소장점막하조직은 콜라젠과 글리코스아미노글리칸 및 세포활성을 촉진하는 성장인자들로 구성되어 있다. 최근에는 이종이식의 면역 거부반응이 없는 생체물질로서 응용되고 있고 SIS에 함유되어 있는 성장인자는 전층 피부손상층을 치료하는데 중요한 역할을 한다고 알려져 있다. 우리는 본래의 SIS 쉬트와 아세트산으로 처리하여 팽윤시킨 SIS 쉬트를 제조하였고, 각각에 대해 1겹과 5겹의 SIS 쉬트를 제조하였다. 이를 SEM을 통해 표면 및 단면의 형태를 확인하였고, 증류수, 인산염 완충액, HBSS (Hank's balanced salt solution)완충액, 트리스 완충액, HEPES (N-[2-hydroxyethyl) piperazine-N'-(2-ethanesulfonic acid]) 완충액에서의 물 흡수성, pH에 따른 물 흡수성 그리고 시간에 따른 물 흡수성을 비교 실험하였다. 본래의 SIS 쉬트보다 산 처리된 SIS 쉬트가, 증류수보다는 완충액에서의 물 흡수성이 높음을 확인하였다. 중성 용액보다 산성과 염기성 용액에서 SIS 쉬트는 팽윤되어 더 많은 물을 흡수하였다. 또한, 증류수와 HEPES 완충액에서 시간에 따른 물 흡수성 실험을 한 결과 1일 이후부터 10일 동안 약 200%물을 지속적으로 흡수하였다. 이로써 SIS 쉬트와 산 처리된 SIS 쉬트가 창상 치료를 위한 드레싱제와 생분해성이식 재료로서 사용가능하리라 판단된다.
Bo Ram Lee;Sun A Ock;Mi Ryung Park;Min Gook Lee;Sung June Byun
한국동물생명공학회지
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제39권1호
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pp.2-11
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2024
Background: The small intestine plays a crucial role in animals in maintaining homeostasis as well as a series of physiological events such as nutrient uptake and immune function to improve productivity. Research on intestinal organoids has recently garnered interest, aiming to study various functions of the intestinal epithelium as a potential alternative to an in vivo system. These technologies have created new possibilities and opportunities for substituting animals for testing with an in vitro model. Methods: Here, we report the establishment and characterisation of intestinal organoids derived from jejunum tissues of adult pigs. Intestinal crypts, including intestinal stem cells from the jejunum tissue of adult pigs (10 months old), were sequentially isolated and cultivated over several passages without losing their proliferation and differentiation using the scaffold-based and three-dimensional method, which indicated the recapitulating capacity. Results: Porcine jejunum-derived intestinal organoids showed the specific expression of several genes related to intestinal stem cells and the epithelium. Furthermore, they showed high permeability when exposed to FITC-dextran 4 kDa, representing a barrier function similar to that of in vivo tissues. Collectively, these results demonstrate the efficient cultivation and characteristics of porcine jejunum-derived intestinal organoids. Conclusions: In this study, using a 3D culture system, we successfully established porcine jejunum-derived intestinal organoids. They show potential for various applications, such as for nutrient absorption as an in vitro model of the intestinal epithelium fused with organ-on-a-chip technology to improve productivity in animal biotechnology in future studies.
The radioactive $^{131}I$-rose bengal serial scintiphotography was performed in 62 patients with the hepatobiliary diseases and in 20 normal subjects. This approach permitted visualization of the hepatic uptake of $^{131}I$-rose bengal from the circulation and its excretion into the biliary trees and the intestines. In some of these patients, gallbladder function was examined, using eggs as a gallbladder constrictor. The time of maximum hepatic uptake was well correlated to the conventional biochemical liver function tests. In addition to $^{131}I$-rose bengal scintiphotography, $^{198}Au$-colloid scintiphotography was also performed to make comparison of these two tests. The results obtained were as follows: 1. In normal subjects, the maximum hepatic uptake of $^{131}I$-rose bengal occurred at $23{\pm}2.9$ minutes, the initial hepatic excretion at $34{\pm}5.1$ minutes, the visualization of the gallbladder at $29{\pm}5.7$ minutes and the intestinal visualization at $54{\pm}25.8$ minutes. The radioactivity in the gallbladder decreased to $10.7{\pm}5.0%$ one hour after the ingestion of eggs. 2. In the patients with cirrhosis of the liver, there was a delayed and decreased hepatic uptake. The maximun hepatic upake occurred at $43{\pm}12.9$ minutes. The differences in the results of uptake between the cirrhotic and the normal group were statistically significant. The initial hepatic excretion occurred at $60{\pm}18.5$ minutes and had tendency of delaying compared with the normal controls. The gallbladder was visualized in 13 of 16 cases (81%) and its visualization occurred at $49{\pm}14.6$ minutes with a tendency to be delayed compared with the normal controls. The intestinal visualization occurred at $63{\pm}15.8$ minutes and its delaying tendency was somewhat more prominent. 3. In patients with hepatitis, the maximum hepatic uptake occurred at $59{\pm}21.4$ minutes and was significantly delayed. The initial hepatic excretion occurred at $82{\pm}34.3$ minutes and the results revealed a delaying tendency. The gallbladder was visualized in 15 of 20 cases (75%) at $57{\pm}18.7$ minutes, which was significantly delayed. The Intestinal visualization was noted in all cases with marked delay. 4. In patients with obstructive jaundice, the maximum hepatic uptake was noted at $83{\pm}14.7$ minutes, showing the most significant delay. The hepatic excretion into biliary trees and intestines was not entirely noted in all cases except the only one case with gallbladder visualization. 5. In patients with cholelithiasis, the maximum hepatic upake and the initial hepatic excretion were slightly delayed with mean times of $39{\pm}11.2\;and\;48{\pm}17.1$ minutes respectively. The visualization of the gallbladder was demonstrated in 10 of 17 cases (59%) and occurred at $52{\pm}25.6$ minutes with a slight delay. The intestinal visualization occurred at $67{\pm}47.7$ minutes and was slightly delayed. $^{131}I$-rose bengal in the gallbladder remained high, $49.3{\pm}21.3%$, which suggested quantitatively decreased power of gallbladder constriction. 6. The time of the maximum hepetic uptake was correlated well to BSP retention and serum alkaline phosphatase ativity. However, the maximum hepatic uptake had no definite correlation with serum albumin, serum globulin, TTT, serum cholesterol, SGPT or SGOT. 7. In the diagnosis of the hepatobiliary diseases with jaundice, $^{131}I$-rose bengel serial scintiphotography has proved to be more useful than $^{198}Au$-colloid scintiphotography. With these results, it could be justified that $^{131}I$-rose bengal scintiphotography is an excellent diagnostic aid for dynamic hepatobiliary function studies in the clinical practice.
PARK CHUNG;CHOI YOON-HO;SHIN HYUN-JIN;POO HARYOUNG;SONG JAE JUN;KIM CHUL-JOONG;SUNG MOON-HEE
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제15권4호
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pp.855-858
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2005
The bioavailability of Ca is currently one of the most important topics in nutrition research and is correlated with gastrointestinal solubility. Thus, to increase the solubility of calcium, this study was undertaken to examine the effect of $\gamma$-PGA on intestinal Ca solubility. The calcium solubility increased when the amount of $\gamma$-PGA was increased, due to the inhibition of the formation of an insoluble Ca complex with phosphate. Therefore, when $\gamma$-PGA-500 (avg. MW 5,000 kDa) was added at 0.5 mg/ml, $75\%$ of the total Ca was soluble. The amount of soluble Ca uptake in the small intestine was investigated using Balb/c mice as an animal model system. The soluble Ca uptake in the mice orally administered with $\gamma$-PGA-500 (avg. MW 5,000 kDa) was significantly higher than that in the $\gamma$-PGA-l00 (avg. MW 1,000 kDa)-administered mice (P<0.05). Accordingly, these results strongly support the notion that the molecular size of $\gamma$-PGA is correlated with Ca solubility. The effects of other factors, such as casein phosphopeptide and vitamin D, on intestinal Ca absorption have also previously been investigated. Therefore, it is hoped that the present observations will help clarify the role of $\gamma$-PGA in Ca solubility and its industrial application as an additive.
It is essential to clone the peptide transporter in order to obtain better understanding of its molecular structure, regulation, and substrate specificity. Characteristics of an endogenous peptide transporter in oocytes were studied along with expression of an exogenous proton/peptide cotransporter from rabbit intestine. And further efforts toward cloning the transporter were performed. The presence of an endogenous peptide transporter was detected in Xenopus laevis oocytes by measuring the uptake of $0.25\;{\mu}M\;(10\;{\mu}Ci/ml)\;[^3H]-glycylsarcosine$ (Gly-Sar) at pH 5.5 with or without inhibitors. Uptake of Gly-Sar in oocytes was significantly inhibited by 25 mM Ala-Ala, Gly-Gly, and Gly-Sar (p<0.05), but not by 2.5 mM of Glu-Glu, Ala-Ala, Gly-Gly, Gly-Sar and 25 mM glycine and sarcosine. This result suggests that a selective transporter is involved in the endogenous uptake of dipeptides. Collagenase treatment of oocytes used to strip oocytes from ovarian follicles did not affect the Gly-Sar uptake. Changing pH from 5.5 to 7.5 did not affect the Gly-Sar uptake significantly, suggesting no dependence of the endogenous transporter on a transmembrane proton gradient. An exogenous $H^+/peptide$ cotransporter was expressed after microinjection of polyadenylated messenger ribonucleic acid $[poly\;(A)^+-mRNA]$ obtained from rabbit small intestine. The Gly-Sar uptake in mRNA-injected oocytes was 9 times higher than that in water-injected oocytes. Thus, frog oocytes can be utilized for expression cloning of the genes encoding intestinal $H^+/peptide$ cotransporters. Using the technique size fractionation of mRNA was sucessfully obtained.
목적 : 건강검진 등을 목적으로 시행된 무증상의 성인에서 대장 섭취는 매우 자주 관찰되나 대장선종 및 암종에서 FDG 섭취가 보고되어 생리적인 FDG 섭취와 구별이 쉽지 않았다. 이에 저자들은 무증상 성인을 대상으로 FDG-PET을 시행하여 그 섭취 패턴과 섭취 강도를 조사하고 대장내시경 소견과 비교하였다. 대상 및 방법 : FDG-PET과 대장내시경을 모두 시행한 무증상인 64명($27{\sim}87$세, 남:여=31:33) 을 대상으로 하였다. FDG 섭취 양상은 focal, segmental, diffuse세 그룹으로 나누고 모든 환자에 대해 최대 SUV값을 구하고 병소의 크기 및 조직학 소견과 비교하였다. 결과 : Diffuse 53.1%, Segmental 26.5%, Focal 20.3%의 섭취양상을 보였으며, Diffuse 양상을 보이면 대부분에서 정상이었고 선종이 소수 발견되었으나 크기가 작았다. Focal 양상의 환자에서는 선종 또는 기타 병리 소견 등의 양성 대장내시경 결과를 더 많이 보였고 다른 두 섭취 양상에서보다. 발견된 선종의 크기가 컸다. 대장 섭취정도를 SUV로 측정하였을 때 내시경 음성인 환자들은 선종 및 기타 병리소견이 있는 내시경 양성환자보다 SUV가 낮았으나 선종의 크기에 따른 SUV의 차이는 없었다. 결론: 무증상 환자에서 FDG-PET를 시행하였을 때 본 연구에서 제시된 대장 섭취 패턴과 섭취강도에 따른 내시경 결과와의 관계가 대장 선종 및 기타 병소를 진단하거나 내시경 등의 다음 검사로의 진행 결정에 일부 역할을 할 것으로 기대된다.
Cloning the gene encoding a dipeptide transporter is necessary for understanding the absorption mechanism of peptides and peptide-like drugs in the gastrointestinal tract. Functional expression of a dipeptide transporter after microinjection into Xenopus laevis oocytes was performed using the mRNA purified from human intestinal HT-29 cells. Fifty nanoliters of purified mRNA (1 mg/mL) were microinjected into healthy oocytes followed by incubation for 4 days in order to express a dipeptide transporter. Functional expression was determined by a uptake assay using 10 Ci/mL $[^3H]-glycylsarcosine$, a dipeptide substate of the transporter. Seasonal variability and batch-to-batch variability were greater in summer. The usage of beveled micropipettes improves viability of oocytes at 4 days after microinjection. Expression of a dipeptide transporter in oocytes after microinjection of mRNA obtained from HT-29 cells was significantly larger than those after microinjection of water or mRNA obtained from the rabbit intestine.
The present study aimed to investigate the in-vitro characteristics of N4-amino acid derivatives of cytarabine for the oral delivery of cytarabine. After the synthesis of L-Ile-cytarabine, L-Leu-cytarabine and L-Arg-cytarabine, the gastrointestinal stability of each prodrug was examined using artificial gastric juice and intestinal fluids. The cellular uptake characteristics of prodrugs were also examined in Caco-2 cells. While L-Ile-cytarabine and L-Leu-cytarabine appeared to be stable in all the tested biological media during 4-hr incubation, L-Arg-cytarabine was rapidly disappeared within 5 min. Accordingly, the cellular uptake of L-Ile-cytarabine and L-Leu-cytarabine was significantly higher than that of its parent drug, cytarabine in Caco-2 cells but the cellular uptake of L-Arg-cytarabine was similar to that from its parent drug. The cellular uptake of L-Ile-cytarabine and L-Leu-cytarabine appeared to be saturable as drug concentration increased from 0.4 to 4 mM. Collectively, L-Ile-cytarabine and L-Leu-cytarabine could be promising candidates to improve the oral absorption of cytarabine via a saturable transport pathway.
Kim, Ok-Seon;Lee, Yong-Bok;Oh, In-Joon;Koh, Ik-Bae;Lee, Yeong-Woo
Journal of Pharmaceutical Investigation
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제24권3호spc1호
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pp.11-18
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1994
We have studied the iron uptake by the purified brush-border membrane vesicles (BBMVs) to determine the effect of fructose on the absorption of iron. BBMVs were prepared by the modified calcium precipitation method, The degree of purification was routinely assessed by the marker enzyme, alkaline phosphatase, and the functional integrity was tested by $D-[1-^3H]glucose$ uptake. The appearance of membrane vesicles was shown by transmission electron microscopy (TEM). The uptakes of complexes of labeled iron $[^{59}Fe]$ with fructose and ascorbate were measured with a rapid filtration technique, The uptake rate and pattern of the two iron-complexes, Fe(III)-fructose and Fe(III)-ascorbate, were also observed. A typical overshooting uptake of D-glucose was observed with peak value of $2{\sim}3$ times higher concentration than that at equilibrium. This result was similar to other studies with BBMVs. TEM showed that the size of BBMVs was uniform and we can hardly find any contaminants, Fe(III)-fructose has the higher value of $V_{max}$ and the lower value of Km than those of Fe(III)-ascorbate, respectively. It may be concluded that D-fructose is more effective in promoting the iron absorption than ascorbate.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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