이드를 만들기 위해, 보리 단백질에 Flavourzyme을 사용하여 18시간 동안 가수분해 하였고, 가수분해 된 보리 단백질은 3 kDa 이하로 한외여과 하였다. 한외여과 된펩타이드는 ion exchange chromatography와 normal-phase HPLC를 사용하여 칼슘 결합 펩타이드를 분리하였고, 분리된 각 분획의 칼슘결합력을 측정하였다. 그 결과 가장 높은 칼슘 결합력을 보인 분획을 칼슘 chelation을 위한 소재로 얻었고, 따라서 본 연구 결과 얻어진 보리 단백질 가수분해물은 칼슘보충제로의 사용이 가능하다고 판단된다.

• 공업화학
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• 제9권3호
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• pp.435-439
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• 1998

페녹시기와 트라이풀루오르에톡시기가 함께 치환된 포스파젠 고분자를 기초로 한 새로운 형태의 이온교환 분리막 재질을 제조하였다. 합성된 고분자의 구조를 핵자기 공명 분석기, 적외선 흡광 분석기, 원소 분석기와 겔침투 분석기를 통해 확인하였다. 기본 포스파젠 분리막은 친수성과 이온 투과성을 높이기 위해 술폰화시켰다. $[NP(OC_6H_4SO_3H)_{1.58}(OCH_2CF_3)_{0.42}]_n$으로부터 얻은 분리막을 상용 분리막과 비교한 결과 매우 뛰어난 이온운반율, 면적 저항 및 이온교환용량을 나타내었다.

• 미생물학회지
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• 제23권4호
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• pp.271-281
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• 1985

Bacillus thuringiensis var. thuringiensis produces an extracellular insecticidal thermostable .betha.-exotoxin, which was purified through microfiltering, barium precipitation, charcoal absorption chromatography, ion exchange column chromatography and gel filtration. The exotoxin in each purification step was detedted by thin layer chromatography, high pressure liquid chromatography and paper electrophoresis with efficient results. The exotoxin productivity on time course was checked by spectrophotometric absorbance at 258nm with the result that the exotoxin was initially produced in 6 hour culture and reached maximum value in 36 hour culture. Anti-bacterial effect test on Micrococcus flava was applied as toxicity test. The results showed that frowth inhibition of M. flava could be shown in plate assay of cell free filtered supernatant, alkaline eluant from charcoal and purified exotosin obtained from gel filtration column chromatography on Sephadex G-10 appeared to be 740. Heat stability of the exotoxin was confirmed through autoclaving twice.

• 분석과학
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• 제7권2호
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• pp.201-204
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• 1994

리튬 동위원소의 분리를 위하여, 양이온 교환 컬럼 크로마토그래피를 수용액 이온 교환시스템 중에서 수행하였다. 실험에는 길이 50cm, 안 반지름 6mm의 파이렉스 유리 컬럼을 사용하였다. 컬럼 크로마토그래피에서 용리액으로는 염산 숙신산 혼합용액을 사용하여 1.0068의 분리인자 값을 얻었다. 이 실험으로부터 가벼운 $^6Li$는 수지상에 농축되고, $^7Li$는 용액상에 농축됨을 확인하였다.

• Journal of Animal Science and Technology
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• 제46권1호
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• pp.77-82
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• 2004

본 연구는 우유의 angiogenin(ANG) 생리활성기능을 조사하기 위한 전단계로 ANG 정제 방법을 확립하기 위하여 실시하였다. 우유로부터 ANG을 CM-Sepharose ion exchange chromatography, HPLC, Gel-filtration의 3단계 방법을 이용하여 정제하였다. 1단계인 CM-Sepharose ion exchange chromatography를 수행 한 결과 0.6 M NaCl 농도의 36번 분획에서 ANG의 밴드를 볼 수 있었고 2단계인 Mono-S 컬럼을 이용하여 HPLC를 수행한 결과에서는 1.0 M에서 하나의 peak가 분리되었고 전기영동 결과는 LF와 ANG 두 가지 성분이 함유되어 있음을 확인하였다. 마지막 단계인 Gel-filtration을 수행한 결과 ANG이 단일 밴드로 분리되었다. 우유 10 $\ell$로부터 약 80 ${\mu}\ell$의 ANG를 얻었고 정제된 ANG을 N-말단 아미노산 배열을 분석한 결과 AQDDYRYIHFLTQHY로 밝혀졌다.

• 한국가축번식학회지
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• 제12권1호
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• pp.51-62
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• 1988

hCG로 면역화된 생쥐의 비장세포와 골수종양세포(SP 2/0 Ag14)를 융합하여 hCG에 대한 단일클론항체를 생산하는 잡종세포(hybridoma)를 얻었다. 생산된 면역글로부린 type과 titer 그리고 면역분석법 이용시 감도 등을 조사함으로써 그 특성을 조사하였다. 배지나 복수내에 존재하는 항체를 순수분리 정제하기 위하여 gel-filtration, DEAE-ion exchange chromatography, 그리고 affinity chromatography 원리에 의한 방법 등을 사용하여 전기영동(SDS-PAGE)으로 순수도를 조사함으로 상호 비교하였다. 또한 hCG의 정량을 위하여 항체를 plastic tube에 피복시킨 것과 화학발광체로 표지된 항체를 이용한 소위 two-site immunochemiluminometric assay(ICMA)를 개발하여 생산된 항체의 이용가능성을 제시하였다.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제32권4호
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• pp.231-242
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• 1994

자연 감염된 가재에서 폐흡충의 피낭유충을 분리하고 개에 경구 감염시켜 성충을 얻었다. 폐흡충 성충의 조효소를 ion-exchange chromatography, affinity chromatography와 gel filtration chromatoglaphy를 실시하여 cysteine proteinase를 순수 정제하였다. 이들 효소의 생화학적 특성과 분해능을 관찰하였으며. 효소면역전기영동이적법을 이용하여 순수 정제한 효소의 항원성을 관찰하였다. 정제된 효소는 저분자 합성기질인 CBZ-arg-arg-AFC 보다 CBZ-phe-arg-AFC에서 높은 활성을 보였으며. 이들 효소는 thiol-dependent이었다. 정제된 효소 및 조효소의 최적 pH는 5.5이었고. 최적 mole 농도는 0.1 M(0.1 M sodium citrate, pH 5.5)이었고, 이들 효소는 $4^{\circ}C$에서 48시간 동안 80%의 안정성을 보였다 정제된 효소의 native 분자량은 20.000 dalton이었고, SDS- PAGE상에 나타난 분자량은 17,500 dalton이었다 정제된 효소는 cysteine proteinase 특이 억제 인자인 E-64, lodoacetic acid, NEM에 의해 활성이 완전히 억제되었으며, serine proteinase, aspartic proteinase 및 metallo proteinase 특이 억제인자에 의해 활성이 억제되지 않았다. 정제된 효소는 collagen(Type I)과 hemoglobin을 분해하였고, 효소면역전기영동이적법으로 정제된 효소의 항원성을 확인하였다.

• Fisheries and Aquatic Sciences
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• 제6권1호
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• pp.7-12
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• 2003

Chitinase and chitobiase produced by Aeromonas sp. J-5003 were purified and characterized. The chitinase was purified to 19.4 folds by gel chromatography and ion-exchange chromatography with the overall yield of $2.2\%$ and the specific activity of 93.1 unit/mg. The purified enzyme showed a single band on SDS-PAGE with MW 54kDa. The optimum pH and temperature of the purified chitinase were 7.0 and $37^{\circ}C$, respectively, and this enzyme stable in the range of pH 6.0 to 10.0 below $37^{\circ}C$. $Mg^{2+},\;Ca^{2+}\;and\;Na^+$ slightly stimulated the chitinase activity. However, $Hg^{2+}\;and\;Fe^{3+}$ inhibited chitinase activity. The chitobiase was purified by Sephacryl HR-l00 gel chromatography and DEAE-Sephadex A-50 ion-exchange chromatography with 33.5 purification folds and $4.3\%$ yield. The purified enzyme showed a single band with MW 63 kDa. The optimum pH and temperature of the purified chitobiase were 7.0 and $37^{\circ}C$, respectively. And this enzyme was stable in the range of pH 6.0 to 9.0 and at the temperature below $37^{\circ}C$. The enzyme activity was increased by $Mn^{2+}$, but it was inhibited by $Ag^+$.

• Applied Biological Chemistry
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• 제41권7호
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• pp.500-504
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• 1998

Ascorbic acid(AsA)의 산화 안정성 증진을 목적으로 효소적 배당화를 시도하였다. 본 실험에서 사용한 6종의 ${\beta}-galactosidase$에 대한 당 전이 생성물의 수율을 분석 비교한 결과 Asp. oryzae에서 분리한 ${\beta}-galactosidase$의 당 전이활성이 가장 높았으며, 당 공여체인 lactose와 당 수용체인 AsA 함유용액에서 당 전이 수율은 약 30% 수준이었다. 당 전이 생성물은 $Dowex\;1{\times}8$(Cl-형) 수지에 의한 ion exchange chromatography와 Toyopearl 40S gel chromatography에 의해 분리한 다음 동결건조하였다. Asp. oryzae 유래의 ${\beta}-galactosidase$ 존재 하에서 AsA와 lactose의 반응액에서 분리한 생성물은 UV, IR, CI-MS, $^1H-NMR,\;^{13}C-NMR$ 등을 이용한 기기분석, 산 및 ${\beta}-galactosidase$에 의한 가수분해 특성을 조사한 결과 AsA에 galactose 1분자가 결합된 $6-O-{\beta}-_D-galactopyranosyl-_L-ascorbic\;acid$로 판명되었다.