Identification of spermatogonial stem cell-specific surface molecules is important in understanding the molecular mechanisms underlying the maintenance and differentiation of these cells. We have found that spermatogonia from busulfan treated mice expressed an autoantigen that distinguishes between undifferentiated and differentiated spermatogonia. Four to six weeks after busulfan treatment, germ cells located in the basal compartment of seminiferous epithelium show isotype-specific IgG deposits that form due to autoimmunity. Before busulfan treatment, the level of testicular IgG was very low but IgG levels began to increase after week 4 and peaked at week 6. When cells from the busulfan treated testis were analyzed using laser scanning cytomeoy (LSC), the frequency of cells positive for IgG deposits, 6-integrin, and 1-integrin were 16.5${\pm}$3.8%, 11.8${\pm}$2.6%, and 9.0${\pm}$ 1.4%, respectively. Immunofluorescent staining suggested that most, if not all of the cells with IgG-deposits isolated from a laminin-coated dish, were also positive for a spermatogonial stem cell marker \ulcorner6-integrins as well as for a germ cell-specific marker TRA 98. We determined serum and intratesticular IgG levels and the soundness of seminiferous tubule basement membrane from busulfan treated mice using electron microscopy, in order to study the mechanism responsible for IgG deposits in spermatogonia. We found that the basement membranes of seminiferous tubules from busulfan treated mice were severely impaired when compared to those of normal adult, neonates and w/wv mice. Furthermore, new blood cells were observed in the surface of the damaged basement membrane along the seminiferous tubules. These results suggest that the IgG in spermatogonial stem cells accumulates from circulating blood through the impaired basement membranes induced by busulfan treatment. Taken together, our study suggests that IgG can be used as a new marker for undifferentiated spermatogonia cells.
The present was performed to identify the effects of tributyltin (TBT) in the immature mice testes. 3-week-old male ICR mice were orally administrated on one time basis of TBT dose of O (Vehicle control, VC), 25 (TBT 25 mg/kg, T$_{25}$ ), 50 (TBT 50 mg/kg, T$_{50}$ ), 100 (TBT 100 mg/kg, T$_{100}$ ) mg/kg per each one. After 3 days the time treated of TBT, mice were sacrified and wighted body, testis, epididymis, seminal vesicle, vas deferens, and prostate. As the result of weighing, wights of each oragan and gonad index were tendency decresed in comparing groups of TBT treated with that (C) of unteated (p <0.05). As the result of examination of steroid hormones in the immature male mice, The concentrations of serum and intratesticular testosterone were significatly increased rather than the control group. But concentrations of estradiol were decresed objectly. A group of the highest change of concentrations of steroid hormones is T$_{100}$ . The high dose group, T$_{100}$ , was decreased all of concentrations of steroid hormones rather than those of T$^{25}$ . The result of observation with histological changes in testis showed a tendency for innercellular wall to increase damage and extinction in seminiferous tubles. As the result of investigation apoptotic cell numbers in the testis using teminal deoxy-nucleotidyl transferase -mediated dUTP-digoxygenin nick end-labeling immunohistochemical straia, The ratio of Apoptic cells significantly was incensed in depending on treatment of TBT does. In conclusion, these results shows that TBT triggers apoptosis on reproductive cell in testis and changes level of concentrations of steroid hormones in the immature male mice , as endocrine disruptors (EDs).
We report the case of a 46-year-old Chinese male patient who visited our clinic complaining of infertility. Semen analysis revealed azoospermia, and azoospermia factor c region partial deletion (b1/b3) was detected using Y chromosome microdeletion analysis. Testicular sperm extraction was performed after genetic counseling. The bilateral ductus deferens and a portion of the epididymis were absent, whereas the remaining epididymis was expanded. Motile intratesticular spermatozoa were successfully extracted from the seminiferous tubule. On histopathology, nearly complete spermatogenesis was confirmed in almost every seminiferous tubule. To our knowledge, this is the first case report of b1/b3 deletion with a congenital bilateral absence of the vas deferens and almost normal spermatogenesis.
19-norandrostenedione(19-NORA) is known as an intermediate in the metabolic pathway from androstenedione to estrone. Administration of esterified 19-nortestosterone, anabolic steroid, reduces serum gonadotropin and testosterone concentration, and results in reversible azoospermia in men. 19-NORA have been isolated from testis, but its function in testis is not clear yet. Therefore, this study was designed to determine the effect of 19-NORA on steroidogenesis and on spermatogenesis. 19-NORA was administrated by single intratesticular injection to adult male rats weighing 350-400 g in dose of 1 mg/50${\mu}l$. The serum and testis were collected on 1, 3, 7, 12, 48 hr after injection. The histological differences in testis were observed by routine paraffin method. The concentrations of testosterone and estradiol in serum and in left testis were determined by the conventional radioimmunoassays. One hour after 19-NORA treatment, serum concentrations of testosterone and estradiol increased significantly, compared to those of pre-treated(0 hr) group, and reduced gradually to the control level on 7 hour after injection. The concentration of testosterone in left testis increased slightly 1 hour after injection, and estradiol level increased significantly(p<0.05). Also, testosterone and estradiol level of control group revealed no difference with pre-treated (0 hr) group. Gonad index, structure of seminiferous tubules, and the number of step 7 th spermatid were simillar to control group. The present study suggests that the elevation of testosterone level results from increment of estradiol followed by the rapid metabolism of 19-NORA at 7 hour after injection, and then testosterone concentration may be recovered to control level by feedback mechanism of hypothalamus-hypothysis-testis axis.
최근 고장성(20%) 생리식염수를 흰쥐 정소에 직접 주사할 경우, 혈중 테스토스테론 수준이 최저 수준에 도달하는 화학적 거세 상태에 들어감이 보고되었다. 본 연구는 이러한 간단한 생리 식염수 주사 모델의 효용성을 더 검증하기 위해 정소의 미세 해부 구조상의 변화를 조사하였다. 실험군으로는 무처리군(intact, control), 정소제거군(orchidectomy), 그리고 식염수 주사군(saline-injection)으로 하였으며, 식염수 주사군에는 정소당 $750{\mu}{\ell}$의 멸균한 20% 식염수를 직접 주사하였다. 정소 제거 수술은 식염수 주사가 행해진 날에 시행하였다. 주사후 30일 경과 후에 동물을 희생하여 생식조직들을 채취하고 무게를 측정한 후 조직학적 조사를 위해 고정시켰다. 체중의 경우 무처리 대조군과 비교하여 정소절제군과 식염수 주사군 모두에서 유의한 변화는 없었다. 식염수 주사군의 정소 무게는 무처리 대조군에 비해 유의하게 감소하였다. 부정소와 저정낭의 무게의 경우 무처리 대조군에 비해 정소절제군과 식염수 주사군 모두에서 유의하게 감소하였으며, 전립선의 경우 무처리 대조군에 비해 정소절제군에서는 유의하게 감소하였으며, 식염수 주사군에서는 감소하는 경향은 있었지만 유의성은 없었다. 외양상으로 식염수 주사군의 정소에는 약간의 위축이 나타났으며, 백막이 정상적으로 보였다. 그러나 조직학적으로 정소 대부분에서 괴사가 발견되었으며, 헤마톡실린-에오신으로 거의 염색되지 않았다. 동일한 절편에서, 주사 부위의 정반대 부분은 비정상적인 세포층들이 염색되었다. 대부분의 세정관에서 미성숙한 생식세포들이 기질 막에서 분리되고, 내강 쪽으로 세포들이 떨어져 나간 것이 확인되었다. 본 연구는 정소내 고장성 식염수 직접 주사가 부속 생식기관에 정소절제와 유사한 테스토스테론 제거 효과를 유발할 수 있음을 확인하였다. 비록 심층적인 연구들이 더 요구되지만, 본 연구는 정소 내 고장성 식염수 직접 주사법이 비용이 덜 들고 덜 침습적이면서 정소절제술이나 화학적 거세와 거의 동일한 효용성을 가졌음을 시사한다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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